辛岩（青岛市传染病医院检验科266033）
【摘要】目的分析自身免疫性肝病与病毒性肝病患者血清中自身抗体检测的诊断应用方法采用间接免疫荧光法（ANA、ASMA、AMA），免疫印迹法（抗AMA-M2抗体、抗LC-1抗体、抗SLA/LP抗体、抗SSA/Ro52抗体）检测自身免疫性肝病和病毒性肝病中出现的自身抗体，并对检验结果进行分析。结果1591份血清中自身抗体阳性358例，阳性率22.5%，ANA阳性226例，阳性率14.20%;ASMA阳性26例，阳性率1.63%；AMA阳性63例，阳性率3.96%；抗AMA-M2抗体阳性50例，阳性率3.14%；抗LC-1抗体阳性3例，阳性率0.19%；抗LKM-1抗体阳性1例，阳性率0.06%；抗SLA/LP抗体阳性1例，阳性率0.06%；结合临床资料分析，诊断自身免疫性肝病AIH32例，阳性率2.01%；诊断PBC61例3.83%；诊断PSC0例。抗核抗体滴度，在自身免疫性肝病以高滴度≥1:320水平出现为主，而病毒性肝病以低滴度＜1：100为主。总体免疫性肝病自身抗体阳性率59.1%，明显高于病毒性肝病10.3%。另外6例患者出现AMA-M2抗体与抗LC-1抗体合并阳性,2例抗LKM-1抗体和LC-1抗体合并阳性，表明自身抗体在自身免疫性肝病之间有重叠现象。结论自身抗体的检测对自身免疫性肝病和病毒性肝病的临床鉴别诊断和治疗有重要的临床意义。
【关键词】自身抗体自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化
【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）29-0171-02
随着检验水平的提高，约有10%-20%病毒感染指标阴性患者，不再诊断为病毒性肝炎。自身免疫性肝病的发现率却逐渐在慢性肝病中引起了临床重视。自身免疫性肝病是一组病因和发病机理尚不完全清楚，但多数认为和自身免疫有关的肝脏疾病。其包括：自身免疫性肝炎（AIH），原发性胆汁性肝硬化（PBC），原发性硬化性胆管炎（PSC）。而病毒性肝病主要是通过乙肝病毒刺激机体免疫应答而导致的肝细胞损害。它包括：慢性乙型肝炎（CHB），肝硬化（LC）,肝癌（HCC）。本研究目的对自身免疫性肝病与病毒性肝病患者血清中出现自身抗体进行分析，探讨自身抗体在鉴别两者免疫学之间的关系，从而为临床鉴别诊断和治疗上提供一种具有特异性的血清学指标。
1.材料与方法
1.1研究对象
采集2011年12月至2012年8月我院门诊及住院肝病患者1591例标本。对自身抗体阳性358例病例查阅资料，诊断AIH32例，PBC61例，CHB160例，LC71例，HCC34例。其中男121例，女性237例,年龄从27至62岁。自身免疫性肝病参照国际自身免疫性肝炎组修订的评分标准[1]，美国肝病学会原发性胆汁性肝硬化指导建议[2]。病毒性肝病诊断标准符合2000年9月西安会议规定的诊断标准[3]。
1.2方法
1.2.1检测自身抗体及其滴度：主要试剂来源与技术由HOB公司实验室提供。
1.2.2统计学分析应用SPSS16.0统计学软件，计量资料x-±s表示，采用t检验；计数资料以例数或百分率进行描述，应用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1两种肝病患者血清自身抗体滴度水平分布
自身免疫性肝病和病毒性肝病自身抗体滴度检测，两组存在显著性差异（P<0.05）。自身免疫性肝病ANA阳性93例，患者以高滴度≥1：320为主，阳性率59.14%：病毒性肝病ANA阳性61例患者以低滴度<1:100为主，阳性率68.85%。见表1
表1两种肝病患者血清自身抗体ANA滴度水平分布
类别＜1:100≥1:100≥1:320≥1:6401:1000合计
自身免疫性肝病0(0.0)25(26.88%)55(59.14%)9(9.68%)4(4.30%)93
病毒性肝病42(68.85%)16(26.23%)3(4.91%)0(0.0)0(0.0)61
合计42415894154
2.2两种肝病患者血清自身抗体检测结果
1591份血清中自身免疫性肝病中诊断AIH32例三种荧光ANA阳性26例ASMA阳性17例，AMA阳性5例，荧光率分别为81.25%，53.12%，15.62%。诊断PBC61例，三种荧光ANA阳性55例，ASMA阳性8例，AMA阳性58例，荧光率分别为90.16%，13.11%，95.08%。PSC样本量少见。病毒性肝病中诊断CHB160例荧光ANA阳性29例，荧光率18.12%，诊断LC71例荧光ANA阳性14例，荧光率19.71%，诊断HCC34例荧光ANA阳性102例，荧光率9.41%。由表2可看出ANA,ASMA,AMA三种荧光在自身免疫性肝病中诊断AIH中荧光ANA阳性率较高占81.25%，诊断PBC中两种荧光ANA,AMA阳性率较高分别占90.16%，95.08%，在病毒性肝病中的诊断荧光阳性仅见ANA一种荧光，其它两种荧光未见。免疫印记法中AMA-M2抗体在PBC诊断中阳性率较高占80.32%。对临床有诊断意义。见表2
表2两种肝病三种荧光率及自身抗体检测结果比较例%
类别例数ANAASMAAMASLA/LPLKMLC-1AMA-M2
AIH3226(81.25%)17(53.12%)5(15.62%)1(3.12%)1(3.12%)3(9.37%)1(3.12%)
PBC6155(90.16%)8(13.11%)58(95.08%)00049(80.32%)
CHB16029(18.12%)000000
LC7114(19.71%)000000
HCC34102(9.41%)000000
2.3AIH和PBC的荧光模型
自身免疫性肝病中ANA核型特征显著，AIH中多以颗粒型、均质型常见，PBC中多以胞浆颗粒型、核仁型及着丝点型常见。同时核型对应的靶抗原相等，对临床有一定的诊断价值。
表3ANA阳性的AIH和PBC患者的荧光模型
类别均质型颗粒型核仁型核点型着丝点型核膜型胞浆颗粒型
AIH264(15.38%)12(46.15%)2(7.69%)0(0.0)3(11.53%)0(0.0)5(19.23%)
PBC550(0.0)5(9.09%)10(18.18%)2(3.63%)7(12.72%)3(5.45%)28(50.9%)
3.讨论
自身抗体是机体正常的生理现象，但反映过度会导致自身免疫性疾病的发生，病毒感染主要通过机体对病毒的免疫应答而导致的肝细胞的损害[4]。
本文研究自身免疫性肝病和病毒性肝病自身抗体的相关性检测结果显示：自身免疫性肝病中ANA总阳性检出率（59.1%）明显高于病毒性肝病（10.3%）。P＜0.05两组疾病抗体之间差异有统计学意义。临床结果分析：AIH患者32例，阳性率2.01%，其自身抗体ANA,SMA，AMA阳性率分别是81.25%，53.12%，15.62%。荧光核型以颗粒型和均质型为主。在AIH患者中有15例患者合并出现高滴度的ANA,SMA阳性，结合临床资料分析[5-6]符合I型AIH诊断。占AIH的72.4%，与国内外报道相近[7]。LKM-1和LC-1抗体是Ⅱ型AIH的标志抗体，抗LKM-1抗体自身靶抗原为细胞色素单氧化酶P450ⅡD6（CYP2D6），抗LC-1抗体所识别的自身抗原是亚氨甲基转移酶环脱氨酶。研究中有2例抗LKM-1和LC-1合并阳性，2例抗LC-1阳性，占Ⅱ型AIH的10.3%，较欧洲学着报道低（20.0%）[8]，临床上后期均发展为肝硬化，抗SLA/LP抗体被公认为Ⅲ型AIH的标志抗体。PBC患者61例，阳性率3.83%。血清中自身抗体以AMA为主。ANA的阳性率为95.08%。荧光核型以胞浆颗粒型50.9%，核仁型18.18%，着丝点12.72%为主。高滴度的AMA是PBC主要血清学指标。AMA可被分为M1-M9共9个亚型，其中M2抗体对PBC诊断最具特异性[9]。自身免疫性肝病患者常伴有ANA和抗Ro52抗体阳性，荧光核型为多种核型，ENA多肽酶谱抗体阳性常提示同时存在其他自身免疫病，经临床资料分析，患者合并干燥综合征，说明存在着重叠综合症。
自身免疫性肝病的发病机制有别于病毒性肝病，临床上治疗两种疾病方法不同，自身免疫性肝病常给予激素等免疫抑制剂治疗，而病毒性肝病常给予干扰素等治疗，如果两种疾病给予相反的治疗会加重原有的病情。因此，在为患者抗病毒治疗前先要排除自身免疫性肝病，大多数自身免疫性肝病伴有特征性自身抗体谱。注重自身抗体的检测对于明确诊断自身免疫病肝病有着重要的临床意义。
参考文献
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