论文摘要
凋亡是颅脑创伤后神经细胞死亡的一种主要方式，但关于创伤后细胞凋亡发生的确切机制目前尚不清楚。本研究旨在通过动物实验的方法，观察凋亡相关基因（survivin和caspase-3）在脑创伤后的表达变化及其与细胞凋亡之间的关系，以探讨它们在颅脑创伤中的作用。目的：观察颅脑创伤后伤侧脑组织Survivin和Caspase-3蛋白的表达和Caspase-3活性的变化及其与细胞凋亡的关系，探讨它们在颅脑创伤后细胞凋亡中的作用。方法：选用Wistar大鼠42只，随机分为假手术对照组（n=6）及颅脑创伤组（6h，1、2、3、5、7d，每组6只），共7组。采用自由落体法建立大鼠脑创伤模型，分别于伤后不同时间点采集标本并应用流式细胞仪检测神经细胞凋亡情况，应用免疫组织化学法检测Survivin和Caspase-3蛋白表达变化，利用Caspase-3分光光度法检测试剂盒测定Caspase-3活性变化。数据采用Spss10.0软件处理，统计处理组间比较采用one-way ANOVA，相关性分析采用Spearman法。P＜0.05为差异有显著性。结果：1、颅脑创伤后6h即发现神经细胞凋亡率明显升高，2d达到高峰，并持续在较高水平，至伤后7d仍显著高于对照组水平；2、Survivin和Caspase-3蛋白的表达在颅脑创伤后均升高。Caspase-3蛋白表达在伤后6h即升高，1d达到高峰，而后表达逐渐下降，7d时基本降至对照组水平；Survivin蛋白在伤后3d可见少量表达，并逐渐升高，7d达高峰；3、Caspase-3活性在颅脑创伤后早期即显著升高，1d达到高峰，此后逐渐降低，至7d时仍明显高于对照组水平。结论：1、颅脑创伤后存在着广泛的细胞凋亡现象，且凋亡细胞主要分布在创伤灶周边的脑组织中；2、颅脑创伤后Caspase-3蛋白表达及其活性明显升高，达峰时间早于细胞凋亡达峰时间，并且两者间存在着正相关性，即随着Caspase-3活性的升高，细胞凋亡的数目也升高，这说明Caspase-3蛋白的高表达及活性的增加对颅脑创伤后细胞凋亡起着重要的促进作用；3、颅脑创伤后早期并无Survivin表达，但随着受伤时间延长，Survivin表达逐渐增高，Caspase-3蛋白的表达及其活性也随之逐渐下降，两者间存在负相关性，这说明在颅脑创伤后不但存在Survivin高表达，而且其可通过抑制Caspase-3的表达和降低其活性来减少细胞凋亡，发挥脑保护作用。
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