论文摘要
研究背景与目的创伤、骨病等所致关节软骨缺损在临床十分常见。关节软骨由于缺乏血管分布,当缺损大于直径3mm时不能自身修复。目前临床治疗关节软骨缺损的方法很多,但还没有公认最优的能实现长期透明软骨修复的方法。组织工程技术是再生修复关节软骨缺损最具潜力的方法之一。近年来,随着微创理论被广泛接受和各种新型可注射性医用材料的出现,构建可注射性组织工程软骨的研究成为热点。可注射性软骨制备技术将组织工程技术与微创技术有机结合,从而具备了良好的临床应用前景。目前用于软骨组织工程中的可注射性天然凝胶材料和人工合成聚合物凝胶均存在某些不足。壳聚糖作为一种天然多糖聚合物,其分子结构和理化生物学性质与软骨细胞外重要基质――透明质酸相似。能够模拟关节腔滑液和关节软骨细胞外基质,有利于润滑关节、促进软骨再生。因此探讨壳聚糖及其衍生物用于组织工程关节软骨支架的可行性具有重要意义。体外、体内异位构建或者用于修复颌面、食管等部位软骨缺损的可注射性组织工程软骨的相关研究报道较多,而直接注入关节腔原位构建组织工程软骨并再生修复关节软骨缺损的报道较少。2000年Chenite最早报道了具有温固化特性的壳聚糖/磷酸甘油（Chitosan/ Glycerophosphate, C/GP）凝胶以来,其应用研究主要在药物载体,而有关组织工程支架方面的研究甚少,尚未见C/GP复合软骨细胞修复关节软骨缺损的报道。为此,本实验通过制备能满足可注射性组织工程支架要求的C/GP凝胶,对C/GP进行初步的生物相容性和在体安全性评价。再将其作为软骨组织工程支架,制备C/GP-关节软骨细胞混悬液,分别于细胞恒温培养箱体外构建与培养,直接注入异体大耳白兔皮下和注入预先制备有关节软骨缺损动物模型的关节腔内。于一定时间,观察细胞-支架复合物体外培养、异体皮下成软骨能力,以及C/GP复合同种异体软骨细胞注入再生修复关节软骨缺损的有效性和可行性。为临床可注射性组织工程软骨的制备及其修复关节软骨缺损提供理论与实验依据。