水蛭提取液对P38丝裂原活化蛋白激酶介导的人视网膜色素上皮细胞跨膜信号转导途径的影响

论文摘要

目的研究水蛭提取液对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 mitogen activated proteinkinase,P38MAPK)介导的人视网膜色素上皮细胞(hRPE)跨膜信号转导途径的影响。方法(1)购买原代人视网膜色素上皮细胞,复苏后进行体外传代培养。(2)根据前期实验数据,选择0.5NIHU/ml的凝血酶作为诱导浓度,64mg/ml的水蛭提取液作为药物浓度;水蛭提取液与凝血酶分别(或共同)孵育hRPE30分钟后,采用流式细胞术及免疫细胞化学方法检测孵育hRPE细胞内P38MAPK的表达。结果(1)根据各组的P38MAPK流式荧光量比较发现凝血酶组(6.4417±0.072)与正常对照组(5.4567±0.1825)相比,荧光量升高,有显著性差异(P<0.01),水蛭提取液组(4.4483±0.2015)与正常对照组相比,荧光量下降,有显著性差异(P<0.01),合药组(4.1433±0.068)与凝血酶组相比,荧光量下降,有显著性差异(P<0.01)。(2)根据各组P38MAPK免疫细胞化学平均光密度值比较发现凝血酶组(1.195±0.0226)与正常对照组(1.055±0.0187)相比,OD值上升,有显著性差异(P<0.01),水蛭提取液组(0.7567±0.071)与正常对照组相比,OD值下降,有显著性差异(P<0.01),合药组(0.555±0.065)与凝血酶组相比,OD值下降,有显著性差异(P<0.01);结论水蛭提取液能抑制hRPE的增殖,其机制与P38MAPK介导的信号转导通路有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 常用中英文缩略语表
• 1 引言
• 2 实验材料
• 2.1 实验试剂
• 2.2 实验器材
• 2.3 实验主要试剂配制方法
• 2.4 中药水蛭提取液的制备
• 2.5 细胞来源
• 3 实验方法
• 3.1 人RPE细胞的体外培养
• 3.1.1 人RPE细胞的复苏
• 3.1.2 人RPE细胞的传代培养
• 3.2 人RPE细胞的鉴定
• 3.3 水蛭提取液对P38MAPK介导的人RPE细胞跨膜信号转导途径的影响
• 3.3.1 实验分组
• 3.3.2 流式荧光检测水蛭提取液对hRPE细胞P38MAPK表达的影响
• 3.3.3 免疫细胞化学检测水蛭提取液对hRPE细胞P38MAPK表达的影响
• 3.4 统计方法
• 4 实验结果
• 4.1 人RPE细胞的鉴定结果
• 4.2 流式荧光检测水蛭提取液对hRPE细胞P38MAPK表达的影响
• 4.3 免疫细胞化学检测水蛭提取液对hRPE细胞P38MAPK表达的影响
• 5 讨论
• 5.1 PVR的研究进展
• 5.1.1 中医学对增生性玻璃体视网膜病变的认识
• 5.1.2 现代医学对PVR的认识
• 5.1.3 药物抑制PVR的研究现状
• 5.2 水蛭及其有效成分的研究
• 5.3 凝血酶的细胞效应
• 5.4 水蛭提取液对P38MAPK介导的人视网膜色素上皮细胞跨膜信号转导途径的影响
• 5.4.1 信号转导与PVR
• 5.4.2 MAPK家族与细胞增殖的关系
• 5.4.3 水蛭提取液对P38MAPK介导的人视网膜色素上皮细胞跨膜信号转导途径的影响
• 6 结论
• 7 问题与展望
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 附件1 在读期间公开发表的学术论文专著及科研成果