静脉移植骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠心脏的保护作用

论文摘要

传统药物及现代心脏介入治疗等都能够挽救缺血心肌,但不能从根本上修复已坏死的心肌组织。细胞移植可以替代、修复或改善受损心肌的生物学功能,是近年来心血管病研究领域的热点之一。骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的可塑性及多向分化潜能为心肌再生医学带来了希望,大量研究已经证实干细胞移植可以缩小梗死面积,改善心脏功能。最新研究证实MSCs有在损伤期向损伤器官归巢的特性,适时适量移植MSCs可能有更多的细胞迁移至梗死心肌处,从而达到缩小梗死面积,改善心脏功能的目的。我们已往的研究发现,心肌梗死后2周可能是MSCs移植的最佳时机。目前的移植方式主要有开胸直视下心外膜移植,经导管心内膜下注射移植,经冠状动脉接种于损伤的心肌以及静脉内注射移植。经静脉途径进行细胞移植是一种简易、可行、实用、无创的方法,但是治疗效果不肯定,争议较大。MSCs移植方式和移植时机是干细胞治疗心肌梗死疗效的重要影响因素,但是,移植细胞数量的选择也至关重要,能否有足量的细胞到达梗死区直接影响到治疗效果。目的:对比研究经尾静脉和心外膜直视下注射移植骨髓间充质干细胞（MSCs）在心肌梗死组织中的迁移、分化以及对心肌梗死大鼠左心功能的影响,同时探讨不同浓度细胞移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响。方法与结果:第一部分:结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌梗死模型,采用同种异体MSCs体外分离、纯化、培养和标记,在梗死后2周,A组经尾静脉植入MSCs（细胞数约为5×106）,B组心外膜直视下注射MSCs（细胞数约为5×106）,C组尾静脉注入等量DMEM培养液作为对照。4周后测定心功能,并行免疫组织化学检测。结果表明:MSCs移植组在梗死心肌组织中可以观察到DAPI标记细胞存在,免疫组化显示阳性标记细胞a-Actin肌动蛋白检测阳性。与对照組相比,A和B组左心功能明显改善（P均<0.05）,A和B组梗死面积明显缩小[分别为（45±2）%,（40±4）%和（41±3）%,P<0.05]。第二部分:40只SD大鼠随机分为移植A、B、C、D组和对照组（各组n=8）,将DAPI标记的MSCs于大鼠心肌梗死后2w经尾静脉移植到大鼠体内。A组:细胞数5×105、B组:细胞数1×106、C组:细胞数5×106、D组:细胞数1×107、对照组:注入等量培养基。4周后测定左心功能并行免疫组织化学检测。结果显示:移植组心肌组织中均可以观察到DAPI标记细胞存在,标记阳性细胞a-Actin肌动蛋白检测阳性。与对照组相比,移植A组左心功能无明显改变（P>0.05）,移植B、C、D组左心功能明显改善（P均<0.05）,C和D组优于B组（P<0.05）。结论:1骨髓间充质干细胞经静脉移植和心外膜植入都能够归巢至梗死心肌组织,可能通过改善左心收缩功能对梗死大鼠的心脏具有保护作用。2不同剂量的骨髓间充质干细胞对心肌梗死大鼠的心功能的影响不同,心功能的改善与移植细胞浓度之间存在一定的量效关系。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 1 细胞治疗-胚胎干细胞和成体干细胞
• 2 骨髓间充质干细胞与心肌梗死的治疗
• 正文
• 1 骨髓间充质干细胞不同移植方法对心肌梗死大鼠心脏的保护作用
• 1.主要材料和试剂
• 2.实验方法
• 3.结果
• 4.讨论
• 5.结论
• 2 不同浓度骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响
• 1 主要材料和试剂
• 2 实验方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 小结
• 附图
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢