论文摘要
第一章,简单介绍了微流控芯片的基本原理。对微流控芯片检测技术（包括激光诱导荧光法、电化学法、化学发光法和质谱法）,联吡啶钌修饰电极的制备方法,重点是Ru（bpy）32+固定化的主要方法（包括Langmuir-Blodgett膜法、自组装膜法、聚合物膜法和溶胶-凝胶法）进行了详细的综述。第二章,我们研制了基于玻璃芯片的微流控芯片电化学发光检测系统,并在该系统上,以自制的碳纤维簇微盘电极为工作电极,Ru（bpy）32+为发光试剂,研究了电化学发光检测三丙胺的最佳条件,分别为:pH 7.6,3.00×10(-2 mol·L-1磷酸缓冲溶液,分离电压为1.3 kV,检测电势为1.2 V,Ru（bpy）32+的浓度为1.00×10-3mol·L-1,进样电压为1.0 kV,进样时间10 s。将1.0×10-4mol·L-1三丙胺标准溶液连续进样7次,得到三丙胺电化学发光信号强度和迁移时间的相对标准偏差（RSD）分别为2.6%和0.67%。第三章研制了一种通过CNT/Nafion复合膜将发光试剂Ru（bpy）32+固定在ITO电极表面的电化学发光超微电极,并测定了三丙胺,得到的线性范围为1.00×10-8- 5.00×10-6mol·L-1,线性回归系数为0.9986,浓度检测限为2.6×10-90 mol·L-1（S/N=3）。将1.00×10-7mol·L-1三丙胺溶液连续扫描7次,得到电化学发光信号的相对标准偏差（RSD）为2.3%,说明该电极具有良好的电化学发光信号,且重现性好、响应时间快等优点。虽然该修饰电极的复合膜面积较小,与微流控芯片的分离通道尺寸相符,但实验过程中,该修饰电极上的CNT/Nafion复合膜易出现脱落现象。因此,这种修饰电极不可用于微流控芯片电化学发光检测中。第四章,研制了一种用AuNPs/Cys复合膜固定酯化Ru（bpy）32+的电化学发光超微电极,它是采用AuNPs/Cys复合膜成功地将酯化联吡啶钌固定在巯基覆盖ITO电极表面。该电极具有良好的电化学发光信号,因此用于测定了三丙胺,得到的线性范围为1.00×10-8-1.00×10-5mol·L-1,线性回归系数为0.9934,浓度检测限为3.5×10-9mol·L-1（S/N=3）。将1.00×10-8mol·L-1三丙胺溶液连续扫描7次,得到电化学发光信号的相对标准偏差（RSD）为1.9%,实验过程中,该修饰电极上的AuNPs/Cys复合膜无脱落现象,说明修饰电极的稳定性较好。同时ITO电极上AuNPs/Cys复合膜面积大小与微流控芯片的分离通道尺寸相符,所以AuNPs/Cys/酯化Ru（bpy）32+修饰的ITO电极可用于微流控芯片电化学发光检测中。第五章,采用自制的微流控芯片电化学发光检测装置,以碳纤维簇微盘电极为工作电极,Ru（bpy）32+为发光试剂测定了单个人白血病细胞中谷胱甘肽的含量。确定了检测谷胱甘肽的最佳检测条件是:Ru（bpy）32+的浓度5.00×10-3mol·L-1,缓冲溶液为pH=7.4的2.00×10-2mol·L-1磷酸缓冲溶液,分离电压为1.3 kV,检测电势为1.4 V（vs. Ag/AgCl）,进样电压为1.0 kV,进样时间15 s。在此条件下,得到谷胱甘肽的线性范围为5.00×10-7-1.00×10-5mol·L-1,线性回归系数为0.9976,检测限可达1.7×10-7mol·L-1（S/N=3）。5.00×10-7mol·L-1谷胱甘肽标准溶液连续进样7次平行测定的迁移时间与电化学发光强度的相对标准偏差（RSD）分别为0.85%和2.8%。采用该方法将单个细胞通过电迁移导入芯片的双T交叉点,在1.0 kV的电压下白血病细胞迅速溶膜,溶膜后细胞中的组分在微流控芯片中得到分离并检测。用上述方法测得人白血病细胞中谷胱甘肽的含量为0.158-1.32 fmol。
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标签：单细胞分析论文; 微流控芯片论文; 电化学发光检测论文; 化学修饰电极论文; 碳纤维簇微盘工作电极论文;