论文题目: 神经钙调蛋白在促炎细胞因子诱导神经元凋亡中作用机制
论文类型: 博士论文
论文专业: 病理学与病理生理学
作者: 高玲
导师: 祝世功
关键词: 白细胞介素,甲基天冬氨酸,神经钙调蛋白,皮层神经细胞,核转录因子,细胞凋亡
文献来源: 吉林大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本实验主要利用炎症细胞因子IL-1β和TNFα作用于原代培养的皮层神经元和星形胶质细胞,探讨神经钙调蛋白是否参与了炎症因子引起的神经细胞的损伤及可能的机制。方法:用IL-1β和TNFα诱导培养大鼠皮层神经元和星形胶质细胞的损伤,采用四唑盐比色法(MTT),乳酸脱氢酶释放率(LDH)及免疫荧光方法观察细胞生存力和损伤程度, Western blot 分析检测p-JNK,p-ERK,NF-κB 的表达。结果:在皮层神经细胞中,IL-1β和TNFα与正常对照组比较,均可明显引起皮层神经元的损伤(p<0.05)。而IL-1β与CsA 联合应用组,皮层神经元的生存力则明显提高,TNFα与CsA 联合应用组,皮层神经元的生存力改变不明显。在LDH 释放率测定试验中,也观察到了类似的结果。CsA 可明显降低IL-1β引起的LDH 释放率的增加。IL-1β与CsA 联合作用组,与IL-1β单独作用组比较可明显降低LDH 的释放率(p<0.001),而TNFα与CsA 联合作用组,与TNFα单独作用组比较LDH 的释放率没有明显改变(p>0.05)。在星形胶质细胞中炎性细胞因子IL-1β,TNFα均可引起细胞释放LDH 增多,IL-1β与CsA 可明显降低IL-1β引起的星形胶质细胞生存力降低和LDH 释放率的增加。IL-1β与CsA 联合作用组,与IL-1β单独作用组比较可明显提高细胞的生存力和降低LDH 的释放率(p<0.001),而且TNFα与CsA 联合作用组,与TNFα单独作用组比较LDH 的释放率可明显降低(p<0.05)。通过免疫荧光观察发现,皮质神经元中IL-1β和TNFα引起神经元凋亡数(green)和死亡数(red)的细胞数均明显增多,与正常对照组比较有显著差异(p<0.05)。而CsA 组神经元凋亡及坏死数量均比IL-1β和TNFα损伤组少。CsA 与IL-1β联合应用组,神经元凋亡和坏死率与单纯
论文目录:
引言
一,材料与方法
(一) 主要仪器与设备
(二) 主要试剂与药品
(三) 主要溶液的配制
二,实验方法
1,原代大鼠脑皮质神经细胞培养
2, 星形胶质细胞的制备、培养与给药方式
3,细胞生存力测定
4,乳酸脱氢酶(LDH)释放率测定
5,SDS-PAGE 电泳及Western blot 分析
6,免疫荧光分析细胞凋亡和坏死
三, 统计学处理
结果
1,IL-1β对培养大鼠脑皮质神经元和星形胶质细胞生长的影响
2,TNFα对培养大鼠脑皮质神经元和星形胶质细胞生长的影响
3, 神经钙调蛋白对IL-1β引起神经细胞损伤的影响
4, 神经钙调蛋白对TNFα引起神经细胞损伤的影响
5, Il-1β和TNFα诱导神经细胞损伤性质和程度研究
6, 神经钙调蛋白对ERK 表达的影响
7, 神经钙调蛋白对JNK 表达的影响
8, 神经钙调蛋白对NF-κB 表达的影响
讨论
结论
参考文献
致谢
导师及作者简介
中文摘要
英文摘要
发布时间: 2005-08-26
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