缺血后处理对兔缺血再灌注损伤心肌细胞NF-κB及ICAM-1表达的影响

论文摘要

目的:建立缺血后处理动物模型,并探讨缺血后处理对兔心肌缺血再灌注损伤保护作用的可能机制。方法:健康成年新西兰兔40只随机分为三组:对照组（假手术组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPTC组）。每组按再灌注时间长短再分为四亚组:0.5小时组、1小时组、2小时组、3小时组。对照组（假手术组）8只,不同时间点每亚组2只;I/R组16只,不同时间点每亚组4只;IPTC组16只,不同时间点每亚组4只。假手术组:开胸暴露心脏后找到左冠前降支（LAD）穿线做套环,但不收紧结扎线;I/R组:收紧结扎线,LAD缺血30min,再灌注0.5-3小时;IPTC组:LAD缺血30min后给予30秒再灌注、再缺血,重复4次,然后再灌注0.5-3小时。建立动物模型时,分别于缺血前、结扎30min后、开放1h及开放3h四个时间点抽血检测肌酸激酶（CK）、肌钙蛋白I（cTnI）,将缺血心肌、梗死心肌分开称重。处死试验动物后,取缺血再灌注区的心肌组织以免疫组织化学法检测NF-κB和ICAM-1的表达情况。运用全自动图像分析系统对免疫组化结果进行分析处理,分别比较假手术组、I/R组和IPTC组不同时间点NF-κB、ICAM-1的表达数值,以SPSS11.5统计软件进行统计学分析。分析NF-κB和ICAM-1的表达相关性。结果:1.CK、cTnI及心梗面积的比较:I/R组与对照组相比再灌注1小时后CK、cTnI明显升高（P＜0.05）,IPTC组与I/R组相比1小时后CK、cTnI明显降低（P＜0.05）;IPTC组与I/R组相比,心梗面积明显缩小（P＜0.05）。2.NF-κB的表达情况:假手术组心肌细胞未见NF-κBp65阳性表达;I/R组NF-κBp65表达明显增强（P＜0.01）,且表达强度随时间逐渐增高,再灌注2小时达高峰,随后下降;IPTC组NF-κBp65表达较I/R组明显下降（P＜0.01）。3.ICAM-1的表达情况:假手术组心肌细胞未见ICAM-1阳性表达;I/R组ICAM-1表达明显增强（P＜0.01）,且表达强度随时间逐渐增高,再灌注3小时表达最强;IPTC组ICAM-1表达较I/R组明显下降（P＜0.01）;3.NF-κB表达与ICAM-1表达呈现同步性,而NF-κB的表达高峰时间先于ICAM-1的表达。结论:1.缺血后处理能抑制缺血再灌注心肌细胞的NF-κB和ICAM-1表达;2.NF-κB可能通过调控ICAM-1的表达在缺血再灌注损伤中发挥作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 实验动物及分组
• 1.2 仪器设备
• 1.3 试剂和药品
• 1.4 实验动物模型的建立
• 1.5 NF-κ Bp65免疫组化染色步骤
• 1.6 ICAM-1免疫组化染色步骤
• 1.7 显微镜下图像分析
• 1.8 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 各组肌酸激酶的变化情况
• 2.2 各组肌钙蛋白Ⅰ的变化情况
• 2.3 各组动物心肌缺血面积及心梗面积的比较
• 2.4 缺血区心肌组织NF-Κ B免疫组化染色结果
• 2.5 各组NF-κ B表达PU值比较
• 2.6 各组ICAM-1免疫组化染色结果
• 2.7 各组ICAM-1表达PU值比较
• 2.8 NF-κ B与ICAM-1的关系
• 第三章 讨论
• 1. 缺血后处理与心肌缺血再灌注损伤
• 2. NF-κ B与ICAM-1在心肌缺血再灌注损伤中的作用
• 3. NF-κ B与ICAM-1在缺血后处理心肌的表达情况分析
• 4. 缺血后处理的临床应用前景
• 第四章 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间的主要研究成果