王美星:SUMO融合表达对淀粉酶N-Amy活性的影响论文

王美星:SUMO融合表达对淀粉酶N-Amy活性的影响论文

本文主要研究内容

作者王美星,向腊,胡慧贞,巫攀,张桂敏(2019)在《SUMO融合表达对淀粉酶N-Amy活性的影响》一文中研究指出:前期解析了一个来自嗜碱菌Bacillus pseudofirmus 703的新型的碱性淀粉酶Amy703,该酶含有一个未知功能的N端结构域,将该结构域缺失后得到的突变体N-Amy相对野生型Amy703比酶活提高了35倍;底物结合实验显示Amy703可以结合不可溶性底物,单独的N端结构域和N端结构域缺失突变体N-Amy都不能结合,推测N端结构域会造成催化结构域的结构变化从而引起比酶活的大幅提高.为了进一步探究Amy703特异的N端结构域造成酶活显著下降的原因,将Amy703的N端结构域替换为SUMO蛋白,实验结果显示裂解液上清的SUMO/N-Amy条带比Amy703粗亮,验证了SUMO蛋白的促可溶性作用;但纯化后的融合蛋白SUMO/N-Amy的比酶活显著低于N-Amy,仅和野生型Amy703的比酶活相当,表明SUMO与N-Amy的融合显著降低了酶活,同时也预示着N端多一段结构域会影响到催化结构域的结构变化.此外,对SUMO/N-Amy融合蛋白是否与底物结合进行了探讨,为进一步解析Amy703的N端结构域功能提供了实验依据.

Abstract

qian ji jie xi le yi ge lai zi shi jian jun Bacillus pseudofirmus 703de xin xing de jian xing dian fen mei Amy703,gai mei han you yi ge wei zhi gong neng de Nduan jie gou yu ,jiang gai jie gou yu que shi hou de dao de tu bian ti N-Amyxiang dui ye sheng xing Amy703bi mei huo di gao le 35bei ;de wu jie ge shi yan xian shi Amy703ke yi jie ge bu ke rong xing de wu ,chan du de Nduan jie gou yu he Nduan jie gou yu que shi tu bian ti N-Amydou bu neng jie ge ,tui ce Nduan jie gou yu hui zao cheng cui hua jie gou yu de jie gou bian hua cong er yin qi bi mei huo de da fu di gao .wei le jin yi bu tan jiu Amy703te yi de Nduan jie gou yu zao cheng mei huo xian zhe xia jiang de yuan yin ,jiang Amy703de Nduan jie gou yu ti huan wei SUMOdan bai ,shi yan jie guo xian shi lie jie ye shang qing de SUMO/N-Amytiao dai bi Amy703cu liang ,yan zheng le SUMOdan bai de cu ke rong xing zuo yong ;dan chun hua hou de rong ge dan bai SUMO/N-Amyde bi mei huo xian zhe di yu N-Amy,jin he ye sheng xing Amy703de bi mei huo xiang dang ,biao ming SUMOyu N-Amyde rong ge xian zhe jiang di le mei huo ,tong shi ye yu shi zhao Nduan duo yi duan jie gou yu hui ying xiang dao cui hua jie gou yu de jie gou bian hua .ci wai ,dui SUMO/N-Amyrong ge dan bai shi fou yu de wu jie ge jin hang le tan tao ,wei jin yi bu jie xi Amy703de Nduan jie gou yu gong neng di gong le shi yan yi ju .

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自湖北大学学报(自然科学版)的王美星,向腊,胡慧贞,巫攀,张桂敏,发表于刊物湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文,是一篇关于碱性淀粉酶论文,端结构域论文,蛋白论文,底物结合能力论文,比酶活论文,湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自湖北大学学报(自然科学版)2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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