不同芦荟品种快繁体系的优化及活性成分分析

论文摘要

芦荟具有极高的医疗、美容和保健价值,其特有的活性成分工业需求量非常大。芦荟产业已经形成规模化、质量标准化和高科技化的产业特征。研究不同品种芦荟的离体繁育体系优化技术及其次生代谢系统和活性成分含量分析对发展芦荟生物技术产业具有重要的理论和实践指导意义。本文以三种极高经济价值且易在我国推广开发的芦荟为材料,研究不同取材时期和取材部位芦荟愈伤组织诱导的差异,筛选芦荟快繁各环节最佳培养基,同时对其活性成分进行测定分析,数据的分析和整理由SPSS软件程序来进行,得出了芦荟快繁体系各阶段培养条件的优化参数和不同培养类型芦荟的活性成分分析结果:对于芦荟品种库拉索,一年中最佳快繁的取材时期为3月;茎尖下第二段为最佳取材部位。2-3片叶所包茎尖,流水冲洗30分钟,70%酒精消毒10秒,0.1%升汞消毒4+2分钟,可有效防止污染,灭菌效果最佳;通过培养基配方的比较实验,对于3种芦荟的芽诱导培养的最佳配方为:MS+6-BA1.0me/L+NAA0.1mg/L+Vc1g/L,成芽率达到89%以上;分化培养对于不同品种芦荟差异很大,优化的分化培养基分别为库拉索MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.1mg/L,木立MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L,中华MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L,优化后的分化系数分别为5.78、5.13、6.1;不同品种芦荟的最佳生根培养基,分别为库拉索芦荟MS+IBA3.0mg/L,木立MS+NAA2.0mg/L和MS+IBA2.0mg/L,中华MS+NAA3.0mg/L和MS+IBA3.0mg/L,生根率都能达到100%;在进行次生代谢研究中,诱导愈伤最佳配方为NAA20mg/L+KT0.1mg/L,B5培养基（PH=6,糖浓度2%）为较佳悬浮培养增殖培养基;对库拉索芦荟、木立芦荟和中华芦荟的温室苗和愈伤组织采用醋酸镁-甲醇比色法和蒽酮比色法分别测定了芦荟活性成分中蒽醌和可溶性总糖的含量并加以分析比较。结果表明无论温室苗还是愈伤组织中,库拉索芦荟都为提取蒽醌的优良品种,总蒽醌含量分别达到250.709ug/ml和30.434ug/ml;而中华芦荟为提取糖的首选品种,其温室苗和愈伤组织可溶性总糖含量分别达到8751ug/ml和706ug/ml;

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 1 引言
• 2 文献综述
• 2.1 芦荟组培快繁研究概述
• 2.1.1 植物组培快繁研究背景
• 2.1.2 芦荟组织培养的研究概述
• 2.2 芦荟愈伤组织诱导及次生代谢系统研究概述
• 2.2.1 基于细胞工程技术直接产生植物次生代谢产物的研究背景
• 2.2.2 芦荟愈伤组织诱导再生研究概述
• 2.2.3 芦荟次生代谢物化学成分及其活性物质作用研究概述
• 2.3 芦荟活性成分的分析研究方法概述
• 3 材料和方法
• 3.1 材料及药品仪器
• 3.2 试验技术路线
• 3.3 试验设计和方法
• 3.3.1 芦荟组培体系构建
• 3.3.1.1 启动培养（芦荟芽诱导阶段）
• 3.3.1.2 分化培养（芦荟芽分化阶段）
• 3.3.1.3 生根培养
• 3.3.1.4 练苗移栽
• 3.3.1.5 培养条件
• 3.3.2 次生代谢体系
• 3.3.2.1 愈伤组织诱导
• 3.3.2.2 悬浮培养
• 3.3.3 活性成分含量测定
• 3.3.3.1 醋酸镁-甲醇比色法测游离蒽醌和集合蒽醌的含量
• 3.3.3.2 蒽酮比色法测定芦荟糖类物质的含量
• 4 结果和分析
• 4.1 芦荟组培体系构建
• 4.1.1 启动培养（芦荟芽诱导阶段）
• 4.1.2 分化培养（芦荟芽分化阶段）
• 4.1.3 生根培养
• 4.1.4 练苗移栽
• 4.1.5 愈伤组织的诱导
• 4.1.6 悬浮培养
• 4.2 成分测定
• 4.2.1 蒽醌总量的测定
• 4.2.2 可溶性总糖的测定
• 5 讨论
• 5.1 对植物组培技术的探讨
• 5.1.1 采用不同途径进行组培快繁
• 5.1.2 对灭菌方式的探讨
• 5.2 对芦荟次生代谢系统的探讨
• 5.2.1 对愈伤组织的诱导
• 5.2.2 对悬浮培养的探讨
• 5.3 对芦荟活性成分开发的探讨
• 6 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 个人简历