本文主要研究内容
作者卡玛瑞（2019）在《植物灰霉病菌中新型双分体病毒的分子生物学特性研究》一文中研究指出：灰霉病是由死体营养型真菌灰葡萄孢(Botrytis cinerea)引起的一种重要植物病害。它的寄主范围广泛,可侵染1400多种植物,包括一些重要的经济作物,包括葡萄、草莓和番茄等。在作物收获前和收获后灰葡萄孢均可危害,并造成相当大的经济损失。由于大多数栽培的水果和蔬菜作物缺乏抗病品种,因此,灰霉病防治在很大程度上依赖反复使用杀菌剂。虽然可以达到预期的控制效果,但反复使用杀菌剂会引起环境污染,并产生抗杀菌剂菌株。因此,探索安全、可持续控制灰霉病措施(例如利用真菌病毒进行生物防治)日渐重要。目前,在灰葡萄孢中发现了很多弱毒相关真菌病毒,但还没有成功应用于灰葡萄孢生物防治。可能的限制因素包括以下两点:(i)由于菌株之间菌丝营养体不亲和,限制真菌病毒从含毒菌株向无毒菌株的传播;(ii)由于含毒菌株菌丝生长较慢,竞争力较低。因此有必要筛选更多含有真菌病毒的灰葡萄孢菌株。在本研究中,从灰葡萄孢QT5-19中发现了一种新的分体病毒属(Partitivirus)真菌病毒,对其分子特性,生物学特性以及生防潜力进行了评估。得到以下几点研究结果:1.获得了一株弱毒灰葡萄孢菌株QT5-19,从中鉴定出一种新的双分体病毒,发现该病毒与灰葡萄孢致病力衰退及发育缺陷(不能产生分生孢子和菌核)相关。在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar,PDA)培养基上(20℃),菌株QT5-19生长旺盛,产生粉红色色素,但不产菌核和分生孢子。QT5-19在苹果、黄瓜、油菜、草莓、葡萄、烟草和番茄等寄主上致病力极弱。通过病毒粒体提取,获得了一种球形病毒粒子,直径约为36 nm,包含两条双链RNA(dsRNA)片段,即dsRNA-1和dsRNA-2。对它们进行cDNA克隆,结果表明:dsRNA-1和dsRNA-2大小分别为1,909 bp和1,883 bp,分别编码依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)和衣壳蛋白(coat protein,CP)。基于RdRp和CP序列进行系统进化分析,结果表明:dsRNA-1和dsRNA-2与Alphapartitivirus属病毒成员聚成一类,是一个新成员,命名为Botrytis cinerea partitivirus 2(BcPV2)。BcPV2可以通过菌丝接触(融合)传染到3个强毒灰葡萄孢菌株08168,B05.10和XN-1,传染后的衍生菌株08168T、B05.10T和XN-1T生长迅速,但不能产生分生孢子和菌核。且在番茄上表现出弱致病力。可见,BcPV2与灰葡萄孢弱毒特性及产孢和产菌核缺陷密切相关。2.发现菌株QT5-19具有较强的腐生竞争能力,通过腐生竞争QT5-19可抑制强毒灰葡萄孢和核盘菌对植物的侵染。在PDA培养基上测定了QT5-19和灰葡萄孢强毒菌株08168以及QT5-19与强毒核盘菌EP-1PNA367之间的腐生竞争能力。结果表明:QT5-19较菌株08168和EP-1PNA367腐生竞争能力更强。可能机制包括:(i)QT5-19菌丝旺盛生长;(ii)产生挥发性抗真菌物质。对QT5-19腐生竞争能力的生物防治潜力进行了评估。结果表明:QT5-19菌丝碎片可以抑制强毒灰葡萄孢菌株08168和菌株Ep-1PNA367侵染油菜叶片。3.菌株QT5-19产生挥发性物质具有广谱的抗真菌活性。除了灰葡萄孢之外,QT5-19产生的挥发性物质对B.aclada、B.pyriformis、B.sinoallii、Rhizopus stolonifer、Sclerotinia minor、S.sclerotiorum和Streptobotrys caulophylli等真菌菌丝生长具有抑制作用。用小麦粒培养QT5-19,作为物质挥发性物质来源,测试其对草莓果实腐烂病的控制效果。结果表明:QT5-19产生的挥发性物质能有效抑制由灰葡萄孢、核盘菌、冻土毛霉和匍枝根霉引起的草莓果实腐烂病。通过GC-MS检测及数据库比对分析,共鉴定出26种挥发性物质,包括乙醛、庚醛、1-辛烯-3-醇、1-octen-3-ol、反-2-辛烯醛、反-2-壬烯醛、2-十一烷醇、2-癸烯醛、苯并噻唑、1-(2-羟基-5-甲苯基)-邻氨基苯乙酮和十四醇等。4.菌株QT5-19挥发性物质对番茄生长有显著促生作用。在密闭的生长容器中,用PDA培养QT5-19,用其产生的挥发性物质熏蒸处理番茄幼苗,以新鲜PDA熏蒸处理为阴性对照,以PDA培养的菌株RoseBc-3熏蒸处理为阳性对照。结果表明:与阴性对照和阳性对照相比,QT5-19挥发性物质显著(P<0.05)促进番茄幼苗的生长。QT5-19的挥发物质物质处理产生促生效应的最短时间为1周,利用qRT-PCR探究了番茄体内植物生长素(检测SlIAA9基因)、细胞分裂素(检测SlCKX1基因)、赤霉素(检测SlGAox1基因)和乙烯(检测SlACO1基因)等植物激素相关合成基因的表达水平。结果表明:QT5-19挥发性物质处理后,番茄幼苗叶片中SlIAA9和SlCKX1表达量显著上升。这一结果表明:QT5-19挥发性物质促进番茄幼苗生长可能是生长素和细胞分裂素合成增加有关。本研究表明感染BcPV2的灰葡萄孢菌株QT5-19对灰葡萄孢和核盘菌具有良好的生物防治的潜力。QT5-19产生的挥发性物质不仅具有抗真菌活性,而且对植物具有促生作用。
Abstract
hui mei bing shi you si ti ying yang xing zhen jun hui pu tao bao (Botrytis cinerea)yin qi de yi chong chong yao zhi wu bing hai 。ta de ji zhu fan wei an fan ,ke qin ran 1400duo chong zhi wu ,bao gua yi xie chong yao de jing ji zuo wu ,bao gua pu tao 、cao mei he fan jia deng 。zai zuo wu shou huo qian he shou huo hou hui pu tao bao jun ke wei hai ,bing zao cheng xiang dang da de jing ji sun shi 。you yu da duo shu zai pei de shui guo he shu cai zuo wu que fa kang bing pin chong ,yin ci ,hui mei bing fang zhi zai hen da cheng du shang yi lai fan fu shi yong sha jun ji 。sui ran ke yi da dao yu ji de kong zhi xiao guo ,dan fan fu shi yong sha jun ji hui yin qi huan jing wu ran ,bing chan sheng kang sha jun ji jun zhu 。yin ci ,tan suo an quan 、ke chi xu kong zhi hui mei bing cuo shi (li ru li yong zhen jun bing du jin hang sheng wu fang zhi )ri jian chong yao 。mu qian ,zai hui pu tao bao zhong fa xian le hen duo ruo du xiang guan zhen jun bing du ,dan hai mei you cheng gong ying yong yu hui pu tao bao sheng wu fang zhi 。ke neng de xian zhi yin su bao gua yi xia liang dian :(i)you yu jun zhu zhi jian jun si ying yang ti bu qin he ,xian zhi zhen jun bing du cong han du jun zhu xiang mo du jun zhu de chuan bo ;(ii)you yu han du jun zhu jun si sheng chang jiao man ,jing zheng li jiao di 。yin ci you bi yao shai shua geng duo han you zhen jun bing du de hui pu tao bao jun zhu 。zai ben yan jiu zhong ,cong hui pu tao bao QT5-19zhong fa xian le yi chong xin de fen ti bing du shu (Partitivirus)zhen jun bing du ,dui ji fen zi te xing ,sheng wu xue te xing yi ji sheng fang qian li jin hang le ping gu 。de dao yi xia ji dian yan jiu jie guo :1.huo de le yi zhu ruo du hui pu tao bao jun zhu QT5-19,cong zhong jian ding chu yi chong xin de shuang fen ti bing du ,fa xian gai bing du yu hui pu tao bao zhi bing li cui tui ji fa yo que xian (bu neng chan sheng fen sheng bao zi he jun he )xiang guan 。zai ma ling shu pu tao tang qiong zhi pei yang ji (potato dextrose agar,PDA)pei yang ji shang (20℃),jun zhu QT5-19sheng chang wang cheng ,chan sheng fen gong se se su ,dan bu chan jun he he fen sheng bao zi 。QT5-19zai ping guo 、huang gua 、you cai 、cao mei 、pu tao 、yan cao he fan jia deng ji zhu shang zhi bing li ji ruo 。tong guo bing du li ti di qu ,huo de le yi chong qiu xing bing du li zi ,zhi jing yao wei 36 nm,bao han liang tiao shuang lian RNA(dsRNA)pian duan ,ji dsRNA-1he dsRNA-2。dui ta men jin hang cDNAke long ,jie guo biao ming :dsRNA-1he dsRNA-2da xiao fen bie wei 1,909 bphe 1,883 bp,fen bie bian ma yi lai RNAde RNAju ge mei (RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)he yi ke dan bai (coat protein,CP)。ji yu RdRphe CPxu lie jin hang ji tong jin hua fen xi ,jie guo biao ming :dsRNA-1he dsRNA-2yu Alphapartitivirusshu bing du cheng yuan ju cheng yi lei ,shi yi ge xin cheng yuan ,ming ming wei Botrytis cinerea partitivirus 2(BcPV2)。BcPV2ke yi tong guo jun si jie chu (rong ge )chuan ran dao 3ge jiang du hui pu tao bao jun zhu 08168,B05.10he XN-1,chuan ran hou de yan sheng jun zhu 08168T、B05.10The XN-1Tsheng chang xun su ,dan bu neng chan sheng fen sheng bao zi he jun he 。ju zai fan jia shang biao xian chu ruo zhi bing li 。ke jian ,BcPV2yu hui pu tao bao ruo du te xing ji chan bao he chan jun he que xian mi qie xiang guan 。2.fa xian jun zhu QT5-19ju you jiao jiang de fu sheng jing zheng neng li ,tong guo fu sheng jing zheng QT5-19ke yi zhi jiang du hui pu tao bao he he pan jun dui zhi wu de qin ran 。zai PDApei yang ji shang ce ding le QT5-19he hui pu tao bao jiang du jun zhu 08168yi ji QT5-19yu jiang du he pan jun EP-1PNA367zhi jian de fu sheng jing zheng neng li 。jie guo biao ming :QT5-19jiao jun zhu 08168he EP-1PNA367fu sheng jing zheng neng li geng jiang 。ke neng ji zhi bao gua :(i)QT5-19jun si wang cheng sheng chang ;(ii)chan sheng hui fa xing kang zhen jun wu zhi 。dui QT5-19fu sheng jing zheng neng li de sheng wu fang zhi qian li jin hang le ping gu 。jie guo biao ming :QT5-19jun si sui pian ke yi yi zhi jiang du hui pu tao bao jun zhu 08168he jun zhu Ep-1PNA367qin ran you cai xie pian 。3.jun zhu QT5-19chan sheng hui fa xing wu zhi ju you an pu de kang zhen jun huo xing 。chu le hui pu tao bao zhi wai ,QT5-19chan sheng de hui fa xing wu zhi dui B.aclada、B.pyriformis、B.sinoallii、Rhizopus stolonifer、Sclerotinia minor、S.sclerotiorumhe Streptobotrys caulophyllideng zhen jun jun si sheng chang ju you yi zhi zuo yong 。yong xiao mai li pei yang QT5-19,zuo wei wu zhi hui fa xing wu zhi lai yuan ,ce shi ji dui cao mei guo shi fu lan bing de kong zhi xiao guo 。jie guo biao ming :QT5-19chan sheng de hui fa xing wu zhi neng you xiao yi zhi you hui pu tao bao 、he pan jun 、dong tu mao mei he pu zhi gen mei yin qi de cao mei guo shi fu lan bing 。tong guo GC-MSjian ce ji shu ju ku bi dui fen xi ,gong jian ding chu 26chong hui fa xing wu zhi ,bao gua yi quan 、geng quan 、1-xin xi -3-chun 、1-octen-3-ol、fan -2-xin xi quan 、fan -2-ren xi quan 、2-shi yi wan chun 、2-gui xi quan 、ben bing sai zuo 、1-(2-qiang ji -5-jia ben ji )-lin an ji ben yi tong he shi si chun deng 。4.jun zhu QT5-19hui fa xing wu zhi dui fan jia sheng chang you xian zhe cu sheng zuo yong 。zai mi bi de sheng chang rong qi zhong ,yong PDApei yang QT5-19,yong ji chan sheng de hui fa xing wu zhi xun zheng chu li fan jia you miao ,yi xin xian PDAxun zheng chu li wei yin xing dui zhao ,yi PDApei yang de jun zhu RoseBc-3xun zheng chu li wei yang xing dui zhao 。jie guo biao ming :yu yin xing dui zhao he yang xing dui zhao xiang bi ,QT5-19hui fa xing wu zhi xian zhe (P<0.05)cu jin fan jia you miao de sheng chang 。QT5-19de hui fa wu zhi wu zhi chu li chan sheng cu sheng xiao ying de zui duan shi jian wei 1zhou ,li yong qRT-PCRtan jiu le fan jia ti nei zhi wu sheng chang su (jian ce SlIAA9ji yin )、xi bao fen lie su (jian ce SlCKX1ji yin )、chi mei su (jian ce SlGAox1ji yin )he yi xi (jian ce SlACO1ji yin )deng zhi wu ji su xiang guan ge cheng ji yin de biao da shui ping 。jie guo biao ming :QT5-19hui fa xing wu zhi chu li hou ,fan jia you miao xie pian zhong SlIAA9he SlCKX1biao da liang xian zhe shang sheng 。zhe yi jie guo biao ming :QT5-19hui fa xing wu zhi cu jin fan jia you miao sheng chang ke neng shi sheng chang su he xi bao fen lie su ge cheng zeng jia you guan 。ben yan jiu biao ming gan ran BcPV2de hui pu tao bao jun zhu QT5-19dui hui pu tao bao he he pan jun ju you liang hao de sheng wu fang zhi de qian li 。QT5-19chan sheng de hui fa xing wu zhi bu jin ju you kang zhen jun huo xing ,er ju dui zhi wu ju you cu sheng zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自华中农业大学的卡玛瑞，发表于刊物华中农业大学2019-07-15论文，是一篇关于灰葡萄孢论文,弱毒论文,生物防治论文,华中农业大学2019-07-15论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自华中农业大学2019-07-15论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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