调控文蛤幼虫变态的肾上腺素能受体类型及幼虫发育中神经和肌肉的变化

论文摘要

大部分贝类幼虫在发育过中要经历从浮游生活到底栖生活的变化过程,同时形态结构也要经历巨大的变化,这个过程称为变态。变态是文蛤幼虫发育过程中非常重要的一个阶段。药理学和细胞免疫学证据表明β肾上腺素样受体在文蛤幼虫变态过程中有重要作用。药理学实验分别采用了几种儿茶酚胺类受体的激动剂和抑制剂来处理幼虫,检验它们在幼虫变态过程中的作用。结果表明,在10μM和100μM的浓度下,肾上腺素（AD）和去甲肾上腺素（NA）中能够显著提高幼虫的变态率（p<0.05）。10μM和100μM浓度的AD能够提高幼虫变态率30%左右。10μM和100μM浓度的NA能分别提高幼虫变态率35.3%和27.6%。10μM的β受体激动剂-isoproterenol也能够显著的提高幼虫的变态率30%（p<0.05）,但是α受体激动剂-phenylephrine在0.1μM到100μM的浓度范围内不能显著提高幼虫的变态率（p>0.05）。而且,1μM的β受体抑制剂-propanolol能显著的抑制AD或NA提高幼虫变态率的作用（p<0.05）;但是α受体抑制剂-prazosin对AD或NA提高幼虫变态率没有显著性影响（p>0.05）。此外本文还利用整装免疫细胞化学的方法进一步研究了文蛤幼虫不同发育阶段,神经系统和β肾上腺素样受体的发育情况。幼虫的神经系统在担轮幼虫时期（受精后18h）开始发育,这时还不能检测到β肾上腺素受体。面盘幼虫时期（受精后1d）具备了顶神经节、脑神经节和脏神经节组成的中枢神经系统,在口附近有一些外周神经。β肾上腺素受体在受精后24h首次出现在面盘幼虫的顶神经节和脑神经节,分别命名为AR（apical receptor）和CR1（cerebral receptor 1）。在受精后5d顶神经节已经检测不到。脑神经节和脏神经节由腹部向背部迁移,口的背腹两侧都出现了一些神经元。并且脏神经节周围也出现了一些神经细胞。AR在受精后3d就检测不到了。同时在CR1的后部新出现了一些β肾上腺素受体,命名为CR2。此后CR2发育迅速,在受精后5d就和CR1差不多大小。并且在CR1和CR2之间还出现了很多小的

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 文献综述
• 1 海洋无脊椎动物变态特点
• 1.1 幼虫体型
• 1.2 变态过程
• 1.3 变态信号传导的方式
• 1.4 结论
• 2 几种海洋无脊椎动物变态信号的传导
• 2.1 海鞘
• 2.2 贝类
• 2.3 海绵
• 2.4 海洋无脊椎动物变态模型
• 3 贝类幼虫神经系统发育及在变态过程的作用
• 3.1 顶感受器
• 3.2 后部FMRF 四肽能的神经
• 3.3 含有儿茶酚胺的外周神经
• 3.4 其它类型的细胞
• 3.5 成体中枢神经节的发育
• 3.6 幼虫神经系统的命运
• 3.7 结论
• 4 双壳类肌肉系统的发育
• 4.1 幼虫的肌肉系统
• 4.2 成体的肌肉系统
• 第二章 儿茶酚胺诱导文蛤幼虫变态的受体类型确定
• 材料与方法
• 亲贝培养和幼虫培育
• 药理学试验
• 免疫细胞学
• 数据分析
• 结果
• 药理学
• 免疫细胞学
• 讨论与结论
• 第三章 β肾上腺素受体在文蛤发育过程的时空变化
• 材料与方法
• 幼虫获得
• 幼虫固定
• 细胞免疫学
• 总蛋白提取
• Western blot
• 结果
• 讨论
• 第四章 文蛤幼虫发育程中神经系统的变化
• 材料与方法
• 幼虫获得
• 取样固定
• 细胞免疫学
• 结果
• 讨论及结论
• 第五章 文蛤幼虫发育中肌肉系统的变化
• 材料方法
• 幼虫获得
• 肌肉染色
• 结果
• 浮游幼虫阶段（18hpf-5dpf）
• 变态（6dpf-7dpf）
• 变态后稚贝时期（8dpf-10dpf）
• 讨论和结论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 发表文章
• 致谢