替米沙坦改善高脂饲养OLETF大鼠胰岛素抵抗并调节大鼠循环脂肪细胞因子水平

论文摘要

目的：探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（angiotensin Ⅱ type1receptor, AT1R）拮抗剂替米沙坦对高脂喂养OLETF （otsuka long-evans tokushima fatty, OLETF）大鼠2型糖尿病（Type2Diabetes Mellitus, T2DM）的预防作用,以及对大鼠胰岛素抵抗和糖脂代谢的影响。观察替米沙坦对高脂喂养OLETF大鼠循环脂肪细胞因子水平的调控作用。方法：4周龄雄性OLETF (otsuka long-evans tokushima fatty大鼠47只,同系同周龄LETO （long-evans tokushima otsuka）大鼠12只,体质量为150～200g均为日本大冢制药有限公司研究所惠赠,于清洁级环境以标准饲料适应性饲养4周。OLETF大鼠于8周龄开始给予高脂饲料喂养。至16周龄,进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）,各组大鼠均末出现糖耐量异常,根据OGTT2h血糖和体重将OLETF大鼠随机分为5组：①无干预的OLETF大鼠（IR组）,共10只；②二甲双胍干预的OLETF大鼠（MET组）,共10只,给予二甲双胍（100mg·kg-1·d-1）;③吡格列酮干预的OLETF大鼠（P组）,共8只,给予吡格列酮（10mg·kg-1·d-1）;④替米沙坦干预的OLETF大鼠（L组）,共10只,给予替米沙坦（5mg·kg-1·d-1）;⑤低剂量替米沙坦干预的OLETF大鼠（VL组）,共9只,给予替米沙坦（0.5mg·kg-1·d-1）。LETO大鼠（NC组）,共12只。22周龄时再次复查OGTT,全部OLETF大鼠均发生胰岛素抵抗。开始药物干预共26周,每日1次灌胃,对照组大鼠以等量蒸馏水灌胃,48周龄处死大鼠。观察：1.体重变化：自20周龄始每两周称重一次。2.血清指标：生化法测定血清游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇等代谢指标;葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖; ELISA法测定空腹胰岛素、血清视黄醇结合蛋白4（Retinol-binding protein4. RBP4）、网膜素、内脂素水平。所有结果均采用SPSS18.0软件分析处理。结果：1.各组大鼠2型糖尿病发病率比较：各组大鼠2型糖尿病发病率不同,差异有统计学意义（χ2=36.501.P=0.000）,且L组与IR组比较有下降趋势。2.各组大鼠体重比较：自20周龄开始,IR组、MET组、P组、L组和VL组间大鼠体重无明显差别,但IR组、MET组、P组、L组和VL组体重均明显高于NC组,差异有统计学意义（P<0.05）。至34周龄开始,L组体重较IR组和MET组有下降趋势,差异无统计学意义（P值分别为0.809和0.476）；L组体重较P组明显下降,差异有统计学意义（P=0.000）。3.各组大鼠糖脂代谢指标比较：①IR组与NC组比较,游离脂肪酸、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素和HOMA-IR明显升高,差异有统计学意义（P值分别为0.001、0.036、0.000、0.000、0.011和0.000）；ISI明显降低,差异有统计学意义（P=0.000）②L组与IR组比较,游离脂肪酸、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和HOMA-IR明显降低,差异有统计学意义（P值分别为0.005、0.029、0.000、0.031和0.022）；ISI明显升高,差异有统计学意义（P=0.017）③VL组与IR组比较,游离脂肪酸和低密度脂蛋白胆固醇明显降低,差异有统计学意义（P值分别为0.041和0.000）。④P组与IR组比较,总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和HOMA-IR明显降低,差异有统计学意义（P值分别为0.004、0.001、0.001和0.001）；ISI明显升高,差异有统计学意义（P=0.001）⑤L组与MET组比较,游离脂肪酸、总胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素和HOMA-IR明显降低,差异有统计学意义（P值分别为0.000、0.039、0.06、0.008和0.006）；ISI明显升高,差异有统计学意义（P=0.004）⑥L组与P组比较,游离脂肪酸、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR和ISI比较,差异均无统计学意义。4.各组大鼠循环脂肪细胞因子水平的比较：①IR组网膜素明显低于NC组、MET组、L组和VL组,差异有统计学意义（P值分别为0.000、0.026、0.000和0.006）内脂素明显高于NC组、P组、L组和VL组,差异有统计学意义（P值分别为0.001、0.007、0.002和0.026）；RBP4明显高于NC组和L组,差异有统计学意义（P值分别为0.000和0.000）②L组网膜素明显高于MET组和P组,差异有统计学意义（P值分别为0.07和0.024）；内脂素明显低于MET组,差异有统计学意义（P=0.013）；RBP4明显低于MET组、P组和VL组,差异有统计学意义（P值分别为0.000、0.006和0.009）5.脂肪细胞因子水平的直线相关分析：①网膜素与RBP4和内脂素呈负相关（r分别为-0.418和-0.415,均P<0.01）：②内脂素与HOMA-IR、游离脂肪酸和RBP4呈正相关（r分别为0.332、0.270和0.304,均P<0.05）,与ISI和网膜素呈负相关（r分别为-0.316和-0.415,均P<0.05）；③RBP4与空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、游离脂肪酸和内脂素呈正相关（r分别为0.465、0.400、0.534、0.294和0.304,均P<0.05）,与ISI和网膜素呈负相关（r分别为-0.567和-0.148.均P<0.01）。6.多元线性逐步回归分析：①以网膜素水平为因变量进行多元线性逐步回归分析,结果显示RBP4和内脂素是网膜素水平的独立影响因素。回归方程：Y^=248.282-0.52XRBP4-0.118Xvisfatin。②以RBP4水平为因变量进行多元线性逐步回归分析,结果显示ISI和网膜素是RBP4水平的独立影响因素。回归方程：Y^=84.799-10.955XISI0.192Xomentin。③以内脂素水平为因变量进行多元线性逐步回归分析,结果显示HOMA-IR和网膜素是内脂素水平的独立影响因素。回归方程：Y^=645.924-1.008Xomentin+2.371XHOMA-IR。结论：1.通过对OLETF大鼠的早期高脂饲养,成功建立了具有胰岛素抵抗及空腹高血糖的T2DM动物模型。2.高脂饲养使OLETF大鼠血清游离脂肪酸、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素和HOMA-IR明显升高,ISI明显降低；同时显著上调血清RBP4和内脂素水平并下调网膜素水平3.经过替米沙坦干预,可以改善OLETF大鼠的糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗状态,降低OLETF大鼠的T2DM发病率。替米沙坦对OLETF大鼠循环脂肪细胞因子的表达具有调控作用,可能通过降低血清RBP4和内脂素,提高网膜素的表达改善大鼠胰岛素抵抗。4.通过与二甲双胍和吡格列酮比较,显示替米沙坦在对大鼠循环脂肪细胞因子的调控方面更具优越性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语/符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、替米沙坦改善高脂饲养OLETF大鼠胰岛素抵抗
• 1.1 对象和方法
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 主要试剂及仪器
• 1.1.3 实验方法
• 1.1.4 指标测定
• 1.1.5 统计学方法
• 1.2 结果
• 1.2.1 各组大鼠体重变化
• 1.2.2 IR大鼠模型的建立
• 1.2.3 各组大鼠糖脂代谢指标比较
• 1.2.4 各组大鼠发病率比较
• 1.3 讨论
• 1.3.1 高脂饲养2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型的建立
• 1.3.2 替米沙坦与2型糖尿病胰岛素抵抗及糖脂代谢的关系
• 1.4 小结
• 二、替米沙坦调节高脂饲养OLETF大鼠循环脂肪细胞因子水平
• 2.1 对象和方法
• 2.1.1 实验动物
• 2.1.2 主要试剂及仪器
• 2.1.3 实验方法
• 2.1.4 指标测定
• 2.1.5 统计学方法
• 2.2 结果
• 2.2.1 各组大鼠血清RBP4、内脂素和网膜素水平比较
• 2.2.2 血清RBP4、内脂素和网膜素影响因素的相关分析
• 2.2.3 多元线性逐步回归分析
• 2.2.4 替米沙垣干预对大鼠血压的影响
• 2.3 讨论
• 2.3.1 脂肪细胞因子与胰岛素抵抗的关系
• 2.3.2 AngⅡ与胰岛素抵抗的关系
• 2.3.3 替米沙坦调节OLETF大鼠循环脂肪细胞因子、改善胰岛素抵抗的机制
• 2.4 小结
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 胰岛素抵抗研究进展
• 综述参考文献
• 致谢