论文摘要
目的:研究同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）在生理浓度铜离子(10μmol/LCu2+)作用下能否诱导PC12细胞凋亡,并对其可能机制进行初步探讨。 方法:将细胞随机分成对照组和处理组,对照组为正常培养细胞,处理组为用不同浓度的Hey伴或不伴生理浓度Cu2+与PCI2细胞作用。采用MTT法检测细胞存活率;倒置相差显微镜观察细胞形态;Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态变化;琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解;流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞线粒体膜电位;RT-PCR分析bc1-2和bax mRNA的表达水平。 结果:不同浓度（0.125-1.0mmol/L）Hcy在10μmol/L Cu2+的作用下可以导致PC12细胞凋亡,具有明显的剂量-反应关系;抗氧化剂NAC干预后细胞凋亡率下降;凋亡早期就可以观察到细胞线粒体膜电位的下降;bc1-2mRNA表达升高,baxmRNA表达降低,有hey浓度依赖性。不同浓度Hey单独作用于PC12细胞时,各项检测指标均无明显变化。 结论:高浓度Hcy在生理浓度Cu2+作用下可诱导PC12细胞凋亡,且凋亡诱导作用具有hcy浓度依赖性。其机制可能与氧化应激、线粒体膜电位的改变及调节bc1-2和bax mRNA的比值有关。
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