禽流感病毒分离、复合多表位重组体构建及实验免疫研究

论文摘要

本研究分离了1株禽流感病毒（AIV）A/Chicken/Jilin/9/（H5N1）（JL9/04）,并进行了全基因组序列测定和遗传进化关系分析。结果表明,JL9/04株各基因分别与猪源H5N1亚型、人源H5N1亚型、禽源H9N2亚型毒株同源性较高（96%～98%）,JL9/04株符合AIV强毒株HA基因裂解位点的分子模式。表明在2004年吉林省禽流感暴发中,猪源H5N1亚型与禽源H9N2亚型AIV起了不可忽视的作用。以上述研究为基础,根据H3、H9亚型抗原表位及其它主要抗原（NA、M、NP）表位基因设计并合成了流感病毒复合多表位基因盒Epi。构建与筛选出表达Epi基因盒的DNA重组体pRI-Epi,共表达H5、H7亚型AIV HA与Epi基因的DNA重组体pRI-H57-Epi,共表达H5、H7亚型AIV HA、Epi基因及鸡IL-18基因的鸡痘病毒重组株vFA7935L18。SPF鸡和BALB/c小鼠实验免疫研究结果表明,pRI-Epi免疫组检测到了H3、H9亚型流感病毒HA的抗体;pIRE-H57-Epi和vFA7935L18免疫组检测到了H3、H5、H7、H9亚型流感病毒HA的抗体;pRI-Epi、pIRE-H57-Epi和vFA7935L18均能诱导机体产生较强的细胞免疫反应。说明所构建的DNA重组体与鸡痘病毒重组株有良好的免疫原性,为最终获得能同时预防多种亚型流感病毒的多价疫苗奠定了基础。

论文目录

• 前言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 禽流感病毒的分子生物学研究进展
• 1 禽流感病毒（AIV）概述
• 2 AIV 基因组及其编码的蛋白质
• 3 AIV 复制的分子机制
• 4 AIV 致病性的分子生物学基础
• 5 AIV 的基因遗传变异性
• 6 人类感染 AIV 的分子机制
• 7 结语
• 第二章 流感疫苗研究进展
• 1 灭活苗
• 2 减毒活疫苗
• 3 重组活载体疫苗
• 4 核酸疫苗
• 5 转基因动物和转基因植物源疫苗
• 6 疫苗佐剂的应用
• 7 未来疫苗的发展方向分析与展望
• 第二篇 研究内容
• 第一章 AIV 分离株A/CHICKEN/JILIN/9/2004（H5N1）基因组全长序列测定及各基因的遗传分析
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二章 流感病毒复合多表位盒与DNA 重组体的构建
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 流感病毒复合多表位鸡痘病毒重组株的构建
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第四章 流感病毒复合多表位重组体SPF 鸡实验免疫研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 第五章 流感病毒复合多表位重组体小鼠实验免疫研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 4 小结
• 结论
• 参考文献
• 攻博期间发表的学术论文和其它成果
• 中文摘要
• 英文摘要
• 致谢
• 导师简介
• 作者简介
• CURRICULUM VITAE