论文摘要
从丹皮中分离水溶性多糖，所得粗多糖经反复冻融、高速离心、DEAE-52离子交换和分子筛分离等方法，得级分PSM-2bA与PSM-2bB，经高压液相色谱方法证明为均一组分，经GC-MS分析，PSM-2bA的单糖组成为Rha、Ara、Xyl、Man、Glc、Gal，摩尔比依次为3.55：7.06：2.11：1.00：5.60：12.91；PSM-2bB的单糖组成为Rha、Ara、Xyl、Man、Glc、Gal，摩尔比依次为3.43：8.05：1.00：1.00：24.94：9.01。苯酚硫酸法测定了两组分的多糖含量分别为91.8％、82.6％；间羟联苯法测定糖醛酸含量分别为4.2％、15.2％；考马斯亮兰法测定蛋白质含量分别为2.7％、1.3％。以上结果表明，PSM-2bA与PSM-2bB为酸性杂多糖。对PSM-2bA和PSM-2bB的结构研究采取了13C-NMR分析，部分酸水解，高碘酸氧化和Simth降解，IR分析，GC-MS分析，甲基化分析等方法，甲基化产物经水解、乙酰化后用GC-MS进行测定。结果分析表明：PSM-2bA与PSM-2bB均为多分枝结构；PSM-2bA为具有多分支点的主链连接短支链的结构；其主链的重复结构可能为：PSM-2bB则为长支链的结构。其主体结构由Glc（1→3），Glc（1→2），Gal（1→2，4），Rha（1→3）等单元组成，其主链的重复结构可能为：通过刚果红试验，透射电镜及环境扫描电镜研究和观察了PSM-2bA的显微结构，推导出PSM-2bA的显微结构为由亚基组成的螺旋结构相互缔和，形成了网状高级结构，在天然状态下，PSM-2bA为条带状形态。基于乙酰化效果是影响GC或GC-MS分析结果的关键因素，本文对单糖乙酰化条件也进行了研究。利用气相色谱—质谱联用技术（GC-MS）检测五种常见单糖（木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖）的乙酰化产物含量，采用正交试验综合考察了还原时间、还原温度、乙酰化温度、乙酰化时间等因素对单糖回收率的影响及规律。结果表明，还原温度和乙酰化时间的影响最为显著。总结出了单糖衍生化最佳的反应条件为还原温度50℃、还原时间2.5h；乙酰化温度90℃、乙酰化时间2.5h。