神经营养因子对大鼠神经干细胞和骨髓基质细胞定向诱导分化作用的研究

论文题目: 神经营养因子对大鼠神经干细胞和骨髓基质细胞定向诱导分化作用的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 内科学

作者: 林玲

导师: 林建银

关键词: 新生大鼠,大脑皮质,神经干细胞,骨髓基质细胞,诱导分化,受体,脑移植

文献来源: 福建医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的采用体外培养的大鼠脑神经干细胞(NSCs)和大鼠骨髓基质细胞(MSCs),了解不同神经营养因子在体外对NSCs和MSCs定向分化为神经元的诱导作用,以及不同培养时间的NSCs对这些诱导作用的反应性和可能的作用机制。并将培养的NSCs和MSCs定位移植入正常及大脑慢性缺血模型的成年大鼠脑内,观察植入的细胞在脑内的存活、迁移及分化情况,以探讨体外培养的NSCs和MSCs用于细胞移植治疗中枢神经系统受损的可行性。方法 (1)采用无血清神经球培养法,从出生2～3d的大鼠脑皮质分离培养NSCs,根据细胞的自我更新、具有未分化的原始神经细胞的标志(nestin),以及可分化成多种类型神经细胞的能力:神经元(MAP2或β-tubulinⅢ阳性)、星形胶质细胞(GFAP阳性)和少突胶质细胞(CNPase阳性),对培养不同时间的细胞进行鉴定。并利用nestin这一特征性标志用流式细胞术(FCM)检测培养不同时间神经球中NSCs的百分比,并用透射电子显微镜观察神经球中细胞的组成和超微结构。(2)用BDNF、GDNF、PDGF和forskolin对培养不同时间的NSCs进行诱导,并对诱导后的细胞进行免疫荧光染色,了解这些诱导剂对NSCs分化为神经元的作用。通过RT-PCR和Western blot检测体外培养不同时间NSCs表面TrkB受体的表达水平,探讨它与NSCs诱导分化反应性的关系。(3)将培养1个月的NSCs移植入正常和慢性脑缺血模型的成年大鼠大脑皮质和/或海马区4周,采用脑片免疫荧光染色观察移植的细胞在这些脑区的存活、迁移及分化。(4)体外培养成年大鼠的MSCs,用FCM检测细胞表面抗原CD45、CD11b、CD90、CD71、CD44等进行MSCs的鉴定。用抗氧化剂β-巯基乙醇,以及BDNF、GDNF、NGF、PDGF和forskolin对其进行诱导,通过免疫荧光染色鉴定,了解MSCs是否可分化为神经元和神经胶质细胞,并将体外培养的MSCs移植入正常成年大鼠大脑皮质,观察其在脑内的存活、迁移及分化情况。结果 (1)从新生大鼠脑皮质分离的细胞在本研究所采用的培养系统中呈

论文目录:

中文摘要

英文摘要

英文缩写及中英文对照

引言

第一部分: 体外培养不同时间新生大鼠神经干细胞的培养和鉴定

1、材料和方法

2、结果

3、讨论

4、小结

第二部分: 培养不同时间的大鼠神经干细胞的定向诱导分化作用

1、材料和方法

2、结果

3、讨论

4、小结

第三部分: 体外培养的大鼠神经干细胞移植入成鼠大脑后的迁移及分化

1、材料和方法

2、结果

3、讨论

4、小结

第四部分: 大鼠骨髓基质细胞体外诱导分化和脑内定位移植后的迁移和分化

1、材料和方法

2、结果

3、讨论

4、小结

结论

参考文献

综述

在学期间从事的科研工作

致谢

发布时间: 2005-10-31

参考文献

[1].神经营养因子-3对海马神经元缺氧和谷氨酸损伤保护机制的研究[D]. 王虔.天津医科大学2002
[2].电刺激治疗周围性面瘫疗效观察及相关神经营养因子表达的研究[D]. 邓月.第二军医大学2017
[3].丁苯酞对实验性脑梗死小鼠神经功能改善和神经再生的影响及其作用机制的研究[D]. 张兰.河北医科大学2017
[4].星形胶质细胞在帕金森病神经元铁代谢紊乱中的调节作用研究[D]. 张皓云.青岛大学2013
[5].不同途径移植人骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑缺血卒中的实验研究[D]. 杜世伟.北京协和医学院2011
[6].局灶性脑缺血大鼠内源性神经干细胞的分化以及神经营养因子分泌情况的研究[D]. 陈正和.浙江大学2012
[7].小鼠缺血性脑卒中模型构建及应用研究[D]. 赵强.中国人民解放军医学院2014
[8].脊髓NG2细胞在大鼠神经病理性疼痛中的作用及机制研究[D]. 王萍.华中科技大学2011
[9].局灶性脑缺血溶栓联合神经保护的实验研究[D]. 李志欣.天津医科大学2002

神经营养因子对大鼠神经干细胞和骨髓基质细胞定向诱导分化作用的研究

猜你喜欢