论文摘要
目的观察骨保护素（OPG）基因修饰的骨髓基质细胞（BMSCs）复合PLGA材料移植对牙周骨缺损的修复作用。方法⑴4只成年Beagle犬,选其24颗前牙颈部龈缘水平结扎丝线并饲以高糖饮食,分别于1w、2w、4w、8w检查实验动物的牙周状况,记录结果。⑵穿刺抽吸犬髂骨骨髓,贴壁筛选法获取BMSCs,接种到PLGA材料上进行体外培养,并利用脂质体瞬时转染重组质粒pSecTag2/B-OPG,扫描电镜观察BMSCsopg-PLGA复合物。⑶牙周病模型建成后行翻瓣检查、修整近中牙槽骨缺损至3mm,共分3组:实验组（缺损处植入OPG基因修饰的BMSCs复合PLGA）;阴性对照组（缺损处植入BMSCs复合PLGA）;空白对照组（常规牙周翻瓣治疗）。⑷牙周手术后第6周处死动物,进行临床、X线片观察,并制作切片行组织学观察,测量新生牙槽骨和牙骨质的高度、新生结缔组织的附着量。统计学分析相关数据。结果⑴所有实验用牙的牙周均形成近似人类临床牙周病的实验性牙周病,但严重程度不一。⑵扫描电镜显示BMSCsOPG与PLGA支架复合良好。⑶牙周手术后6周,术区伤口愈合良好,粘膜无红肿及感染。⑷X片观测:实验组牙周组织缺损区牙槽骨高度高于两对照组。⑸组织学观察:实验组可见大部分的牙周组织再生,较对照组有更多的新生牙槽骨,可见新生骨小梁,接近正常骨组织结构,支架材料已消失,未见根吸收等不良愈合方式。阴性对照组修复了部分牙周组织缺损,可见少量牙槽骨,胶原纤维多见;空白对照组鲜见牙周组织修复,有纤维结缔组织和长上皮细胞长入。实验组组织学评分与两对照组相比有统计学差异（P<0.01,P<0.01）。结论⑴OPG基因修饰的BMSCs在PLGA支架中生长良好,牙周手术后动物也无不良反应,说明PLGA适用于牙周组织工程;⑵动物实验证明OPG基因治疗与组织工程联合能有效促进犬牙周骨缺损的骨组织再生;⑶OPG基因修饰的BMSCs是一种良好的牙周组织工程的种子细胞。实验初步证明基因治疗与组织工程联合修复牙周缺损的可行性,为这种新型的治疗方法用于临床实践奠定基础。
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