刺五加叶与无梗五加叶生药学比较研究

论文摘要

刺五加Acanthopanax senticosus（Rupr.et Maxim.）Harms与无梗五加Acanthopanax sessiliflorus（Rupr.et Maxim.）Seem均为五加科（Araliaceae）植物,在中国东北部资源丰富,刺五加与无梗五加全身是宝,其根、茎、叶均可药用,因采集根、茎造成了植物资源的缺乏,因此对叶的开发和利用已是当今的一种趋势。刺五加叶与无梗五加叶在形态上没有明显差异,在收购刺五加叶时发现混入大量无梗五加叶,易将二者混用。本课题来源于国家科技攻关计划项目《长白山重要珍稀药用植物仿生栽培及保护研究》课题任务编号：2005BA741C。为了资源的优化利用,本文在文献综述研究的基础上从植物叶形态、显微鉴别、化学成分含量及抗氧化作用等方面来比较两个同属不同种的植物,为两种植物的开发利用提供科学合理的依据；以金丝桃苷为指标进行工艺优化,为今后工业化生产提供理论依据。研究内容主要包括以下几个方面：本研究采用了形态鉴别与显微鉴定的方法对刺五加叶与无梗五加叶的形态与内部组织结构进行了比较,结果表明：（1）刺五加叶为掌状复叶,小叶常5；无梗五加叶为三出复叶或掌状复叶,小叶3～5。（2）刺五加叶下表皮密生黄褐色绒毛；无梗五加叶下表皮沿叶脉疏生刺毛。（3）刺五加叶叶缘具刺；无梗五加叶叶缘无刺。（4）叶片表面观相似,气孔都为不定式；刺五加叶的上表皮细胞略大于无梗五加叶的上表皮细胞。（5）刺五加叶横切面可见非腺毛,草酸钙簇晶在栅栏组织、海绵组织中都有分布；中脉维管束微心形。无梗五加叶横切面无非腺毛,草酸钙簇晶主要在海绵组织中；中脉维管束呈半球形。（6）刺五加与无梗五加叶粉末特征相似,主要区别是刺五加粉末可见大量非腺毛。这对于区分两种五加叶有重要意义,也为将来进一步研究刺五加属药材奠定了基础。本研究采用高效液相色谱法比较不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中金丝桃苷、紫丁香苷和绿原酸的含量,采用SPSS16.0软件对测定结果进行统计分析。结果表明：不同采收期刺五加叶中的金丝桃苷含量高于无梗五加叶；不同采收期刺五加叶中绿原酸含量低于无梗五加叶；不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中紫丁香苷含量差异不显著。本研究采用紫外分光光度法比较不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中总黄酮及总多糖含量,采用SPSS16.0软件对测定结果进行统计分析。结果表明：不同采收期刺五加叶黄酮含量大于无梗五加叶；不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中多糖含量差异较小,总体来说,无梗五加叶中多糖含量比刺五加叶中多糖含量较高。本研究采用原子吸收光谱法比较不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中微量元素的含量,采用SPSS16.0软件对测定结果进行统计分析。结果表明：在叶的整个生长周期内无梗五加叶中铁、锰的含量始终明显高于刺五加叶,锌的含量从6月5日开始高于刺五加叶，说明无梗五加叶用于做食品可使人们从中获得更多的微量元素,起到营养与保健的作用。本研究采用DPPH法、羟自由基法比较刺五加叶与无梗五加叶75%乙醇提取物的抗氧化作用。结果表明：刺五加叶与无梗五加叶75%乙醇提取物均有清除DPPH、羟自由基的能力,并且随着浓度的增加,刺五加叶与无梗五加叶75%乙醇提取物的抗氧化能力随之增强,呈现良好的量效关系。刺五加叶75%乙醇提取物抗氧化作用强于无梗五加叶。这可能与刺五加叶中黄酮含量高于无梗五加叶黄酮含量有关。本研究采用星点设计-效应面法对刺五加叶与无梗五加叶中金丝桃苷的提取工艺进行了优化。以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,金丝桃苷提取率为因变量,通过对自变量与因变量的完全二次响应曲面的回归拟合,用岭嵴分析和效应面法选取较佳工艺,并进行预测分析。结果表明：刺五加叶中金丝桃苷最佳提取工艺为：60%乙醇30倍量超声提取三次,每次60min。无梗五加叶中金丝桃苷最佳提取条件为70%乙醇23倍量超声87min。星点设计-效应面法优选金丝桃苷的提取工艺,方法简便,精度更高。综上所述,刺五加叶与无梗五加叶的形态、组织结构、主要化学成分含量、抗氧化作用等方面都有所差异,并且主要化学成分含量差异显著,所以不能将二者混用。星点设计-效应面法优选的金丝桃苷提取工艺,方法简便,精度更高,为工业化生产提供了依据。本文创新点1.本研究首次对刺五加叶与无梗五加叶形态特征、组织特征、粉末特征进行比较,为今后从外部形态和内部结构区分两个物种提供了理论依据。2.本研究在无梗五加叶化学成分研究的基础上以金丝桃苷为指标进行了提取工艺的优化,为今后工业化生产提供了理论依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 第一章 刺五加叶与无梗五加叶研究概况
• 1.1 刺五加叶与无梗五加叶外观性状研究状况比较
• 1.2 刺五加叶与无梗五加叶化学成分研究进展的比较
• 1.3 刺五加叶与无梗五加叶药理学作用研究进展的比较
• 1.4 刺五加叶与无梗五加叶临床应用比较
• 第二章 刺五加叶与无梗五加叶形态鉴定及显微鉴别比较研究
• 2.1 材料、试剂和仪器
• 2.2 刺五加与无梗五加叶形态鉴定
• 2.3 刺五加叶与无梗五加叶片组织结构鉴别
• 2.4 刺五加与无梗五加叶粉末鉴别
• 2.5 小结
• 第三章 刺五加叶与无梗五加叶的化学成分比较研究
• 3.1 实验材料、仪器和试剂
• 3.2 HPLC法测定不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中紫丁香苷含量比较
• 3.3 HPLC法测定不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中金丝桃苷含量比较
• 3.4 HPLC法测定不同采收期刺五加叶与无梗五加叶中绿原酸含量比较
• 3.5 紫外分光光度法测定不同采收期刺五加叶与无梗五加叶总黄酮含量比较
• 3.6 蒽酮—硫酸比色法测定测定不同采收期刺五加叶与无梗五加叶总多糖含量比较
• 3.7 原子吸收光谱法测定不同采收期刺五加与无梗五加叶微量元素含量比较
• 第四章 刺五加叶与无梗五加叶抗氧化作用比较研究
• 4.1 DPPH法比较刺五加叶与无梗五加叶抗氧化作用
• 4.2 OH自由基法比较刺五加叶与无梗五加叶抗氧化作用
• 第五章 刺五加叶与无梗五加叶中金丝桃苷提取工艺优选
• 5.1 刺五加叶中金丝桃苷提取工艺优选
• 5.2 无梗五加叶中金丝桃苷提取工艺优选
• 第六章 结果与讨论
• 6.1 外观性状比较及显微鉴定
• 6.2 成分含量分析结果
• 6.3 抗氧化能力分析结果
• 6.4 提取工艺优选
• 本文创新点
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介