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PRL基因多态性与荷斯坦奶牛DHI测定指标的关联分析

2020-12-15阅读(721)

PRL基因多态性与荷斯坦奶牛DHI测定指标的关联分析

论文摘要

催乳素是一种多肽激素,由垂体前叶分泌,在繁殖、泌乳和免疫功能中都发挥着重要的作用。催乳素促进泌乳,可以提高乳产量,但其与体细胞计数（SCC）是否有关,迄今尚无报道。体细胞计数是评定奶牛是否患乳腺疾病的重要指标之一。通常,体细胞数越高,奶牛患乳房炎的可能性愈大。为了分析催乳素基因多态性与体细胞计数之间的关系,本研究应用PCR-RFLP和CRS-RFLP方法,分析了120头中国荷斯坦青年母牛催乳素基因的4个单核苷酸多态位点（PRL6216, PRL8398, PRL8377和PRL8510）的多态性及其与第一泌乳期体细胞之间的关系。研究结果如下：1.在PRL6216位点,发现等位基因A和B,由此产生3种基因型AA, AB和BB。其中AB基因型频率最高（频率为0.792）,BB基因型频率最低（频率为0.025）。BB基因型奶牛SCC水平（P<0.05）和乳脂率（P<0.05）、乳蛋白率最高,而产奶量和乳糖率（P>0.05）最低。2.在PRL8398位点,发现等位基因A和G。等位基因G的频率为0.745,是该位点优势等位基因。AG基因型奶牛SCC和产奶量（P<0.05）最高。3.在PRL8377位点,C等位基因（频率为0.871）为优势等位基因。GG基因型奶牛产奶量和SCC最高。4.在PRL8510位点,存在C和T两个等位基因,但是没有检测到CT基因型,CC基因型的产奶量显著高于TT基因型（P<0.05）。本次研究结果证明,催乳素基因是评定中国荷斯坦奶牛泌乳力和乳质量的重要分子标记,可用于分子标记辅助选择。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩略词表
  • 1 文献综述
  • 1.1 奶牛乳房炎概述
  • 1.2 引起乳房炎的病因
  • 1.3 乳房炎的防治现状与发展方向
  • 1.4 乳房炎与SCC
  • 1.4.1 SCC作为乳房炎诊断标准
  • 1.4.2 SCC作为奶牛乳房炎抗性选育标准
  • 1.5 乳房炎分子标记研究进展
  • 1.5.1 牛主要组织相容性抗原复合物（BoLA）基因
  • 1.5.2 乳铁蛋白基因
  • 1.5.3 β-防御素基因
  • 1.5.4 Toll样受体基因
  • 1.5.5 热休克蛋白70基因
  • 1.6 催乳素基因概述
  • 2 研究目的与意义
  • 3 材料与方法
  • 3.1 试验材料
  • 3.1.1 试验牛与血液采集
  • 3.1.2 DHI数据记录
  • 3.2 主要仪器设备及试剂溶液的配制
  • 3.2.1 主要仪器设备
  • 3.2.2 工具酶及主要试剂
  • 3.2.3 主要药品及试剂的配制
  • 3.3 实验方法
  • 3.3.1 血液基因组DNA的提取
  • 3.3.2 基因组DNA浓度测定和质量检测
  • 3.3.3 PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测
  • 3.3.4 PRL基因的PCR反应
  • 3.3.4.1 PCR引物设计及反应条件
  • 3.4 统计分析
  • 3.4.1 基因频率和基因型频率计算
  • 3.4.2 群体杂合度
  • 3.4.3 有效等位基数
  • 3.4.4 多态信息含量（polymorphic information content,PIC）值的计算
  • 3.4.5 Hardy-Weinberg平衡检验
  • 3.4.6 统计分析模型
  • 3.4.7 SCC的转换与校正
  • 4 结果与分析
  • 4.1 基因DNA提取物
  • 4.2 PRL基因6216位点的遗传多态性分析
  • 4.2.1 PCR扩增结果
  • 4.2.2 RFLP分析结果
  • 4.3 PRL基因8398位点的遗传多态性分析
  • 4.3.1 PCR扩增结果
  • 4.3.2 RFLP分析结果
  • 4.4 PRL基因8377位点的遗传多态性分析
  • 4.4.1 PCR扩增结果
  • 4.4.2 RFLP分析结果
  • 4.5 PRL基因8510位点的遗传多态性分析
  • 4.5.1 PCR扩增
  • 4.5.2 RFLP分析结果
  • 4.6 PRL基因等位基因型的统计分析及与SCC的关系
  • 4.6.1 PRL基因6216位点的基因频率分析与性状关联分析
  • 4.6.2 PRL基因8398位点的基因频率分析与性状关联分析
  • 4.6.3 PRL基因8377位点的基因频率分析与性状关联分析
  • 4.6.4 PRL基因8510位点的基因频率分析与性状关联分析
  • 4.7 Hardy-Weinberg平衡检验
  • 5 讨论
  • 5.1 关于环境对乳房炎发生率的影响
  • 5.2 关于CRS-RFLP技术
  • 5.3 关于基因偏态的问题
  • 5.4 关于6216位点的SNP
  • 5.5 关于PRL8398位点的SNP
  • 5.6 关于PRL8377位点和PRL8510位点的SNP
  • 6 小结
  • 6.1 主要研究成果
  • 6.2 本研究的特色和创新点
  • 参考文献
  • 致谢

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