血管基膜衍生多功能肽治疗肿瘤主要药效学及信号蛋白磷酸化比较研究

论文摘要

研究显示，肿瘤抑素（tumstatin）及74-98氨基酸肽具有抗新生血管形成作用。它们亦被证明能有效抑制增殖内皮细胞的粘着斑激酶（FAK）、磷脂酰肌醇3激酶（P13—Kinase）、蛋白激酶B（PKB/Akt）和哺乳动物雷伯霉素靶蛋白（mTOR）的活化，进而阻止真核启动因子4E蛋白（eIF4E）从真核启动因子4E结合蛋白1的解离，抑制帽依赖性翻译，特异性地抑制内皮细胞蛋白质合成。同时，研究表明：肿瘤抑素是一种αvβ3整合素依赖性血管新生抑制因子。 早期的报道指出Ⅳ型胶原α3链非胶原区（NCI）185—203氨基酸肽（即tumstatin 197-215氨基酸肽）具有抑制Ⅰ型胶原诱导人多形核白血病细胞活化作用。尔后的实验证明tumstatin 197-215氨基酸肽能促进恶性黑色素细胞粘附和抑制恶性黑色素瘤细胞增殖，同时鉴定tumstatin 197-215氨基酸肽的重要受体为αvβ3。tumstatin 197-215氨基酸肽作为tumstatin整体的一部分时，不表现抑制肿瘤细胞增殖活性，而只有切去其余肽后，才能发挥作用。 有研究报道，抗体芯片能用于从细菌表达文库和具ELISA过滤特性的单链抗体文库中筛选DNA，RNA及蛋白质结合的靶蛋白；亦能用于探测蛋白与蛋白相互作用，测定酶靶位和分析小分子药物与蛋白质相互作用。最近，Sreekumar等采用抗体芯片观察电离辐射后结肠腺癌（LoVo）细胞的蛋白组学图谱，很容易地发现了放射调节蛋白如：p53，DR5，DR3和一些新的相关蛋白如：DFF4/CAD和CEA等。 重组血管基膜衍生多功能肽（Recombinant Vascular Basement-derived Multifunctional Peptide，rVBMDMP）)是通过人工合成人IgG3上游铰链区序列连接tumstatin 74—98氨基酸肽和197-215氨基酸肽序列的融合基因，构建原核表达载体，转染入大肠杆菌生产的一种同时具有抑制肿瘤血管内皮细胞增殖和肿瘤细胞增殖双重效应的多肽类抗肿瘤候选药物。前期研究表明：rVBMDMP（10mg/kg、6mg/kg、2mg/kg）对小鼠Lewis肺癌模型皮下移植瘤瘤重和肺转移瘤结节数的抑制率均大于50％。 本文观察rVBMDMP抑制人脐静脉内皮（HUVEC—12）细胞系细胞增殖和诱导凋亡作用；应用体内外药效学实验，评价rVBMDMP治疗人恶性肿瘤的有效性；利用抗体芯片检测rVBMDMP对人肺腺癌（A549）细胞系细胞和HUVEC—12细胞信号蛋白磷酸化水平的影响，初步探讨rVBMDMP抗新生血管形成作用和抗人肺癌作用的分子机制。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 缩略词
• 前言
• 第一部分 重组血管基膜衍生多功能肽抗血管新生活性及信号蛋白磷酸化比较研究
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 第二部分 重组血管基膜衍生物多功能肽抗肿瘤作用及信号蛋白磷酸化比较研究
• 2.1 材料与方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 研究成果
• 稿件录用通知书