鲜切苹果病理防御反应及其拮抗机理

论文摘要

鲜切果蔬是以新鲜果蔬为原料,经清洗、去皮、切割或切分、修整、包装等加工过程而制成的即食新鲜果蔬产品。鲜切果蔬具有自然、新鲜、卫生、方便等特点,适应现代生活的需要,但是鲜切果蔬极易招致微生物的侵染,严重影响其品质。本论文以苹果为材料,研究了鲜切苹果病理防御反应及其拮抗机理。实验分为五部分：1.研究鲜切苹果在20℃、10℃和4℃的贮藏温度下,细菌的生长趋势和感官质量的变化,采用倒平板法和涂布法测定细菌总数,建立微生物生长模型,预测鲜切苹果的货架期。结果表明,试验中所建立的Gompeltz模型能有效地拟合鲜切苹果在不同贮藏温度下,细菌总数的动态变化,从而能预测不同温度贮藏的鲜切苹果在贮藏期间的细菌总数。结合鲜切苹果贮藏过程中的感官评分与建立的Gompeltz函数模型,可以看出,当细菌总数≤104cfu/g,20℃时鲜切苹果可贮藏1d,10℃时可贮藏3d,4℃时可贮藏7d,鲜切苹果仍保持新鲜状态,无明显的褐变和腐败发生,保证了鲜切苹果的安全性。2.对引起鲜切苹果腐败的霉菌进行分离鉴定。通过形态学鉴定方法,从鲜切苹果中分离出28株霉菌,其中芽枝霉属（Cladosporium）7株,青霉菌属（Penicillium）21株。根据青霉菌在不同培养基上的性状,利用在CA、CYA、G25N培养基上的特征及镜检观察,将21株青霉菌鉴定为四种：刺糙青霉（P.echinulatum）,皮落青霉（P.crustosum）,娄地青霉（P.roqueforti）,产黄青霉（P.chrysogenum）.3.对鲜切苹果中的酵母菌进行分离、纯化与初步鉴定,通过对菌落形态、培养性状和生物学特征的研究,初步鉴定得到4属酵母菌,分别为：范菲亚酵母属（Phaffia rohdozy-ma）；红酵母属（Rhodotrorula Harrison）;类酵母属（Saccharomycodes Hansen）；酵母属（Saccharomycodes Reess）。4.研究4种不同浓度青霉菌对鲜切苹果病理反应的影响,结果表明：青霉菌侵染造成鲜切苹果中可溶性蛋白含量的下降,诱导PPO、MDA活性的增加,并且菌液浓度越高,诱导能力越强。青霉菌侵染的鲜切苹果中POD活性显著低于对照,在后期保持在一种稳定且较低的水平。青霉菌侵染鲜切苹果后显著降低其PG活性,且不同浓度之间有明显差异,浓度越高,侵染程度越深。5.采用不同浓度的2种酵母菌处理鲜切苹果,对酵母菌拮抗机理进行初步研究。结果表明：酵母菌浓度越高,苹果中可溶性蛋白含量越低,下降越快。总糖含量相对于对照同样呈现相对较低的趋势。说明酵母菌在营养与空间的竞争中有一定的优势。结果还表明：酵母处理提高了PPO、POD活性,同时可以抑制MDA含量的增加,有效抑制了膜的过氧化作用。表明酵母菌诱导鲜切苹果增加抗性相关酶活性,对延缓保存期具有重要作用。

论文目录

• 摘要
• abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 前言
• 1.2 鲜切果蔬的的研究现状
• 1.3 鲜切果蔬致病微生物的来源
• 1.3.1 田间污染
• 1.3.2 采后处理
• 1.3.3 加工过程
• 1.4 鲜切果蔬常见微生物种类
• 1.5 微生物对鲜切果蔬生理的影响
• 1.6 微生物对寄主抗性的影响
• 1.6.1 抗性酶类
• 1.6.2 保护性物质
• 1.7 鲜切果蔬微生物控制措施
• 1.7.1 化学抑制剂
• 1.7.2 物理控制方法
• 1.7.3 气调包装
• 1.7.4 生物防腐
• 1.7.5 植物提取物
• 1.8 本研究的目的和意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 实验材料与仪器
• 2.1.1 实验材料与处理
• 2.1.2 主要实验试剂
• 2.1.3 主要仪器设备
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 鲜切苹果微生物生长模型研究及货架期预测
• 2.2.2 致病霉菌的筛选、分离纯化及鉴定
• 2.2.3 酵母菌的分离纯化及鉴定
• 2.2.4 鲜切苹果霉菌侵染处理方法
• 2.2.5 酵母菌液的制备
• 2.2.6 回接实验
• 2.2.7 鲜切苹果的生理生化指标测定方法
• 第三章 结果与讨论
• 3.1 鲜切苹果微生物生长模型研究及货架期预测
• 3.1.1 鲜切苹果在贮藏期间细菌生长规律
• 3.1.2 鲜切苹果贮藏期间的细菌生长模型
• 3.1.3 鲜切苹果贮藏期间感官品质变化
• 3.2 鲜切苹果中致病霉菌的分离鉴定
• 3.2.1 霉菌分离纯化结果
• 3.2.2 霉菌属的鉴定结果
• 3.2.3 青霉菌种的鉴定结果
• 3.3 鲜切苹果中酵母菌分离鉴定结果
• 3.4 回接实验结果
• 3.5 青霉菌病理防御反应
• 3.5.1 可溶蛋白质含量变化测定结果
• 3.5.2 总糖含量测定结果
• 3.5.3 过氧化物酶活性测定结果
• 3.5.4 多酚氧化酶活性的测定结果
• 3.5.5 丙二醛含量的测定结果
• 3.5.6 多聚半乳糖醛酸酶活性的测定结果
• 3.6 鲜切苹果中酵母菌拮抗机理研究
• 3.6.1 酵母菌对鲜切苹果可溶性蛋白质含量变化的影响
• 3.6.2 酵母菌对鲜切苹果总糖含量的影响
• 3.6.3 酵母菌对鲜切苹果多酚氧化酶活性变化的影响
• 3.6.4 酵母菌对鲜切苹果过氧化物酶活性变化的影响
• 3.6.5 酵母菌对鲜切苹果丙二醛含量变化的影响
• 3.6.6 酵母菌对鲜切苹果多聚半乳糖醛酸酶活性变化的影响
• 3.7 讨论
• 3.7.1 鲜切苹果微生物生长模型
• 3.7.2 鲜切苹果中霉菌的分离鉴定
• 3.7.3 鲜切苹果中酵母菌的分离鉴定
• 3.7.4 鲜切苹果中青霉菌病理防御反应
• 3.7.5 酵母菌拮抗机理研究
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录A
• 附录B
• 附录C