饲用芽孢杆菌对鸡肠道发育和黏膜免疫调节作用的研究

论文摘要

芽孢杆菌具有抗逆性强、产生多种营养物质和调节肠道菌群等特点,在动物养殖业中具有广泛的应用前景。本试验的目的是观察日粮中添加饲用芽孢杆菌对鸡增重和肠道黏膜结构及其在急性热应激环境下对鸡肠道黏膜免疫的影响,初步探讨芽孢杆菌的作用机理,为芽孢杆菌应用提供试验依据和理论指导。试验结果如下:1.根据产酶定性分析,除Y4外,芽孢杆菌Y10,Y17和Y18具有产蛋白酶的能力。采用福林显色法显示:Y10,Y17和Y18产蛋白酶活力依次为350.48U/mL、446.89U/mL、212.05U/mL。2.采用药敏纸片琼脂扩散法测定4株芽孢杆菌的耐药性。结果表明:4株芽孢杆菌对氟喹诺酮类、氨基糖苷类、大环内酯类等药物表现出敏感性,仅Y17对四环素类表现出耐受性。3.采用饲养试验观察饲用芽孢杆菌对鸡增重的影响。结果表明:在第7d,Y17组平均体重显著高于对照组(P＜0.05);在第21d,Y17组平均体重极显著高于对照组(P＜0.01),Y10和Y18组平均体重显著高于对照组(P＜0.05);在第35d,Y10组平均体重显著高于对照组(P＜0.05),Y17组平均体重极显著高于对照组(P＜0.01)。提示饲用芽孢杆菌促生长效果存在菌株种类差异,且其促生长作用存在时间累积效应。4.应用H.E染色法分析饲用芽孢杆菌对35日龄鸡肠黏膜结构的影响。结果表明:各试验组小肠各段绒毛高度和绒毛高度与隐窝比值(V/C)均高于对照组,尤其是Y10组和Y17组显著或极显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01);相比其它肠段,饲用芽孢杆菌对空肠绒毛高度影响较大;V/C值由十二指肠向回肠逐渐降低。提示饲用芽孢杆菌通过改善肠道黏膜结构,进而促进试验鸡的消化吸收功能,提高其生产性能。5.应用H.E染色法和免疫组化SP染色法分析饲用芽孢杆菌对急性热应激鸡肠黏膜免疫的影响。结果表明:随着急性热应激时间的不断延长,鸡肠道IEL数量和sIgA细胞平均光密度逐渐降低,尤其是十二指肠和空肠部位变化较明显(P＜0.01或P＜0.05)。提示热应激可造成鸡肠道黏膜免疫功能的损害,而且这种损害与急性热应激的时间有较为密切的关系。试验组添加饲用芽孢杆菌后,在正常情况和应激阶段肠道不同部位IEL数量和sIgA细胞平均光密度均比对照组相应地有所增加,尤其是Y10组和Y17组明显高于对照组(P＜0.01或P＜0.05)。提示饲用芽孢杆菌可促进上皮细胞增殖和特异性sIgA的产生和分泌,从而可修复肠黏膜机械屏障,提高肠道局部的免疫功能。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 第一章 文献综述
• 1 饲用芽孢杆菌的研究进展
• 1.1 饲用芽孢杆菌概况
• 1.1.1 饲用芽孢杆菌的分类
• 1.1.2 饲用芽孢杆菌的应用优势
• 1.2 饲用芽孢杆菌的作用机理
• 1.2.1 免疫机能调节
• 1.2.2 拮抗动物病原菌,维护和调节微生态平衡
• 1.2.3 促进动物消化、促生长、提高生产性能
• 1.3 饲用芽孢杆菌的应用现状
• 1.3.1 在猪禽养殖业中的应用
• 1.3.2 在医药中的应用
• 2 益生菌与肠道黏膜免疫
• 2.1 肠道黏膜免疫系统
• 2.1.1 小肠上皮内淋巴细胞
• 2.1.2 肠道黏膜免疫的效应因子
• 2.1.3 微皱褶细胞
• 2.2 益生菌对肠道黏膜免疫调节作用
• 2.2.1 益生菌对肠黏膜sIgA的影响
• 2.2.2 益生菌对肠黏膜淋巴细胞的影响
• 2.2.3 益生菌对肠黏膜细胞因子的调节
• 3 试验研究的目的与意义
• 第二章 饲用芽孢杆菌对抗生素敏感性及产蛋白酶试验的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 菌株
• 1.2 培养基与试剂
• 1.3 仪器设备
• 1.4 产酶活力试验
• 1.5 药敏试验
• 2 结果与分析
• 2.1 产蛋白酶试验
• 2.2 抗生素敏感性试验
• 3 讨论
• 3.1 饲用芽孢杆菌产蛋白酶活力
• 3.2 饲用芽孢杆菌对药物的敏感性
• 第三章 饲用芽孢杆菌对鸡增重和小肠黏膜结构的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 试验动物与日粮
• 1.2 试验设计
• 1.3 饲养管理
• 1.4 组织样采集
• 1.5 仪器设备及试剂
• 1.6 组织切片
• 1.7 测定指标及方法
• 1.7.1 生长性能
• 1.7.2 肠黏膜结构
• 1.8 组织学观察与统计
• 1.9 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 饲用芽孢杆菌对鸡平均体重的影响
• 2.2 饲用芽孢杆菌对鸡黏膜结构的影响
• 2.2.1 饲用芽孢杆菌对35日龄鸡十二指肠黏膜结构的影响
• 2.2.2 饲用芽孢杆菌对35日龄鸡空肠黏膜结构的影响
• 2.2.3 饲用芽孢杆菌对35日龄鸡回肠黏膜结构的影响
• 3 讨论
• 3.1 饲用芽孢杆菌对鸡生产性能的影响
• 3.2 饲用芽孢杆菌对鸡肠黏膜组织结构的影响
• 第四章 饲用芽孢杆菌对急性热应激鸡肠道黏膜免疫的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 菌株与主要试剂
• 1.2 主要溶液配制
• 1.3 试验设计
• 1.4 组织样采集
• 1.5 组织切片
• 1.6 测定指标及方法
• 1.6.1 肠上皮内淋巴细胞
• 1.6.2 SP染色法显示IgA分泌细胞
• 1.7 组织学观察与统计
• 1.8 数据分析
• 2 结果与分析
• 2.1 饲用芽孢杆菌对热应激鸡肠道IEL细胞数量的影响
• 2.1.1 鸡肠道IEL细胞数量分布
• 2.1.2 饲用芽孢杆菌对热应激鸡十二指肠IEL细胞数量的影响
• 2.1.3 饲用芽孢杆菌对热应激鸡空肠IEL细胞数量的影响
• 2.1.4 饲用芽孢杆菌对热应激鸡回肠IEL细胞数量的影响
• 2.2 饲用芽孢杆菌对热应激鸡肠道IgA分泌细胞的影响
• 2.2.1 鸡肠道IgA分泌细胞数量分布
• 2.2.2 饲用芽孢杆菌对热应激鸡十二指肠IgA分泌细胞的影响
• 2.2.3 饲用芽孢杆菌对热应激鸡空肠IgA分泌细胞的影响
• 2.2.4 饲用芽孢杆菌对热应激鸡回肠IgA分泌细胞的影响
• 2.2.5 饲用芽孢杆菌对热应激鸡盲肠扁桃体IgA分泌细胞的影响
• 3 讨论
• 3.1 饲用芽孢杆菌对热应激鸡IEL数量的影响
• 3.2 饲用芽孢杆菌对热应激鸡IgA分泌细胞的影响
• 结论
• 参考文献
• 致谢