论文摘要
家蚕的浓核病毒（Bombyx mori densovirus, BmDNV）是家蚕的重要病毒病原之一。该病毒感染家蚕中肠组织细胞,且中肠前部和后部的细胞先出现病理变化。家蚕不同品种对浓核病毒的感受性不同,感受性蚕品种感染浓核病毒后,随着病情进展中肠组织发生一系列组织病理学变化。本研究以对浓核病毒感受性家蚕品种为对象,应用蛋白质双向电泳和基质辅助质量飞行时间质谱技术,对感染蚕和健康蚕的中肠和血液等组织进行蛋白质组学比较分析,以期探索家蚕感染浓核病毒的分子病理学机制。应用蛋白质双向电泳对家蚕中肠前、中、后三个不同区段的组织蛋白进行比较分析,结果表明,中肠前、中、后三个区段组织蛋白的点数、位置、点形等差异较小。在中肠前部和后部组织中发现的4个差异蛋白点,分别为脂蛋白前体、氢离子转运ATP合酶B亚基、α胰蛋白酶A链、肌动蛋白;在中肠中部发现的一个差异蛋白点为Kunitz型胰蛋白酶抑制剂A链。与健康对照蚕比较,家蚕在感染浓核病毒后的不同时期,中肠组织的蛋白质组成存在明显差异。在感染初期,细胞色素C还原酶特异表达,该酶对细胞凋亡过程具有调控作用;在感染中期,蚕体中肠组织继续通过分泌一些蛋白如伴侣蛋白Ζ亚基、细胞色素P450等来调控细胞凋亡;到感染后期,胰蛋白酶、30K脂蛋白、半胱天冬酶1等重要蛋白酶消失,可能导致家蚕幼虫消化吸收功能的丧失。家蚕在感染浓核病毒后的不同时期,血液组织的蛋白质也存在明显差异。在感染初期,蚕体血液组织可能应激性地产生一些蛋白如磷酸酶2A抑制剂、肽聚糖识别蛋白。在感染的中期蚕体血液组织继续通过分泌一些特异蛋白如细胞色素C氧化酶等来调控细胞凋亡,在感染后期,大量蛋白质如调控细胞生理代谢的酶类等急剧降解消失。说明BmDNV-ZJ感染也诱发家蚕脂肪细胞和血细胞中免疫相关蛋白的表达和分泌。如上所述,家蚕在被浓核病毒感染后,在中肠和血液鉴定出的一些差异蛋白如细胞色素C还原酶、细胞色素C氧化酶,细胞色素P450以及半胱天冬酶1等,都与细胞凋亡调控有关,因此推测细胞凋亡在家蚕抵御浓核病毒感染过程中发挥重要作用。
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摘要Abstract第1章 绪论1.1 研究背景及意义1.1.1 研究背景1.1.2 研究的意义1.2 当前的研究进展1.2.1 家蚕浓核病毒的分子生物学研究1.2.2 家蚕不同品种对浓核病毒感染的抵抗性1.2.3 家蚕蛋白质组学的研究进展1.3 本课题的研究内容第2章 家蚕不同区段中肠组织蛋白比较分析2.1 材料与方法2.1.1 材料及主要试剂2.1.2 样品组织蛋白质的抽提2.1.3 组织蛋白双向电泳分析2.1.4 电泳图谱分析2.1.5 蛋白点质谱分析2.2 结果与分析2.2.1 家蚕中肠前、中、后三个区段组织蛋白电泳图谱分析2.2.2 家蚕中肠前、中、后三个区段组织不同蛋白点比较鉴定分析2.3 本章小结第3章 家蚕感染浓核病毒后不同时间中肠组织蛋白比较分析3.1 材料与方法3.1.1 材料及主要试剂3.1.2 浓核病毒感染3.1.3 家蚕中肠的解剖收集3.1.4 中肠组织蛋白的抽提3.1.5 样品蛋白的双向电泳3.1.6 双向电泳凝胶图谱分析3.1.7 蛋白点质谱分析3.2 结果与分析3.2.1 家蚕感染BmDNV-ZJ 24hr 后的中肠组织蛋白电泳图谱分析3.2.2 家蚕感染BmDNV-ZJ48hr 后的中肠组织蛋白电泳图谱分析3.2.3 家蚕感染BmDNV-ZJ 72hr 后的中肠组织蛋白电泳图谱分析3.2.4 家蚕感染BmDNV-ZJ 96hr 后的中肠组织蛋白电泳图谱分析3.2.5 家蚕感染BmDNV-ZJ 120hr 后的中肠组织蛋白电泳图谱分析3.3 本章小结第4章 家蚕感染浓核病毒后不同时期血液组织蛋白比较分析4.1 材料与方法4.1.1 材料及主要试剂4.1.2 浓核病毒感染4.1.3 病蚕血液组织的收集4.1.4 样品蛋白的双向电泳4.1.5 双向电泳凝胶图谱分析4.1.6 蛋白点质谱分析4.2 结果与分析4.2.1 家蚕感染Bm DNV-ZJ 后24hr 的血液组织蛋白电泳图谱分析4.2.2 家蚕感染Bm DNV-ZJ 后48hr 的血液组织蛋白电泳图谱分析4.2.3 家蚕感染Bm DNV-ZJ 后72hr 的血液组织蛋白电泳图谱分析4.2.4 家蚕感染Bm DNV-ZJ 后96hr 的血液组织蛋白电泳图谱分析4.2.5 家蚕感染Bm DNV-ZJ 120hr 后的血液组织蛋白电泳图谱分析4.3 本章小节第5章 结论参考文献攻读硕士学位期间发表的学术论文致谢详细摘要
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