过氧亚硝酸论文-刘光照

过氧亚硝酸论文-刘光照

导读:本文包含了过氧亚硝酸论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:活性氧,过氧亚硝酸根,新识别基团,荧光探针

过氧亚硝酸论文文献综述

刘光照[1](2019)在《基于甲酰胺和内酰胺识别基团构建过氧亚硝酸根荧光探针》一文中研究指出过氧亚硝酸根(ONOO~-)是一种重要的活性氧,由一氧化氮(NO)和超氧阴离子自由基(O_2~(·-))反应生成。ONOO~-能够帮助机体杀死侵入的病原体,在宿主免疫反应中发挥重要作用。此外,ONOO~-可作为信号分子,参与细胞信号传导过程。然而,由于具有强氧化性和亲核性,ONOO~-能够与机体内的多种生物组分(包括蛋白质、脂质以及核酸等)发生反应,使其结构改变、功能失调,最终导致细胞凋亡或坏死。越来越多的研究表明,ONOO~-与众多疾病的发生发展密切关联,如神经退行性疾病、慢性炎症、缺血再灌注损伤、自身免疫疾病和癌症等。因此,研究ONOO~-在细胞及体内的产生、分布及浓度变化,对于阐明其生理和病理学作用机制,对于相关疾病的诊断、治疗及发病机制研究,具有重要意义。基于探针的荧光成像技术能够对细胞及活体中的ONOO~-进行原位荧光成像检测,是研究ONOO~-相关化学生物学和病理学的有效工具。虽然研究人员发展了多种ONOO~-荧光探针,由于(1)缺乏高选择性识别基团,(2)现有探针结构复杂、合成困难、产率低,(3)缺少通用型设计策略,目前ONOO~-的选择性识别与生物成像仍然具有一定的挑战性。本论文基于两类全新的ONOO~-识别基团(甲酰胺和内酰胺),构建了两个系列的新型分子荧光探针(FA系列和LT系列),用于细胞及活体内ONOO~-的原位荧光成像,从而建立了病理学过程中ONOO~-浓度波动的实时荧光检测方法。具体研究工作如下:(一)将甲酰胺作为ONOO~-的新型识别基团。本论文采用四种常见的氨基荧光团(香豆素、氨基萘、萘酰亚胺和苯并吩恶嗪),通过一步甲酰化反应,分别制备出含有甲酰胺基团的四种荧光探针(FA-Blue,FA-Green,FA-Yellow和FA-Red)。研究发现,四种探针均能与ONOO~-反应,导致酰胺键断裂,释放出相应的氨基荧光团,分别发出蓝色、绿色、黄色和红色荧光,探针响应迅速,选择性好,灵敏度高,且能对活细胞内的ONOO~-进行原位荧光成像。此外,采用探针FA-Yellow,经双光子荧光成像和流式细胞分析,我们发现百草枯处理的细胞及小鼠主要脏器(心脏、肝脏、肺和肾脏)内ONOO~-水平显着升高,推测ONOO~-可能是百草枯诱发器官损伤等毒性效应的重要因素。结果表明,ONOO~-诱发的甲酰胺去甲酰化反应是一种简便、高效、通用的ONOO~-识别和生物成像策略,将会促进ONOO~-相关病理生理学的研究进展。(二)将内酰胺作为ONOO~-的新型识别基团。由两种氨基荧光团(氨基萘和萘酰亚胺)分别与酮基丙二酸二乙酯发生取代-环化反应,制备含有内酰胺结构的分子荧光探针LT-Green和LT-Yellow。研究发现,两种探针均能特异性识别ONOO~-,引起荧光增强,且响应迅速,灵敏度高。此外,两种探针均能够对活细胞内的ONOO~-进行双光子荧光成像。探针与ONOO~-的反应机理以及探针的生物学应用正在进一步研究之中。综上所述,本论文分别以甲酰胺和内酰胺作为ONOO~-识别基团,发展了两类分子荧光探针。两类探针均能够快速响应ONOO~-,具有较高的灵敏度和选择性,能够用于化学体系中ONOO~-的荧光检测。此外,探针能够用于监测细胞及动物模型中ONOO~-的产生、分布及浓度变化,为ONOO~-病理生理学及相关疾病的发病机制研究提供了高效的原位荧光成像工具。(本文来源于《山东师范大学》期刊2019-03-15)

侯田鑫[2](2019)在《基于花菁染料新型荧光分子探针的设计合成及其对细胞内过氧亚硝酸根阴离子的检测》一文中研究指出过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-)是一种短寿命的内源性活性物质,在许多生理和病理过程中起着重要作用。在这项工作中,我们合成了基于苯并噻唑衍生的花菁结构的近红外荧光探针Cy-SN,用于测定过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-。设计的探针通过氧化裂解共轭的碳碳双键与ONOO-特异性反应并产生非荧光产物。同时,与ONOO-反应后,探针在630 nm处的特征吸收大大降低,伴随着从亮蓝色到绿色黄色的剧烈颜色变化,呈现出明显的可视化特性。我们研究并证明了探针能够以剂量反应方式用于测量ONOCT并且具有低至26 nM的检测限。此外,我们通过共聚焦荧光显微镜将探针Cy-SN应用于活细胞中内源性ONOO-的成像,其显示出良好的细胞渗透性和低细胞毒性。探针Cy-SN用于外源ONOC-比色检测和内源荧光成像的成功应用表明其在生物分析中具有巨大的应用潜力。第一章,主要介绍了过氧亚硝酸根阴离子的性质,及其在细胞内与其合成相关的一氧化氮和超氧阴离子自由基的性质,及其相互作用。分析检测过氧亚硝酸根阴离子的方法,包括分光光度法、化学发光法、电子自旋共振法、电化学分析法和荧光光谱法。在荧光光谱法里介绍了用于检测过氧亚硝酸根阴离子的有机荧光探针,包括荧光素类、罗丹明类、氟硼荧(BODIPY)类及花菁类等。第二章,我们设计合成了一种新型的基于花菁结构Cy5并修饰有苯并噻唑基团的有机分子荧光探针Cy-SN,在这不跟我们介绍了详细和合成步骤并通过质谱和核磁氢谱对其进行表征。我们研究了该探针的光谱性质,不同pH条件下荧光探针Cy-SN的荧光强度及其对过氧亚硝酸根阴离子的响应能力,荧光探针Cy-SN对不同浓度ONOO-的光谱检测,并得到该探针对ONOC-的检测限为26 nM。除此之外,我们还探究了该探针Cy-SN对ONOC-的选择性,及其检测机理。最后,我们将该探针用于活细胞中内源及外源性ONOC-的检测,并对其进行荧光成像,该探针表现出低细胞毒性和良好的细胞成像性能。因此具有良好的应用前景。(本文来源于《华北电力大学(北京)》期刊2019-03-01)

张汉桥,肖娜,林娜,胡常杰,王军[3](2019)在《一种光照诱导原位产生过氧亚硝酸根的新方法》一文中研究指出已证实体内过氧亚硝酸根离子与人体多种病理反应相关。采用S-亚硝基硫醇为一氧化氮供体化合物、水溶性优于核黄素的聚乙二醇化核黄素为光敏剂,在光照条件下各自分解出一氧化氮和超氧负离子,并迅速原位转化为过氧亚硝酸根离子。利用酪氨酸和牛血清白蛋白分别作为过氧亚硝酸根离子捕获剂,证实了这是一种体外产生过氧亚硝酸根的有效方法。(本文来源于《化学试剂》期刊2019年01期)

唐福艳[4](2018)在《亚细胞定位的过氧亚硝酸根及甲醛荧光探针的设计合成与生物学应用》一文中研究指出细胞是生物体形态结构和生命活动的基本单元,细胞内的多种亚细胞结构如线粒体、溶酶体、内质网、高尔基体、核糖体、细胞核等共同组成了细胞的基本结构。细胞及亚细胞结构中的一系列生物活性小分子,如活性氧、活性氮、活性硫及金属离子等,对于维持细胞及细胞器的正常生理功能,调控相关的病理生理学进程,具有至关重要的作用。活性小分子的化学性质活泼,易对生物大分子(蛋白质、核酸等)进行可逆或不可逆的结构修饰,进而调控相关生物大分子的功能。此外,活性小分子可通过多种方式穿越生物膜,是细胞器通讯的关键信号分子。因此,研究活性小分子的亚细胞分布及浓度变化,对于深入研究活性小分子的病理生理学功能,以及相关疾病的诊断和治疗,具有极其重要的意义。深入研究活性小分子的亚细胞分布及浓度变化,就需要发展在亚细胞水平具有高选择、高灵敏、高时空分辨的原位可视化示踪技术。鉴于活性小分子往往具有寿命短、活性高、浓度低等特点,基于荧光探针的荧光成像技术因其高灵敏、高时空分辨、非侵入性等特点而成为理想的研究工具。本论文致力于设计合成新型的具有亚细胞定位功能的分子荧光探针,对细胞器、组织及活体中的活性小分子进行荧光成像检测,并将探针应用于细胞及动物模型研究,揭示活性小分子的病理学效应及功能。本论文主要开展了如下两方面研究工作:(1)线粒体定位探针用于药致心脏毒性过程中过氧亚硝酸根的荧光成像检测。线粒体是真核细胞进行生物氧化和能量转换的主要场所。线粒体缺陷或者功能紊乱可诱发多种疾病,如神经退行性疾病、代谢类疾病、癌症等。线粒体氧化磷酸化过程伴随活性氧(ROS)的产生。过量的ROS会引起线粒体损伤,释放促凋亡因子,诱发细胞凋亡。过氧亚硝酸根(ONOO~-)是活性最强的ROS之一,能够对生物大分子进行氧化或硝基化结构修饰,诱导线粒体凋亡甚至细胞死亡。线粒体是ONOO~-产生并发挥生物学功能的主要场所。根据目前的文献报道,我们推测线粒体ONOO~-在蒽环类抗生素诱导心脏毒性过程中发挥着重要的作用。针对以上问题,本论文以尼罗红衍生物为荧光团,α-酮酰胺作为识别基团,设计合成了一种特异性响应ONOO~-的双光子激发、近红外发射的荧光探针。该探针能够高选择、高灵敏、快速响应ONOO~-,且能够定位于线粒体,能够对细胞线粒体及组织中的ONOO~-进行双光子荧光成像。采用该探针研究发现,心肌细胞线粒体内ONOO~-水平在蒽环类药物刺激后的早期凋亡阶段即出现升高,并且在启动和促进心肌细胞凋亡中起到关键作用,是引起心肌细胞凋亡和心肌组织损伤的重要因素。由此可见,ONOO~-水平可作为早期生物标志物预测药物引起的亚临床心脏毒性。该项研究对于药物诱导心脏损伤的诊断和治疗提供了重要线索。(2)溶酶体定位及酸性pH激活探针用于细胞及活体内甲醛的双光子荧光成像。溶酶体是含有多种酸性水解酶,内部pH值呈酸性(pH 4.5-5.5)的膜性细胞器。作为真核细胞重要的酸性细胞器,溶酶体在许多细胞生物过程如内吞作用、细胞生长和凋亡、自噬、铁离子稳态平衡、氧化应激等方面发挥关键作用。溶酶体及其内部参数的异常变化会导致溶酶体贮积病、阿尔茨海默症、癌症等。甲醛是一种高活性的内源性代谢产物,细胞内生理浓度范围约为0.1-0.4 mM。内源性甲醛可由脱甲基酶和氧化酶调控产生,甲醛浓度异常升高会诱导多种疾病的发生,如癌症、神经退行性疾病、糖尿病、慢性肝脏和心脏疾病等。溶酶体是甲醛产生及发挥生物学功能的重要细胞器,溶酶体异常将影响甲醛的浓度、亚细胞分布及生物学效应。因此,监测溶酶体内甲醛的浓度变化,对于了解甲醛的产生、分布及代谢过程,以及甲醛相关疾病的预防、诊断和治疗,具有非常重要的作用。针对上述问题,本论文设计合成了一种特异性响应甲醛的溶酶体定位探针。该探针只能在溶酶体的酸性环境中对甲醛响应,在细胞质及其他细胞器的中性环境中对甲醛无任何响应。因此,该探针能够特异性地准确检测溶酶体内的甲醛浓度。此外,该探针能够对细胞溶酶体及小鼠腹部组织中的甲醛进行原位双光子荧光成像。采用该探针研究发现,N-乙酰半胱氨酸能够清除细胞内的甲醛,在甲醛相关疾病的预防和治疗方面表现出一定的应用前景。综上所述,本论文设计合成了两种分别靶向线粒体和溶酶体的荧光探针,分别用于细胞、组织及活体中ONOO~-和甲醛的双光子荧光成像检测。两种探针均表现出良好的光学性质及响应性能。采用上述探针对细胞及动物模型进行研究,初步阐释了ONOO~-和甲醛的病理学效应及功能,为相关生物学研究提供了高效的原位荧光成像工具,为相关疾病的预防、诊断和治疗提供了有价值的线索。(本文来源于《山东师范大学》期刊2018-03-18)

张辰旸,魏安琪,王妍,谢子奇,罗云敬[5](2017)在《几种色素抑制过氧亚硝酸根损伤酪氨酸能力的对比》一文中研究指出过氧亚硝酸根可以通过强氧化性及强硝化性损伤酪氨酸,从而损害人体健康.姜黄素、原花青素、槲皮素和柚皮素具有抗氧化、抗硝化性,但其自身颜色在研究酪氨酸硝化损伤的常规方法中易造成干扰.为测定色素抑制3-硝基酪氨酸生成的能力,使用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDAD,High Performance Liquid Chromatography-Photodiode Array Detector)法对硝化损伤体系成分进行分离,使用荧光光谱法测定色素抑制酪氨酸二聚体生成能力,邻苯叁酚自氧化法测定超氧根阴离子抑制能力.结果表明3-硝基酪氨酸抑制率从大到小为姜黄素、原花青素、柚皮素、槲皮素、V_C;酪氨酸二聚体抑制率从大到小为原花青素、姜黄素、柚皮素、槲皮素、V_C;邻苯叁酚自氧化抑制率从大到小为姜黄素、槲皮素、柚皮素、V_C,原花青素无明显影响.分析表明4种色素成分抗氧化、抗硝化能力与其结构密切相关.(本文来源于《湖南师范大学自然科学学报》期刊2017年06期)

孙婉,谭筝丽,卢忠林[6](2017)在《亚细胞器靶向型双光子荧光探针对细胞黏度,过氧亚硝酸根,G-四联体的识别》一文中研究指出真核生物中各细胞器需要特定的微环境及活性分子来维持。微环境发生改变时,细胞器就会丧失其功能。例如:线粒体的黏度变化影响着线粒体的代谢,细胞核的黏度变化影响着细胞核中基因的表达。同时细胞器中活性分子同样对细胞器的机能起调节作用。线粒体中的过氧亚硝酸根(ONOO~-)是一种重要的活性氧物种,在细胞的生长发育过程中都起着非常重要的调节作用;细胞核中广泛分布的G-四联体不仅抑制端粒酶活性而且抑制端粒的延伸。因此,发展一种多功能的细胞器靶向荧光探针,即可以检测细胞器黏度的变化,又可以识别细胞器中特定的活性氧具有很高的应用价值。基于以上思想,我们设计合成了两种具有细胞器靶向功能的双光子荧光探针(TP-1Bz, TP-2Bz),它们均可以比率检测细胞器内的黏度变化,其中,TP-1Bz还可以特异性比率检测线粒体中的ONOO~-,TP-2Bz可以通过沟槽作用特异性识别G-四联体。这为肿瘤的临床诊断提供了潜在的应用价值。(本文来源于《第十届全国化学生物学学术会议论文摘要集(墙报)》期刊2017-09-23)

张建[7](2017)在《基于苯硼酸酯基的过氧亚硝酸根荧光探针的构建及生物传感研究》一文中研究指出近年来,荧光探针技术由于其具有单分子检测的高灵敏度、可开关、可视化和不破坏样品等独特的优越性,已被广泛应用于各种物质组成分析、生命过程研究及医疗诊断等领域。尤其在生物活性离子、分子的定位示踪及功能研究等方面发挥着巨大作用。目前,设计、合成能够对生物活性客体产生特异性荧光响应的荧光探针,已经成为化学家及生命科学家共同关注的前沿课题。荧光探针也日益成为生命科学领域研究的重要工具之一。过氧亚硝酸根(ONOO~-)作为一种生物体内生的高活性氧化剂,与多种疾病关系密切,其中包括阿尔兹海默病、癌症、关节炎、自身免疫性疾病和炎症性疾病等。然而,也有证据表明,ONOO~-可以起到积极的作用,比如在通过硝化酪氨酸残基实现信号传导或在免疫反应中对抗入侵的病原体。因此,实时检测其在生物细胞内的分布及浓度变化对生物学及医学研究具有重要的意义。ONOO~-的分子荧光探针,由于其选择性好、灵敏度高、操作简单、实时检测、样品无破坏性等优点,被认为是检测和影像生物系统内ONOO~-的最有效工具。然而,由于ONOO~-短的半衰期、低的稳态浓度,研发能够对ONOO~-具有良好选择性且灵敏度较高的荧光探针已成为该领域的研究焦点。本工作设计并合成了一系列包含苯硼酸酯反应基团的ONOO~-荧光探针,在模拟生理条件下以及活细胞内实现了ONOO~-的选择性荧光检测,研究内容主要分为如下四部分:1、基于3-氰基香豆素荧光团组装策略,设计合成了一例荧光“off-on”型ONOO~-荧光探针2-1。该探针本身是非荧光的,但能与ONOO~-发生“加成-重排-环化”连续反应,生成3-氰基香豆素荧光团,导致大的荧光“off-on”响应。而且,该探针对ONOO~-荧光响应速度快、荧光信号变化明显(强度在486 nm处较识别前增强28倍)、灵敏度高(检出限48 nM)、选择性高等优点,已在RAW264.7巨噬细胞中实现了外源性和内源性ONOO~-的荧光成像。2、基于3-苯并噻唑基香豆素荧光团组装策略,进一步设计合成了一例荧光“off-on”型ONOO~-荧光探针3-1。与探针2-1相比,该探针对ONOO~-的荧光响应具有更长的发射波长(波长为522 nm)、更大的荧光增强倍数(较识别前增强155倍)和更高的灵敏度(检出限为0.83 nM)。该探针已成功应用于RAW264.7巨噬细胞中外源性和内源性ONOO~-的荧光成像,以及内皮EA.hy926细胞内氧糖剥夺(Oxygen and glucose deprivation,OGD)导致的内源性ONOO~-的荧光实时检测。3、本工作设计合成了一例基于ICT机理的比率型ONOO~-荧光探针4-1。该探针与ONOO~-的反应能引起440 nm和396 nm两处荧光强度的同时变化,荧光强度比值(I396/I440)较识别前增长12倍,且反应迅速。此外,该探针能有效排除其它ROS的干扰,具有较好的选择性,已在活细胞水平实现了ONOO~-的比率荧光成像。4、基于激发态分子内质子转移(Exited-State Intramolecular Proton Transfer,ESIPT)型荧光染料具有大斯托克斯位移的优点,不仅可避免激发光散射带来的检测误差,而且可避免生物分子自发荧光的干扰。本工作基于ESIPT荧光调制机理,设计并合成了一例基于苯硼酸酯基反应基团的荧光探针5-1。研究表明,与上述ONOO~-荧光探针不同,该探针对H_2O_2有更好的选择性。可能的原因是,该探针与ONOO~-反应生成的酚类产物可进一步被ONOO~-氧化,导致非荧光的醌类产物。(本文来源于《山西大学》期刊2017-06-01)

杨雨竹[8](2017)在《新型过氧亚硝酸阴离子特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的设计、合成及应用研究》一文中研究指出在时间分辨荧光生化分析技术中,基于稀土金属配合物的分子荧光探针由于具有高灵敏度、低背景荧光干扰等优点,在生物分析和临床医疗等方面得到了广泛的应用。同时,过氧亚硝酸阴离子(ONOO~-)作为一种具有强氧化性的细胞毒性物质,对生物体具有严重的伤害性。在本论文的研究中,以新合成的两种铕(Ⅲ)配合物作为荧光探针,建立了溶液体系中及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光检测新方法。在探针结构设计中,将2,4-二甲氧基苯基作为ONOO~-的识别基团,引入到?-二酮类配位体中,合成了两种?-二酮类铕(Ⅲ)配合物时间分辨荧光探针,并建立了基于该类探针的溶液体系中过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光测定方法及活细胞内过氧亚硝酸阴离子的时间分辨荧光成像测定方法。针对以上问题本论文做了以下研究工作:1、新型过氧亚硝酸阴离子特异性识别铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用首先设计合成出一种含有2,4-二甲氧基苯基的?-二酮类配位体1,1,1,2,2,3,3-七氟-6-(2,4-二甲氧基苯基)-4,6-已二酮(HDPH),然后与铕(Ⅲ)离子及叁联吡啶(tpy)共同配位形成一种新型的?-二酮类铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]。该探针本身具有较强的荧光(量子产率:25.58%),在与ONOO~-反应后荧光强度降低达64倍,显示出高ONOO~-检测灵敏度。并且其他活性氧物种的干扰实验表明,该探针具有高的ONOO~-选择性。利用该探针已实现了溶液体系中及活细胞内ONOO~-的时间分辨荧光测定。2、过氧亚硝酸阴离子特异性识别可见光激发铕(Ⅲ)配合物荧光探针的合成及其应用在荧光探针[Eu(HDPH)_3(tpy)]的研究工作基础上,将配合物中的tpy用一种具有可见光敏化性质的配位体2-(N,N-二乙基苯胺-4-基)-4,6-二(3,5-二甲基吡唑-1-基)-1,3,5-叁嗪(DPBT)代替,合成出一种可见光激发的铕(Ⅲ)配合物荧光探针[Eu(HDPH)_3(DPBT)]。该探针的最大激发波长红移至400 nm,并且激发窗口由紫外光区延伸到可见光区460nm处。成功利用该探针对细胞内的ONOO~-进行了时间分辨荧光成像检测,并且探针负载细胞的光稳定性结果证明,与紫外光激发相比,可见光激发更有利于探针光稳定性的保持。(本文来源于《辽宁师范大学》期刊2017-04-01)

任聚杰,于聪聪,崔敏,李亚清,武聪[9](2017)在《基于氯化血红素复合材料的过氧亚硝酸阴离子电化学传感器的构建》一文中研究指出构建了一种基于氯化血红素/金纳米粒子/聚叁聚氰胺/多壁碳纳米管复合材料修饰玻碳电极的过氧亚硝酸阴离子电化学传感器,并成功用于过氧亚硝酸阴离子的检测。采用循环伏安法和电流-时间曲线考察了过氧亚硝酸阴离子在传感器上的电化学行为,并对传感器的制备条件及过氧亚硝酸阴离子的检测条件进行了优化。结果表明,碳纳米管滴涂量为5μL,金沉积时间为20 s,工作电位为0.8 V时,所制传感器对过氧亚硝酸阴离子的响应最大。在优化实验条件下,此传感器检测过氧亚硝酸阴离子的线性范围为1.0×10!5~3.5×10!4mol/L和3.5×10!4~1.1×10!3mol/L,灵敏度为0.13 A/(mol/L),检出限为1.2×10!7mol/L(S/N=3)。(本文来源于《分析化学》期刊2017年01期)

安学静,罗云敬,张辰旸[10](2016)在《流动注射法探究模拟酶催化过氧亚硝酸根氧化酪氨酸的动力学特征》一文中研究指出过氧亚硝酸根作为生物体内高活性自由基,能损伤多种生物大分子进而引起一系列重大疾病,对其含量测定和反应机制的研究具有重要意义。过氧亚硝酸根性质活泼,反应速率快,捕捉其动态过程十分困难。本文首次利用流动注射分析仪探究在不同模拟酶血红蛋白和氯化血红素的催化下,过氧亚硝酸根氧化酪氨酸体系的动力学特征。结果表明:过氧亚硝酸根在两种酶催化下氧化酪氨酸的过程均遵循MichaelisMenten的动力学规律;根据米氏常数K_m和最大初速率V_(max),推断其反应机制,经模拟酶催化的过氧亚硝酸根能直接氧化与模拟酶结合后的酪氨酸快速生成酪氨酸二聚体,未生成·OH和O_2~-·。此外,我们还检测了不同温度、pH下两种模拟酶催化的速率常数,得到血红蛋白催化该体系的最适条件为25℃和pH 8.0,速率常数k_(cat)=1.035×10~6 mol·L~(-1)·s~(-1),氯化血红素适宜在37℃和pH 9.5的条件下催化该体系,速率常数k_(cat)=6.842×10~5 mol·L~(-1)·s~(-1);比较动力学参数K_m~(Hb)(4.46μmol·L~(-1))<K_m~(Hemin)(4.90μmol·L~(-1)),V_(max)~Hb(Hb)(0.072ΔI_F/s)>V_(max)~(Hemin)(0.026ΔI_F/s),发现最适条件下血红蛋白的速率常数大于氯化血红素,得到血红蛋白对于该体系的催化活性高于氯化血红素。以上结果为探究酶催化法测定过氧亚硝酸根含量及其反应机理提供动力学参数,对于防治生物体内自由基引起的相关疾病与诊断新技术的开发奠定理论基础。(本文来源于《光谱学与光谱分析》期刊2016年12期)

过氧亚硝酸论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-)是一种短寿命的内源性活性物质,在许多生理和病理过程中起着重要作用。在这项工作中,我们合成了基于苯并噻唑衍生的花菁结构的近红外荧光探针Cy-SN,用于测定过氧亚硝酸根阴离子(ONOO-。设计的探针通过氧化裂解共轭的碳碳双键与ONOO-特异性反应并产生非荧光产物。同时,与ONOO-反应后,探针在630 nm处的特征吸收大大降低,伴随着从亮蓝色到绿色黄色的剧烈颜色变化,呈现出明显的可视化特性。我们研究并证明了探针能够以剂量反应方式用于测量ONOCT并且具有低至26 nM的检测限。此外,我们通过共聚焦荧光显微镜将探针Cy-SN应用于活细胞中内源性ONOO-的成像,其显示出良好的细胞渗透性和低细胞毒性。探针Cy-SN用于外源ONOC-比色检测和内源荧光成像的成功应用表明其在生物分析中具有巨大的应用潜力。第一章,主要介绍了过氧亚硝酸根阴离子的性质,及其在细胞内与其合成相关的一氧化氮和超氧阴离子自由基的性质,及其相互作用。分析检测过氧亚硝酸根阴离子的方法,包括分光光度法、化学发光法、电子自旋共振法、电化学分析法和荧光光谱法。在荧光光谱法里介绍了用于检测过氧亚硝酸根阴离子的有机荧光探针,包括荧光素类、罗丹明类、氟硼荧(BODIPY)类及花菁类等。第二章,我们设计合成了一种新型的基于花菁结构Cy5并修饰有苯并噻唑基团的有机分子荧光探针Cy-SN,在这不跟我们介绍了详细和合成步骤并通过质谱和核磁氢谱对其进行表征。我们研究了该探针的光谱性质,不同pH条件下荧光探针Cy-SN的荧光强度及其对过氧亚硝酸根阴离子的响应能力,荧光探针Cy-SN对不同浓度ONOO-的光谱检测,并得到该探针对ONOC-的检测限为26 nM。除此之外,我们还探究了该探针Cy-SN对ONOC-的选择性,及其检测机理。最后,我们将该探针用于活细胞中内源及外源性ONOC-的检测,并对其进行荧光成像,该探针表现出低细胞毒性和良好的细胞成像性能。因此具有良好的应用前景。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

过氧亚硝酸论文参考文献

[1].刘光照.基于甲酰胺和内酰胺识别基团构建过氧亚硝酸根荧光探针[D].山东师范大学.2019

[2].侯田鑫.基于花菁染料新型荧光分子探针的设计合成及其对细胞内过氧亚硝酸根阴离子的检测[D].华北电力大学(北京).2019

[3].张汉桥,肖娜,林娜,胡常杰,王军.一种光照诱导原位产生过氧亚硝酸根的新方法[J].化学试剂.2019

[4].唐福艳.亚细胞定位的过氧亚硝酸根及甲醛荧光探针的设计合成与生物学应用[D].山东师范大学.2018

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过氧亚硝酸论文-刘光照
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