雷公藤红素和雷公藤甲素对PCa细胞作用的实验研究

论文摘要

前列腺癌（Prostate Cancer,PCa）是影响男性健康的一个重要问题,全世界每年因此病去世的人超过220000人。尽管前人对于前列腺癌诊断和治疗方法的研究已取得很大的进展,但是怎样彻底的移除和完全治愈前列腺癌仍是一个未知数。本研究利用小分子化合物雷公藤红素和雷公藤甲素处理雄激素非依赖性的PCa细胞PC-3和雄激素依赖性的PCa细胞LNCaP,观察药物对PCa细胞生长、增殖及凋亡的影响,并检测前列腺特异性抗原PSA水平变化,初步证明这两种药物抑制PCa细胞生长、增殖,为后续的药物抗癌研究提供细胞学依据。本研究用0.1μM、1μM和10μM雷公藤红素和甲素处理PC-3和LNCaP,然后用台盼蓝染色,计算细胞数量后绘制生长曲线,从而检测药物对PCa细胞生长的影响;运用MTT法进行细胞半数抑制率IC50分析;Annexin V-FITC/PI双染细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞凋亡;化学发光法检测前列腺特异性抗原PSA水平。结果表明:（1）0.1μM雷公藤红素在一定程度上抑制PCa细胞生长,0.1μM雷公藤甲素基本上已经完全抑制PCa细胞生长,但红素对PCa细胞生长抑制效果不如甲素。0.1μM红素处理后PCa细胞生长速度较对照组细胞缓慢许多。1μM红素基本上已经完全抑制PC-3细胞的生长,10μM红素则可导致PC-3细胞死亡。1μM红素抑制LNCaP细胞缓慢生长,在其处理第五天时细胞全部死亡,10μM红素处理LNCaP细胞72小时,细胞全部死亡。然而,0.1μM、1μM、10μM三个浓度的甲素对PCa细胞的抑制作用基本无差别。（2）红素处理PC-3和LNCaP后IC50分别为1.16μM、2.57μM,甲素处理PC-3和LNCaP后IC50分别为274.60nM、149.45nM。与对照组细胞相比,0.1μM红素已抑制PC-3增殖。红素从0.5μM开始,随着其浓度的增大,它对PC-3细胞的抑制作用也越来越明显。0.1μM红素对LNCaP细胞抑制作用不明显,但从0.5μM这个浓度开始,随着红素浓度的增加其对LNCaP的增殖抑制作用越发明显。然而,0.005μM甲素对PCa细胞增殖抑制作用就非常明显,且随其浓度的增大其对细胞的抑制作用越来越明显。由此可知:两种药物均抑制PCa细胞生长、增殖,抑制作用随着药物浓度的增加而越来越显著,并且甲素对PCa细胞生长、增殖抑制作用更强。（3）两种药物作用后,细胞均发生凋亡,甲素诱导细胞凋亡现象更明显。在两种PCa细胞中,药物诱导LNCaP细胞凋亡现象更明显。（4）两种药物均可使PSA水平下降,甲素使PSA水平下降程度更为显著,并且药物处理48h后的PSA下降程度较24h的更为明显。由此可知:雷公藤红素和雷公藤甲素能使PCa细胞生长和增殖受到抑制、细胞发生凋亡、PSA水平下降,并且甲素对PCa细胞的各种作用更为明显。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 小分子化合物对PCa 作用研究进展
• 1.1.1 雷公藤红素研究进展
• 1.1.2 雷公藤甲素研究进展
• 1.2 前列腺特异性抗原PSA 研究进展
• 1.3 本研究的方法、目的及意义
• 第二章 实验材料与方法
• 2.1 实验材料与试剂
• 2.1.1 细胞培养用材料和试剂
• 2.1.2 MTT 法测IC50 所用材料和试剂
• 2.1.3 生长曲线材料和试剂
• 2.1.4 细胞凋亡检测材料和试剂
• 2.1.5 化学发光法检测PSA 水平变化所用材料和试剂
• 2.2 仪器
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 实验技术路线
• 2.3.2 前列腺癌细胞培养
• 2.3.3 MTT 法检测细胞半数抑制率IC50
• 2.3.4 生长曲线
• 2.3.5 细胞凋亡检测
• 2.3.6 LNCaP 细胞中前列腺特异性抗原PSA 水平变化检测
• 2.4 数据分析
• 第三章 实验结果与分析
• 3.1 雷公藤红素和雷公藤甲素抑制PCa 细胞增殖
• 3.2 生长曲线结果
• 3.3 雷公藤红素和雷公藤甲素诱导PCa 细胞凋亡
• 3.3.1 荧光显微镜下观察细胞凋亡结果
• 3.3.2 流式细胞仪检测凋亡情况
• 3.4 前列腺特异性抗原PSA 水平变化检测结果
• 第四章 总结、讨论及展望
• 4.1 雷公藤红素和雷公藤甲素抑制PCa 细胞生长、增殖
• 4.2 雷公藤红素和雷公藤甲素诱导PCa 细胞凋亡
• 4.3 雷公藤红素和雷公藤甲素下调PSA 水平
• 参考文献
• 缩略词
• 致谢
• 作者简介