成纤维细胞分化为成肌纤维细胞初步机理探讨及对缺氧性肺动脉高压的作用

成纤维细胞分化为成肌纤维细胞初步机理探讨及对缺氧性肺动脉高压的作用

论文摘要

目的:研究缺氧性肺动脉高压(HPH)大鼠发病过程中无肌性肺动脉肌化的细胞来源,观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与转化生长因子β1(TGF-β1)基因动态表达变化及与无肌性动脉肌化的关系,同时以人胚肺成纤维细胞为研究对象,研究缺氧和缺氧+TGF-β1对人胚肺成纤维细胞表型的影响。从而了解成肌纤维细胞在慢性阻塞性肺疾病(COPD)继发缺氧性肺动脉高压发病中的可能作用,为COPD肺动脉高压发病机制提供新的理论依据。 方法:动物模型实验:实验采用常压低氧复制HPH大鼠模型(10%O2,每天间断缺氧8小时,共21天),在缺氧3天、7天、14天和21天不同时间点及对照组用右心导管法测定大鼠平均肺动脉压(mPAP),称量法计算右心室肥大指数(RVHI),HE染色进行缺氧性肺小动脉重塑(HPSR)观察。透射电镜观察外膜成肌纤维细胞和腺泡内血管壁细胞表型。原位杂交,免疫组化检测HIF-1α、iNOS和TGF-β1在HPH进展过程中的mRNA和蛋白动态变化及相互关系及其与mPAP,HPSR、RVHI的相关关系。细胞培养实验:人胚肺成纤维细胞(KMB17)复苏后取3-4代细胞作为实验细胞。实验分组:设计常氧组N(20%O2);低氧组H(1%O2+5%CO2+平衡氮);低氧+TGF-β1组H+T(1%O2+5%CO2+平衡氮,终浓度为5ng/mL)。免疫组化检测α-SMA以确定KMB17是否发生表型转化。 结果:缺氧7天起大鼠mPAP、管壁面积/管总面积(WA%)、管腔面积/管总面积(LA%)分别为(18.41±0.37)mmHg、(52.2±0.8)%、(47.8±0.8)%与对照组(14.02±0.41)mmHg、(64.5±1.3)%、(35.5±1.3)%比较差异有显著性(P<0.05),缺氧14天起稳定于高水平;缺氧14天RVHI为(25.0±1.8)%与对照组(23.6±0.5)%比较差异也有显著性(P<0.05)。(2)从缺氧7天开始无肌型动脉、部分肌型

论文目录

  • 一、主要英文缩略语英文索引
  • 二、中文摘要
  • 三、英文摘要
  • 四、引言
  • 五、论文正文
  • 5.1 材料与方法
  • 5.2 实验结果
  • 5.3 讨论
  • 5.4 结论
  • 六、参考文献
  • 七、附图
  • 八、综述
  • 九、在读硕士期间发表的论文及项目
  • 十、致谢
  • 相关论文文献

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