人参总皂甙对大鼠缺血再灌注后神经元损伤的保护及作用机制的研究

论文摘要

目的 随着对急性脑梗塞溶栓疗法的开展,再灌注损伤的问题日益受到广大神经病学者的重视,自1985年,对于再灌注损伤的发生机制及其保护措施的研究风靡至今。本课题利用大鼠脑缺血再灌注模型,观察人参总皂甙对缺血再灌注后脑组织损伤的影响,目的是探讨人参总皂甙对大鼠缺血再灌注脑组织的保护作用机制。 方法将健康成年Wistar大鼠40只随机分为5组:正常对照组、假手术组、脑缺血再灌注非抬疗组、缺血再灌注人参总皂甙治疗1次组（治疗组1）、缺血再灌注人参总皂甙治疗连用3天组（治疗组2）。采用阻断大鼠左侧大脑中动脉（MCA）血流2小时,再灌注48小时制成局灶性脑缺血再灌注模型。缺血再灌注治疗组1于再灌注开始前,经腹腔注入人参总皂甙（50mg/Kg）1次,48小时后断头取脑;缺血再灌注治疗组2连续3天腹腔注射人参总皂甙（50mg/Kg）,72小时后断头取脑;缺血再灌注非治疗组和假手术组给予等量生理盐水腹腔注射,48小时后断头取脑。石蜡切片行Nissel、GABA、和TUNEL染色,计算凋亡细胞数及测量GABA阳性反应细胞。 结果 缺血非治疗组神经细胞数量明显减少,部分神经细胞胞体皱缩,核固缩,具有凋亡细胞的某些光镜特征。治疗组仅见少量神经细胞变性,胞体变形缩小。 细胞凋亡结果:TUNEL 染色显示假手术组脑组织中可见个别散在凋亡细胞,表现细胞核呈棕色或棕褐色着染;缺血再灌注非治疗组脑组织的海马CA1区可见较多的散在的TUNEL染色阳性细胞;治疗组有散在的少量凋亡细胞。凋亡神经元细胞数统计分析:缺血再灌注非治疗组与假手术组比较p<0.01,治疗山东大学硕士学位论文组l与缺血再灌注非治疗组比较p<0.01,治疗组2与缺血再灌注非治疗组比较p<0.01,治疗组2与治疗组l比较p<0.01。 脑组织中GABA的表达:免疫组化假手术组海马CA;区细胞内可见少量GABA的表达;脑缺血再灌组再灌注后海马CA:区细胞内GABA的表达较假手术组稍有增多;人参总皂贰治疗组再灌注后海马CA;区GABA的表达较缺血再灌注组明显增高。分析阳性反应细胞数:缺血再灌注非治疗组与假手术组比较P<0.ol,治疗组l与缺血再灌注非治疗组比较p<0.01,治疗组2与缺血再灌注非治疗组比较p<0.01,治疗组2与治疗组1比较p<0.01。 神经功能评分统计分析:治疗组l与缺血再灌注非治疗组、治疗组2与缺血再灌注非治疗组比较p<0.01,治疗组2与治疗组1比较p<0.05,均有统计学意义。 结论人参总皂贰能明显增强局灶性脑缺血再灌注大鼠海马神经元GABA的表达,抑制神经细胞凋亡,从而发挥其神经营养和神经保护作用。 关键词人参总皂贰;脑缺血再灌注;细胞凋亡;TIJNEL;GABA西

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