神经节苷脂对大鼠局灶性脑缺血再灌注后FADD，caspase-3蛋白表达的影响

论文摘要

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后脑内FADD，caspase-3蛋白表达的变化及神经节苷脂对二者表达的影响。方法：采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。选用清洁级健康雄性SD大鼠36只，随机分为假手术组，缺血再灌注组和神经节苷脂治疗组，于缺血2小时后恢复灌注，分别在再灌注后6h，1d，3d，7d处死动物。采用HE染色观察病理学变化；免疫组织化学检测大脑皮层FADD，caspase-3的动态表达变化；用SPSS进行统计分析。结果：1．大鼠脑缺血2小时再灌注6h，1d，3d，7d时，脑组织石蜡切片HE染色光镜观察，随缺血时间点增加，神经元变性、坏死加重。相同时间点相比，神经节苷脂干预组脑组织损伤程度均低于缺血再灌注组。2．免疫组化检测各组大鼠脑组织中均可见FADD蛋白阳性表达：假手术组呈弱阳性表达，缺血再灌注组大鼠脑组织中呈阳性或强阳性表达，与假手术组比较有显著差异（P＜0.01）．在3d时FADD蛋白表达达高峰。3．免疫组化检测假手术组大鼠脑组织中可见caspase-3弱阳性表达，缺血再灌注组大鼠脑组织中呈阳性表达，主要位于大脑皮质，海马等处神经细胞及胶质细胞中，与假手术组比较有显著差异（P＜0.01），缺血再灌注后1d是caspase-3蛋白表达的高峰。4．免疫组化检测神经节苷脂干预组，大鼠脑组织中FADD，caspase-3的表达趋势同缺血再灌注组，但阳性率低于缺血再灌注组，相同时间点比较有显著差异。结论：1．大鼠脑缺血再灌注后，各时间点脑内神经元神经胶质细胞FADD，caspase-3蛋白表达上调，提示FADD，caspase-3可能参与脑缺血再灌注损伤神经细胞的凋亡过程。2．神经节苷脂干预后，两者表达下调，脑组织损伤减轻，提示神经节苷脂的神经保护作用可能与干预FADD，caspase-3的表达有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 实验药品与试剂
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 实验设计
• 2.2.2 局灶性脑缺血再灌注模型制作
• 2.2.3 动物分组
• 2.2.4 相关试剂与器皿的处理
• 2.2.5 动物一般行为及神经功能缺损体征评分
• 2.2.6 缺血中心区与半暗带的划分
• 2.2.7 FADD，caspase-3的免疫组织化学染色
• 2.2.8 HE染色
• 2.3 统计学处理
• 第三章 结果
• 3.1 病理观察结果
• 3.2 免疫组化结果
• 3.2.1 大鼠脑缺血再灌注后脑组织中FADD蛋白的表达
• 3.2.2 大鼠脑缺血再灌注后脑组织中caspase-3蛋白的表达
• 3.3 图和表
• 3.3.1 统计图表
• 3.3.2 实验结果图片
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 综述
• 致谢
• 攻读硕士学位期间主要研究成果目录