论文摘要
高效液相色谱（HPLC）作为一种高效、快速的分离分析技术,在生物工程、环境监测等领域获得广泛的应用。随着分析仪器向小型化发展的趋势,毛细管液相色谱（CLC）越来越多地被人们使用。由于用毛细管柱代替了常规液相柱,CLC节省了样品,减少了有机溶剂的消耗和对环境的污染。与常规液相色谱相比,CLC由于进样量的减小和柱上检测池检测光程的减小导致检测灵敏度的降低,本论文通过扩展检测池的检测光程和溶剂梯度效应以及管内固相微萃取技术（in-tube SPME）提高检测的灵敏度。主要研究内容有:1.建立了用CLC分离水溶性维生素的方法。采用硅胶基质ODS整体柱（27 cm×100μm I. D.）作为分离柱,以带有光程为3毫米的光纤检测池的紫外检测器作为检测手段,研究了甲醇浓度、缓冲液pH值对分离结果的影响。该方法测定5种水溶性维生素的检测限在14.6-53.5 ng/mL（S/N = 3）范围内,根据迁移时间和峰面积计算得到的迁移时间和峰面积的RSD均小于4.4%,回归方程的线性相关系数在0.9963-0.9994之间。用所建立的方法分析玉米样品,在玉米中未能检测到水溶性维生素,这是由于玉米中水溶性维生素的含量较低,我们所建立方法的灵敏度不够。2.建立了植物内源激素的CLC测定方法,通过扩展检测池的检测光程和溶剂梯度效应提高检测灵敏度。研究了甲醇浓度、缓冲液pH值、不同样品介质对分离结果的影响。该方法测定4种植物激素的检测限在27.7-196.1 ng/mL（S/N = 3）范围内,根据迁移时间和峰面积计算得到的迁移时间和峰面积的RSD均小于2.8%,回归方程的线性相关系数在0.9984-0.9989之间。用所建立的方法分析玉米样品,在玉米中检测到玉米素（ZT）、赤霉素（GA3）和吲哚-3-乙酸（IAA）,并对GA3和IAA进行了定量分析。3.建立了一种in-tube SPME与CLC在线联用的方法。以毛细管整体柱作为固相萃取柱,对脂溶性维生素及β-胡萝卜素进行萃取富集并在CLC上分离。通过扩展检测池的检测光程和在线in-tube SPME技术提高检测灵敏度。考察了不同流动相、样品基质、进样体积等主要因素对分离和富集结果的影响。该方法测定脂溶性维生素的检测限在1.9 - 176 ng/mL（S/N = 3）范围内。根据迁移时间和峰面积计算得到的迁移时间和峰面积的RSD均小于5.0%,回归方程的线性相关系数在0.9981 - 0.9999之间。用所建立的方法分析玉米样品,在玉米中检测到维生素E（VE）,并对其进行了定量分析。