辣椒胞质雄性不育恢复性主效基因位点分析

论文摘要

辣椒（Capsicum annuum L．）属茄科（Solanacea）辣椒属（Capsicum spp．），是一种常见的非常重要的蔬菜作物，在我国的播种面积仅次于大白菜而位居第二。辣椒杂种优势非常明显，优良的杂交种子比常规品种增产30％以上。现在商业化生产上使用的辣椒杂种种子占整个辣椒种子的90％左右。由于利用胞质雄性不育三系配套生产辣椒杂交种子，可以省去人工去雄、隔离等人工成本，提高种子纯度，同时有利于知识产权的保护等。因此，对辣椒胞质雄性不育的生理与分子生物学研究逐步得到重视。本研究以辣椒胞质雄性不育三系分离群体为试材，通过对辣椒AFLP以及RAPD反应体系中的关键因子进行优化，建立了适合辣椒的AFLP以及RAPD反应体系，在此基础上在辣椒的第6条染色体上初步定位了控制辣椒恢复主效基因的两个分子标记。通过部分已经标记的恢复基因在三系分离群体的验证，探讨其是否在此群体中有多态性差异。另外，通过将含强恢复基因的辣椒与甜椒回交，为在分子生物学水平上为甜椒能否从辣椒中获得恢复基因提供了一种新的途径。主要研究结果如下：1建立了适合辣椒育性分析的AFLP和RAPD反应体系。2在辣椒第6条染色体上（0～20cM之间）找到了2个与辣椒胞质雄性不育恢复主效基因紧密连锁的标记：E32M49-424bp和q18-1.0kb。3根据2000个分离群体的育性恢复情况以及分子标记筛选结果，利用Joinmap 3.0软件，计算AFLP标记E32M49-424bp和恢复主效基因的遗传图距约为3.1cM；而RAPD标记q18-1.0kb和恢复主效基因的遗传图距约为2.2cM。4 SCAR标记Rf-737与辣椒胞质雄性不育恢复主效基因连锁，两者间的遗传距离约为12.7cM，此标记与E32M49-424bp的遗传图距约为15.8cM，与q18-1.0kb的遗传图距约为10.5cM。5 RAPD标记L09-763在本材料中未发现特定多态性差异。6从辣椒中选择恢复性较强的恢复系与甜椒杂交，在F1代中发现了含恢复基因的特异带。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要（Abstract）
• 缩略词表（Abbreviation）
• 第一章 文献综述
• 1 前言
• 2 辣椒胞质雄性不育研究概况
• 2.1 辣椒CMS的来源
• 2.2 CMS的生化特性
• 2.3 辣椒CMS遗传机理及其分子生物学研究
• 2.4 辣椒CMS在生产上的应用
• 3 遗传标记技术和分子标记在辣椒上的应用
• 3.1 遗传标记的类型
• 3.2 DNA分子标记技术的分类
• 3.3 分子标记的优越性
• 3.4 筛选分子标记的方法
• 3.5 分子标记技术在辣椒遗传育种上的应用
• 4 本研究的目的和意义
• 第二章 辣椒P6染色体上胞质雄不育恢复基因的初步定位
• 1 试验材料和方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验试剂及仪器
• 2 方法
• 2.1 试验步骤方案
• 2.2 材料的准备
• 2.3 DNA的提取
• 2.4 分离群体育性调查
• 2.5 AFLP分析及反应体系的优化
• 2.6 RAPD分析及反应体系的优化
• 2.7 辣椒P6染色体上（0～20cM）已经定位的分子标记
• 3 结果分析
• 3.1 分离群体育性分析
• 3.2 AFLP分析
• 3.3 RAPD分析
• 4 讨论
• 4.1 育性调查应该注意的事项
• 4.2 DNA质量对试验的影响
• 4.3 AFLP标记的优越性
• 4.4 2种银染方法的比较
• 4.5 2种不同浓度的PA胶对基因组扩增的影响
• 4.6 2个特定引物上群体验证，其特定多态性差异的分析
• 5 结论
• 第三章 辣椒胞质雄性不育部分恢复基因的分子生物学研究
• 1 部分已经标记的恢复基因的验证
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 结果与分析
• 1.4 小结与讨论
• 2 辣椒强恢复系导入甜椒的分子学研究
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果与分析
• 第四章 全文讨论
• 第五章 全文总结
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介