紫杉醇—透明质酸复合制剂的体外活性及脂质组学研究

论文摘要

为了提高紫杉醇制剂的药物靶向性,降低制剂的毒副作用,本课题组以透明质酸为药物载体,制备了复合型紫杉醇-透明质酸注射用冻干制剂,既达到了药物缓释的效果,又利用了透明质酸对癌细胞的靶向性,提高了紫杉醇的生物利用度,在此基础上,本文对复合制剂进行了体外抗肿瘤活性及脂质组学研究。对紫杉醇-透明质酸复合制剂进行了体外抗肿瘤活性研究,结果表明制剂对Hela细胞的抑制率可达到80%左右。不同分子量透明质酸的复合制剂,对细胞的抑制作用并没有显著性差异。综合考虑本课题组对制剂工艺及稳定性的研究结果,确定31w制剂为活性筛选的较好结果。31w复合制剂作用后,Hela细胞直接启动凋亡,24h凋亡率可达56.8%,并伴随着一定的G2/M期积累现象。基于LC/ESI/MSn初步构建了Hela细胞磷脂图谱,确定了PG、PE、PC、PI、PS及PA共6类磷脂112种磷脂分子的结构,并进行了定量分析,研究了制剂作用于Hela细胞后磷脂代谢的变化,发现制剂作用6h后,PG、PE、PI、PS的总含量均有了显著性的升高,而PC、PA总含量无显著性变化。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 文献综述
• 1.1 紫杉醇及其制剂的研究进展
• 1.1.1 紫杉醇的药理作用
• 1.1.2 紫杉醇的剂型及其研究进展
• 1.2 透明质酸的研究现状及其应用进展
• 1.2.1 透明质酸综述
• 1.2.2 透明质酸与肿瘤细胞的作用
• 1.2.3 透明质酸在抗癌治疗中的应用现状
• 1.3 膜脂及脂质组学
• 1.3.1 膜脂
• 1.3.2 脂质组学
• 1.3.3 质谱在脂质组学研究中的应用
• 1.4 本文的研究意义和主要研究内容
• 1.4.1 研究意义
• 1.4.2 研究内容
• 第二章 紫杉醇-透明质酸复合制剂的体外活性研究
• 2.1 实验材料与方法
• 2.1.1 实验仪器
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 紫杉醇-透明质酸复合制剂的制备
• 2.1.4 紫杉醇标准曲线的绘制及含量测定
• 2.1.5 细胞系与细胞培养
• 2.1.6 MTT 法检测细胞活力
• 2.1.7 流式细胞仪分析细胞周期
• 2.1.8 统计学处理
• 2.2 结果与讨论
• 2.2.1 紫杉醇标准曲线的绘制
• 2.2.2 紫杉醇-透明质酸复合制剂的体外活性筛选
• 2.2.3 紫杉醇-透明质酸复合制剂对细胞周期的影响
• 2.3 小结
• 第三章 Hela 细胞磷脂图库的初步建立
• 3.1 实验材料与方法
• 3.1.1 仪器和试剂
• 3.1.2 磷脂定性实验条件
• 3.1.3 Hela 细胞总磷脂的提取
• 3.1.4 磷脂的结构定性分析
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 Hela 细胞中磷脂种类分析
• 3.2.2 Hela 细胞中各磷脂分子结构的确定
• 3.3 小结
• 第四章 复合制剂作用下Hela 细胞磷脂代谢差异的分析
• 4.1 实验材料与方法
• 4.1.1 仪器和试剂
• 4.1.2 Hela 细胞总磷脂的提取
• 4.1.3 磷脂定量实验条件
• 4.1.4 磷脂含量的测定
• 4.1.5 统计学处理
• 4.2 结果与讨论
• 4.2.1 Hela 细胞磷脂含量的测定
• 4.2.2 Hela 细胞磷脂代谢差异的分析
• 4.3 小结
• 第五章 结论与展望
• 5.1 结论
• 5.2 展望
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢