论文摘要
营养贮藏蛋白质（Vegetative Storage Proteins,简称VSPs）作为一种季节性氮素贮藏对树木的生长、开花和结果以及树木对逆境的反应方面都有重要意义。本文以我国特有的珍贵树种银杏（Ginkgo biloba.L）为研究对象,采用光学、电子显微镜技术和SDS-PAGE技术研究了银杏枝条和根中营养贮藏蛋白质的分布特点及其在年生长周期中的动态变化规律,在此基础之上,采用免疫印迹技术（Western-blotting）、间接酶标免疫细胞化学定位和胶体金免疫细胞化学定位技术,分离鉴定了银杏主要的营养贮藏蛋白质。主要结论如下:（1）银杏营养贮藏蛋白质主要在枝条和根的次生韧皮部细胞中分布。另外,枝条的皮层细胞、木质部射线细胞、根的木射线细胞以及初生木质部与次生木质部之间的薄壁细胞中均有分布,形成层细胞中几乎没有营养贮藏蛋白质分布。（2）银杏营养贮藏蛋白质在细胞质中合成,之后在液泡中积累,其形态具有多样性,呈絮状、颗粒状、圆球状、不规则块状和均一细沙状。积累初期,营养贮藏蛋白质多以均一絮状或细沙状出现在中央大液泡中。在休眠季节,营养贮藏蛋白质则多以颗粒状、圆球状和不规则块状积累在众多大小不等的小液泡中。总体而言,不同形态的营养贮藏蛋白质存在于不同的细胞中。（3）银杏营养贮藏蛋白质具有明显的季节变化规律,其变化过程可以划分为降解和积累两个阶段。在树木的休眠期,枝条的树皮和木质部中积累了大量营养贮藏蛋白质,当年生枝条中积累量多于2年生枝条,树皮中多于木质部。在芽萌发和抽新梢的过程中,这些蛋白质逐渐降解,直至完全消失。降解的贮藏蛋白质为新梢生长提供重要氮源。5月中旬,随着新梢的生长和叶片的完全成熟,新梢中重新开始积累营养贮藏蛋白质,落叶期间营养贮藏蛋白质积累量迅速增加,12月份积累量达到最大。侧根中营养贮藏蛋白质的动态变化规律与枝条类似,但其降解时期比枝条早,大量开始积累的时期比枝条晚,且积累量不如枝条丰富,其动态变化过程可能与根自身的生长活动有关。（4）银杏营养贮藏蛋白质具有边消耗边积累的特点,新梢早期就能积累营养贮藏蛋白质。（5）采用SDS-PAGE技术,从当年生枝条的树皮组织中分离并纯化出两种相对含量高的蛋白质,它们的分子量为36kDa和32kDa,用它们分别免疫新西兰白兔后成功获得了这两种蛋白质的多克隆抗体。Western-blotting分析表明,36kDa和32kDa具有相同的抗原决定簇。间接免疫酶标细胞化学定位和胶体金免疫细胞化学定位均证明,36kDa和32kDa蛋白质是营养贮藏蛋白质细胞液泡蛋白质内含物的主要成分,它们符合Clausen和Apel为树木营养贮藏蛋白质制定的3条标准,可以肯定,36kDa和32kDa蛋白质是银杏的主要营养贮藏蛋白质。
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标签：银杏论文; 营养贮藏蛋白质论文; 动态变化论文; 免疫印迹论文; 免疫细胞化学定位论文;