论文摘要
研究目的本研究的目的是以临床上疗效确切的复方救必应胶囊为研究对象,通过对组方药材进行化学及质量研究,基本搞清其化学组份的构成,寻找相关单体成分;全面提高组方主要药材和成方制剂质量标准,为形成规范化的质量标准评价体系,借以提高产业化生产过程中的质量控制水平。同时开发适应不同用药人群,特别是适合儿童服用的新制剂,为复方救必应的深度开发提供初步的技术支撑。方法与结果东风桔是芸香科植物酒饼筋Severinia buxifolia（Poir.）Ten.,主要分布在我国华南地区。在国内,东风桔入药主要用其干燥根和茎。但东风桔的化学成分研究国内外的报道比较少。化学成分不明已成为制约东风桔药材开发和含有东风桔的中成药制剂研发的瓶颈问题。为了进一步寻找该植物的有效成分,本项目对该药材进行了化学成分研究。东风桔（DFJ）药材乙醇提取物的氯仿和石油醚部分经过利用普通硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、反向C18硅胶柱层析、制备高效液相等技术进行分离纯化,得到了6个化合物。综合运用光谱分析（紫外光谱（UV）、红外光谱（IR）、质谱（MS）及核磁共振光谱（1H NMP、13C NMR、1H-1H COSY、HMQC、HMBC））等现代波谱学方法和技术,鉴定了6个化合物的结构。这些化合物分别是:化合物ⅠBuxifoliadine-B、化合物Ⅱ与化合物Ⅲ为新化合物,未定名,化合物Ⅳ山嵛酸,化合物Ⅴβ-谷甾醇和化合物Ⅵ胡萝卜苷。东风桔药材及其制剂复方救必应胶囊在中成药标准上仍旧使用对照药材为对照TLC薄层鉴别,标准水平很低,不能更好控制药材和制剂质量。所以我们首次采用提取分离得到的化合物Buxifoliadine-B建立定性定量分析方法:优选出以硅胶G-CMC·Na薄层作为固定相,石油醚（60～90℃）—醋酸乙酯—无水乙醇（6:3.5:0.5）展开系统,展开效果好,色谱斑点清晰,无干扰,易分辩。HPLC法所用色谱柱为Diamonsil C18分析柱（250mm×4.6mm,5μm）,以甲醇-水（89:11）为流动相,流速为1.0 ml/min,在检测波长264nm测定,Buxifoliadine-B在0.05～0.75μg呈现良好线性关系,相关系数0.9999。平均加样回收率100.7%,RSD1.79%,测得样品中的Buxifoliadine-B含量分别为0.1043 mg·g-1、0.0968 mg·g-1、0.0923 mg·g-1;可作为东风桔药材的质量控制方法基础。救必应药用价值很高,广泛应用于多种剂型供临床使用。但救必应及其制剂复方救必应胶囊在中成药标准上仍旧使用对照药材为对照TLC薄层鉴别,为更好控制药材和制剂质量,标准亟待提高。所以我们亦是首次建立了救必应药材主要有效成分紫丁香苷的定量分析方法:HPLC法所用色谱柱为Diamonsil（钻石）C18（4.6mm×250mm,5μm）,以乙腈—水（15:85）为流动相,流速为1.0ml/ml,柱温25℃,检测波长为265nm。紫丁香苷在3.06～15.3μg呈良好线性关系,相关系数r=0.9991。平均回收率为100.3%,RSD为2.876%。紫丁香苷含量平均值为20.2431mg╱g,RSD=2.297%。取不同产地的救必应药材依法测定,结果7.8366、20.9669、20.3286、25.7848 mg╱g。根据不同产地药材中紫丁香苷的含量差异较大,同时,兼顾生产过程中,从提取、分离、干燥以及制剂过程指标成分的转移率,将救必应药材的含量限度不宜过低,初步定为:本品按干燥品计算,含紫丁香苷不得少于0.7%。在建立救必应药材紫丁香苷HPLC含量测定方法基础上,考虑以紫丁香苷为指标建立复方救必应胶囊含量测定方法:色谱条件与救必应药材相同。紫丁香苷在0.256～4.608μg范围内呈良好线性关系,相关系数r=0.9999;平均回收率为100.71%,RSD为1.66%。样品测定结果及含量限度的确定,本品每1ml含救必应以紫丁香苷计,不得少于0.25mg。根据所测10批来自大生产样品的实验结果,确定复方救必应胶囊的含量限度为:本品内容物每克含紫丁香苷,不得少于6mg,因为每粒胶囊装量为0.3g,故每粒含救必应以紫丁香苷(C23H34O150计,不得少于1.80mg。复方救必应新制剂—泡腾颗粒剂的研究,其提取、分离与干燥方法保持原标准一致,但必须控制干膏水分低于3%。通过单因素分析进行泡腾颗粒剂辅料筛选,选用中性、无毒且具有独特理化性质和良好的生物相溶性的高分子聚合物,聚乙二醇PEG6000包合Na2HCO3有机酸,干燥后在碳酸氢钠、有机酸的物料表面形成隔离屏障,使作为发泡剂的碳酸氢钠和柠檬酸之间不发生中和反应。结果表明,柠檬酸极易吸湿,因此尝试用PEG 6000包合,但是发现包合时PEG 6000液化,不能成固态;用PEG 6000包合碳酸氢钠,分散干燥后硬度太大,难于粉碎过筛。不同较低浓度的PEG 6000的无水乙醇溶液做粘合剂制粒,以不同类型的蜂蜜为粘合剂制粒,以不同浓度的聚乙烯吡咯烷酮（PVP-K30）乙醇溶液制粒,以软材适宜度、辅料用量、干燥时间、颗粒色泽为指标,结果表明,PEG 6000浓度越高,黏性越强,选用0.5%浓度的PEG 6000乙醇溶液较为合适。本品泡腾颗粒剂不宜用蜂蜜做粘合剂。用不同浓度PVP-K30制粒效果较好,但是PVP-K30用量较大时干燥后的颗粒与用PEG6000制粒的颗粒相比较易吸湿,成本较高,是其缺点。泡腾崩解剂配比的筛选以不同的碳酸氢钠:柠檬酸配比进行了制粒比较,以泡腾时间、pH值、口感为主要指标,结果表明,选用1:1.3左右为好。填充剂的筛选表明,选用不同的填充剂对溶解的影响不大,但对澄清度有一定影响。由于糊精、乳糖和甘露醇澄清度都符合规定,考虑成本,选用糊精为填充剂较合适。采用正交实验设计方法,对影响泡腾颗粒泡腾时间测定的最佳条件进行了研究。结果表明:对泡腾时间的影响大小为C＞D＞A＞B,其中粘合剂为主要因素,填充剂稍有影响,碳酸氢钠和柠檬酸用量的影响不明显。综合直观分析和方差分析的结果,复方救必应泡腾颗粒剂最佳处方为A2B1C2D1。即首选PEG 6000做粘合剂,可溶性糊精为填充剂。选用碳酸氢钠:柠檬酸配比为1:1.3。复方救必应泡腾颗粒的薄层色谱鉴别参照原标准方法,研究了方中三味药救必应、东风桔、香附的薄层鉴别,方法可行。新制剂中紫丁香苷的HPLC含量测定方法参照救必应药材和复方救必应胶囊方法:样品为无水乙醇提取,紫丁香苷0.10μg-4.00μg范围内线性关系良好,相关系数0.9999。平均加样回收率102.1%,RSD=0.6%。可用作样品的定量质量控制基础方法。结论通过对东风桔药材进行化学研究,最终得到六个单体化合物,其中化合物Ⅱ与化合物Ⅲ从该药材中发现和分离得到的新的化学成分,化合物Ⅰbuxifoliadine-B可以作为含量测定指标的对照品,为进一步研究不同产地东风桔药材,从而便于制剂生产更好控制原料药材,进行质量系统评价。建立了救必应药材和复方制剂HPLC法测定紫丁香苷含量方法,专属性强,方法稳定,重复性良好,可用控制和指导选用不同产地药材和综合评价制剂质量。从而使建立和规范救必应药材及复方制剂质量评价体系成为可能。泡腾颗粒剂的研究形成了初步的制剂工艺和质量标准,可进一步指导中试放大研究。新剂型密切结合市场需求,特别适用于儿童患者,有望解决原产品单一问题,形成系列化产品。总之,本研究从化学、质量和新剂型研究方面为复方救必应制剂的深度开发和产品质量控制奠定了重要基础。
论文目录
相关论文文献
标签：复方救必应胶囊论文; 化学研究论文; 质量研究论文; 制剂研究论文; 复方救必应泡腾颗粒论文;