论文摘要
目的:探讨东亚钳蝎毒（BMK）在体外诱导急性早幼粒白血病细胞株HL-60凋亡进而抑制其生长的作用及其抗肿瘤的分子机制。方法:应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法观察不同浓度BMK对HL-60细胞生长的影响;应用流式细胞仪通过Annexin V/PI双染色检测细胞凋亡率;通过caspase-3 staining kit流式细胞术检测凋亡相关蛋白caspase-3的活化表达,以及反转录聚合酶链反应显示野生型p53基因的表达水平。结果:（1） MTT显示经不同浓度BMK作用于细胞48h后,能够明显抑制HL-60细胞的生长,且其作用在一定范围内呈对浓度依赖性;其IC50约为139.67mg/L。（2）流式细胞术分析显示BMK（100μg/ml和200μg/ml）作用于细胞24h后,细胞的总凋亡率均有升高,BMK 200μg/ml可以使HL-60细胞凋亡率提高到26.53%,与对照组相比（凋亡率为6.89%）,差异有统计学显著意义（p<0.01）。（3）流式细胞仪分析显示BMK处理后细胞的caspase-3活化表达增高,主峰右移,caspase-3阳性的细胞数由（2.82±0.90）%增至（7.59±1.46）%,差异有统计学显著意义（P<0.01）。（4）反转录聚合酶链反应（RT-PCR）未见有特异性条带的出现,说明其诱导凋亡途径是p53非依赖性凋亡。结论:（1）东亚钳蝎毒（BMK）对急性早幼粒白血病细胞株HL-60有一定的细胞毒作用,能够剂量依赖性地抑制其生长。（2） BMK可能通过诱导HL-60细胞凋亡来发挥它的抑制细胞生长作用。（3） caspase-3的活化参与了BMK诱导HL-60细胞凋亡的过程。（4） BMK诱导HL-60细胞凋亡是p53非依赖性的。
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