论文摘要
本研究分别建立了五味子药材GC和HPLC色谱指纹图谱,并对药材质量进行了评价。分别建立了五味子药材挥发油中4种成分的同时含量测定,药材中10种木脂素成分的同时含量测定,药材中3种脂肪酸的同时含量测定方法。较系统地对五味子药材进行了质量控制方法研究。以上方法也为区别南、北五味子提供了依据,为南、北五味子的合理使用提供了参考。建立了五味子药材GC色谱指纹图谱,并指认了其中的5种成分。采用DB-17石英毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm),以N2为载气,流速为1.2mL·min-1,分流比为50∶1,进样口温度和检测器温度分别为230℃和250℃,升温程序为:50℃为起始温度维持2min,以10℃·min-1升温至130℃,维持20min,以30℃·min-1升温至190℃,维持6min,再以10℃.min-1升温至210℃,维持3min。对14批北五味子和12批南五味子药材进行GC色谱指纹图谱分析。对五味子药材GC指纹图谱获得的色谱峰相对峰面积进行聚类分析。将14批北五味子药材分为2类,其中Ⅰ类为推荐品,Ⅱ类为一般品。取Ⅰ类中12批药材,建立共有模式,采用药典委员会规定的色谱指纹图谱处理软件,计算各样品与共有模式间的相似度,结果相似度在0.90以上的五味子药材为推荐药材。将12批南五味子药材分为2类,其中Ⅰ类为推荐品,Ⅱ类为一般品。取Ⅰ类中Ⅱ批药材,建立共有模式,采用药典委员会规定的色谱指纹图谱处理软件,计算各样品与共有模式间的相似度,结果相似度在0.90以上的五味子药材为推荐药材。同时利用GC色谱指纹图谱对北五味子和南五味子进行了鉴定分析。建立了五味子药材HPLC色谱指纹图谱,并指认了其中的13种成分。采用Luna C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为水(A)-乙腈(B),梯度洗脱程序为:0-20min,45%B~65%B;20-26min,65%B;26-50min,75%B。检测波长220nm。对14批北五味子药材进行HPLC色谱指纹图谱分析。将14批北五味子药材分为2类,其中Ⅰ类为推荐品,Ⅱ类为一般品。取Ⅰ类中13批药材,建立共有模式,采用药典委员会规定的色谱指纹图谱处理软件,计算各样品与共有模式间的相似度,结果相似度在0.90以上的五味子药材为推荐药材。建立了五味子药材挥发油中4种成分的同时含量测定方法。采用DB-17石英毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm),以N2为载气,流速为1.2mL·min-1,分流比为10∶1,进样口温度和检测器温度分别为230℃和250℃,检测器为氢火焰离子化检测器(FID),升温程序为:50℃为起始温度维持2min,以10℃·min-1升温至130℃,维持5min。对14批北五味子药材挥发油中α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯和乙酸龙脑酯进行同时含量测定,其线性范围分别为0.020~0.205mg·mL-1(r=0.9998),0.006~0.104mg·mL-1(r=0.9993),0.006~0.162mg·mL-1(r=0.9994)和0.040~1.000mg·mL-1(r=0.9993);平均回收率分别为100.8%(RSD=1.1%),98.7%(RSD=2.9%),99.4%(RSD=0.9%)和96.4%(RSD=0.4%)。该方法简便、快捷、重复性好,为五味子药材的质量控制提供了方法。建立了五味子药材中10种木脂素成分的同时含量测定方法。采用Luna C18柱(250mmm×4.6mm,5μm),流动相为水(A)-乙腈(B),梯度洗脱程序为:0-20min,45%B~65%B;20-26min,65%B;26-50min,75%B。检测波长220nm,流速为0.8mL·min-1,柱温30℃。对12批北五味子药材中的10种活性成分五味子醇甲、戈米辛-D、戈米辛-J、五味子醇乙、前戈米辛、当归酰戈米辛-H、巴豆酰戈米辛-P、五味子甲素、戈米辛-N和五味子乙素进行同时含量测定,其线性范围分别为20~200μg·mL-1(r=0.9999),2~20μg·mL-1(r=0.9998),4~40μg·mL-1(r=0.9999),13.3~133.3μg·mL-1(r=0.9999),4~40μg·mL-1(r=0.9995),6.25~62.5μg·mL-1(r=0.9999),6.67~66.7μg·mL-1(r=1.0000);4~40μg·mL-1(r=0.9999),4~40μg·mL-1(r=0.9997)和10~100μg·mL-1(r=1.0000);平均回收率分别为99.3%(RSD=2.5%),100.2%(RSD=2.5%),102.1%(RSD=1.6%),98.5%(RSD=2.4%),96.5%(RSD:3.2%),99.4%(RSD=2.8%),99.1%(RSD:2.7%),97.5%(RSD=2.5%),101.9%(RSD=3.1%)和100.6%(RSD=3.5%)。该方法简便、准确、重复性好,为五味子药材的质量控制提供了定量方法。建立了五味子药材中3种脂肪酸的同时含量测定方法。采用DB-17石英毛细管色谱柱(30m×0.25mm×0.25μm),以N2为载气,流速为1.2mL·min-1,分流比为10∶1,进样口温度和检测器温度分别为250℃和250℃,检测器为氢火焰离子化检测器(FID),升温程序为:150℃为起始温度,以5℃·min-1升温至250℃。对14批北五味子药材中棕榈酸甲酯、油酸甲酯和亚油酸甲酯进行同时含量测定,其线性范围分别为0.01~0.1mg·mL-1(r=0.9997),0.038~0.380mg·mL-1(r=0.9997)和0.215~2.15mg·mL-1(r=0.9992);平均回收率分别为99.4%(RSD=2.4%),96.3%(RSD=2.4%)和96.4%(RSD=2.1%)。该方法简便、快捷、重复性好,可以作为五味子药材脂肪酸定量方法。