血清白蛋白与血红蛋白的电化学行为及其分析应用

论文摘要

蛋白质是重要的生物活性物质,它参与生命体每一步反应和活动。蛋白质的定量测定是研究蛋白质的基础,因此建立快速、简便、灵敏、干扰小的测定蛋白质的方法具有重要意义。电化学分析法具有灵敏度高、仪器简单、方法灵活多样等特点,将电分析化学技术应用于生物活性物质的研究,开拓了电分析化学的新的领域——生物电分析化学。本文采用单扫描极谱法研究蛋白质的测定方法。在溶解氧存在下,建立了血清白蛋白和血红蛋白的检测方法,并对其机理进行了研究。蛋白质的同时测定文献报道较少,论文初步研究了血清白蛋白和血红蛋白的同时测定。本硕士学位论文的主要工作是:1.基于溶解氧条件下血清白蛋白的平行催化波研究在pH 6.6的磷酸盐缓冲溶液中,基于溶解氧条件下,建立了血清白蛋白的测定方法。该波一阶导数波高与0.084 mg/L范围内牛血清白蛋白（BSA）或人血清白蛋白（HSA）呈线性关系,检出限分别为0.05 mg/L。运用该法测定了人血清样品中蛋白质含量,结果满意。2.基于溶解氧条件下血红蛋白的一种新的平行催化波研究在5×10-3 mol/L NaOH溶液中,血红蛋白于-0.62V （vs. SCE）处会产生一灵敏的还原波。该波二阶导数波高与血红蛋白在0.0521 mg/L呈线性关系,相关系数为0.999,检测限为0.02 mg/L。基于此还原波,建立了一种简单、快速、可靠的检测血红蛋白的新方法。将该方法分别用于血液和尿液样品的检测,结果可靠。机理研究表明,血红蛋白于-0.62V （vs. SCE）处产生还原波是一种新的平行催化波,它是基于血红蛋白中的HbFe（III）离子被还原成HbFe（II）,HbFe（II）又被溶解氧化学氧化为HbFe（III）这样一个循环过程。该波与平行催化氢波以及血红蛋白中的HbFe（III）离子被还成HbFe（II）的还原波存在在明显不同。3.极谱法同时测定血红蛋白和血清白蛋白用单扫描极谱法在加入1.5%亚硫酸钠的0.08mol/L磷酸盐缓冲液（pH=6.8）中同时测定了牛血红蛋白和牛血清白蛋白。结果表明,在最佳实验条件下,牛血红蛋白和牛血清白蛋白的量在2:1到5:1之间的任意比例时,牛血红蛋白在624 mg/L（r=0.995）和牛血清白蛋白在28 mg/L （r=0.996）可以同时测定两种蛋白,检测限分别为0.3 mg/L,0.1 mg/L。在同样条件下,人血红蛋白的线性范围在633mg/L （r=0.995）,相应的人血清白蛋白的线性范围为211mg/L （r=0.998）,两种蛋白可以同时测定,检测限分别为0.3 mg/L,0.2 mg/L。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 绪论
• 1.1 选题的意义
• 1.2 蛋白质的定量分析方法概述
• 1.3 血清白蛋白的定量分析方法概述
• 1.4 血红蛋白的定量分析方法概述
• 1.4.1 比色法
• 1.4.2 化学发光法
• 1.4.3 荧光法
• 1.4.4 高效液相色谱法
• 1.5 极谱法在蛋白质测定中的应用
• 1.5.1 蛋白质自身的氧化、还原波
• 1.5.2 蛋白质催化氢波
• 1.5.3 蛋白质与金属离子、无机小分子相互作用
• 1.6 本论文研究的主要内容
• 1.6.1 基于溶解氧条件下血清白蛋白的平行催化氢波研究
• 1.6.2 基于溶解氧条件下血红蛋白的一种新的平行催化波研究
• 1.6.3 极谱法同时测定血红蛋白和血清白蛋白
• 第二章 基于溶解氧条件下血清白蛋白的平行催化 氢波研究
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 实验方法
• 2.3 结果于讨论
• 2.3.1 BSA 的单扫描极谱波
• 2.3.2 缓冲溶液选择
• 2.3.3 pH 的确定
• 2.3.4 缓冲溶液用量选择
• 2.3.5 溶解氧的影响
• 2.3.6 线性范围
• 2.3.7 干扰
• 2.3.8 分析应用
• 2.4 机理研究
• 2.5 小结
• 第三章 基于溶解氧条件下血红蛋白的一种新的平行催化波研究
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 实验方案
• 3.3 结果于讨论
• 3.3.1 Hb 的单扫描极谱波
• 3.3.2 缓冲溶液及用量选择
• 3.3.3 溶解氧的影响
• 3.3.4 线性范围
• 3.3.5 干扰
• 3.3.6 分析应用
• 3.4 平行催化波机理研究
• 3.4.1 平行催化波
• 3.4.2 HbFe （III）的还原
• 3.4.3 溶解氧的作用
• 3.5 结论
• 第四章 极谱法同时测定血红蛋白和血清白蛋白
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 实验方法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 单扫描极谱波
• 4.3.2 缓冲溶液的确定
• 4.3.3 pH 的确定
• 4.3.4 缓冲溶液用量的确定
• 2SO₃）的用量'>4.3.5 亚硫酸钠（Na₂SO₃）的用量
• 4.3.6 血红蛋白与血清白蛋白相互干扰研究
• 4.3.7 线性范围及检测限
• 4.3.8 干扰物质的影响
• 4.4 机理探讨
• 4.5 小结
• 全文总结
• 参考文献
• 致谢
• 附录 A 攻读硕士学位期间发表的论文