vMIP-Ⅱ对SIV感染的食蟹猴TCRVβ基因表达和T细胞增殖影响的探讨

论文摘要

目的:本室通过基因重组的方法克隆的vMIP-Ⅱ属于β趋化因子家族,具有广谱的趋化因子受体结合活性,可与CC类和CXC类趋化因子受体结合以阻止HIV病毒感染CD4+细胞。检测感染SIV初期用药的食蟹猴外周血T细胞TCRV β优势表达和克隆性分布情况,了解不同分组内TCRV β基因优势表达差异和克隆性分布的趋势,通过分析特异性TCRV β亚家族表达水平的变化及T细胞克隆性的改变,了解药物对食蟹猴的体内免疫状况的影响,对于评价药物疾病的疗效是一个客观的指标。 方法:11只食蟹猴感染前后外周血PBMC样本通过半定量RT—PCR技术分析其中14个TCRV β亚家族T细胞的表达情况,并运用高敏感性的基因扫描技术分析用药组与感染组相比差异表达的T细胞TCRV β 7亚家族基因中CDR3长度变化,通过GENOTYPER2.0软件分析从而了解其克隆性。 结果:与感染前正常食蟹猴外周血T细胞的14个TCRV β亚家族中表达（除去表达量极低的10个亚家族）相比较,感染后17天三组食蟹猴外周血14个TCRVβ亚家族都有表达,未出现表达缺失。感染后SIV组中部分样品V β 7,8,14,16的表达量与感染前比较有上升趋势;vMIP-Ⅱ组中TCRV β亚家族的表达量的变化趋势与SIV组相似,表达量上升更加明显。治疗组中TCRV β亚家族的表达量的变化与正常对照组比较,V β 7、8的表达量上升。 基因扫描结果显示感染前6个标本中V β 7亚家族的表达为多克隆的,感染后V β 7家族的表达则有寡克隆的趋势,部分为寡克隆性的。 结论:体内实验研究表明SIV感染初期的食蟹猴体内部分TCRV β亚家族的表达量有所变化,一些V β亚家族有特异性的增生,且增生的TCRV β亚家族克隆性发生改变,提示其可能为针对病毒的特异性增生。vMIP-Ⅱ对此种V β亚家族的表达的增生有促进的作用,推测其对免疫系统的应答有增强的作用,促使特异性应答的免疫细胞的增生。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 T细胞受体结构与功能特点
• 1.2 T细胞超抗原
• 1.2.1 T细胞超抗原的意义作用
• 1.2.2 超抗原与T细胞的作用方式和特征
• 1.3 艾滋病与超抗原的关系
• 1.4 艾滋病中TCRVβ现阶段的研究进展
• 1.5 HIV感染途径及共受体的发现
• 1.6 趋化因子受体在T细胞上的表达
• 1.7 vMIP-Ⅱ的来源及特性
• 1.7.1 vMIP-Ⅱ的来源及结构
• 1.7.2 vMIP-Ⅱ对机体免疫的影响
• 1.8 研究目的和技术路线
• 第二章 实验材料和试剂
• 2.1 材料
• 2.2 实验仪器、设备
• 2.3 药品及主要试剂
• 2.4 主要实验器具处理
• 2.5 主要试剂的配制
• 第三章 实验方法及步骤
• 3.1 实验动物的处理
• 3.2 PBMC中TCRVβ亚家族的优势表达分析
• 3.3 T细胞克隆性分析
• 第四章 结果
• 第五章 讨论
• 第六章 结论
• 参考文献
• 缩略语表
• 在读期间发表的论文
• 致谢