大鼠线栓法大脑中动脉闭塞模型改进的实验研究

论文摘要

背景与目的缺血性脑血管病（Ischemic Cerebral Vesscular Disease,ICVD）是神经科常见病多发病,在ICVD的治疗中重建血流或增强缺血区的血流供应是缺血脑组织修复损伤的必需条件,但同时带来的再灌注损伤也是目前最受关注的问题。线栓法大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型能最大程度模拟人类缺血性卒中发生,被广泛用于实验性脑缺血再灌注（Ischemia-reperfusion ,IR）损伤的研究。国内外大量实验证实,MK-801（dizocilpine）在实验性脑缺血模型中具有重要的神经保护作用。本实验用周龄和性别匹配的SD大鼠成功建立了MCAO动物模型,对原有线栓法大脑中动脉闭塞模型进行了改进,并用MK-801预处理进一步验证动物模型,为研究脑缺血再灌注损伤的发病机理和研制治疗药物打下基础。方法50只雄性SD大鼠随机分为3组,IR组、p-MCAO（permanent MCAO）组及假手术组（10只）。IR组（n=22）分为2个亚组,IR治疗组（12只）及IR模型组（10只）。p-MCAO组（n=18）也分为2个亚组,p-MCAO治疗组（10只）及p-MCAO模型组（8只）。两治疗组将药物MK-801（0.5mg/Kg,溶于二甲基亚砜:0.9%生理盐水,体积比为1:39的混合溶液中）于脑缺血15分钟前经颈外动脉给药。假手术组、两模型组大鼠仅给予等容量溶剂。手术组以线栓法制备MCAO模型,假手术组接受相同手术流程,但不插入线栓。手术后分别对各组大鼠做神经功能缺损评分,随后取各大鼠大脑冠状位切片行TTC染色以测量脑梗死及水肿体积,冰冻切片焦油紫染色观察大鼠大脑皮层区细胞损伤程度,酶联免疫吸附法测定脑中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。结果1.各手术组大鼠出现严重的神经功能障碍,假手术组大鼠则无任何临床症状。且神经行为学评分显示IR治疗组大鼠神经功能明显优于IR模型组。2.切片TTC、焦油紫染色各手术组大鼠脑组织见明显脑梗死灶,假手术组大鼠无此改变。IR治疗组脑梗塞体积较IR模型组明显减小。3.对大鼠脑组织生化指标检测发现,手术组大鼠的TNF-α的表达明显增加。与IR模型组相比,IR治疗组大鼠TNF-α的含量有所降低（P<0.01）。结论1.本实验建立的大鼠模型在临床表现、病理变化等方面符合MCAO模型的表现,模型稳定、可靠,是研究脑缺血再灌注损伤的理想动物模型。2. MK-801能改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能障碍,减轻缺血区的脑梗死,并减少炎症因子TNF-α的产生,具有明显的改善脑缺血再灌注损伤的作用。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 参考文献
• 前言
• 材料与方法
• 一、实验材料
• 二、实验方法
• 实验结果
• 一、大鼠局灶性脑缺血再灌注后的神经功能缺损评分
• 二、MK-801 对大鼠脑血流（cerebral blood flower,CBF）的影响
• 三、ELISA 检测脑组织 TNF-α含量
• 四、焦油紫染色病理形态学观察
• 五、TTC 染色结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 中英文缩略词汇表
• 攻读学位期间公开发表的论文
• 致谢