胃癌组织中ZAC与生长抑素及生长抑素受体的表达

论文摘要

胃肠道D细胞可分泌生长抑素（somatostatin,SST）,SST是一种循环的小肽,它有两种生物活性形式:14个氨基酸构成的SST-14和28个氨基酸构成的SST-28。SST由较大的前体分子前原SST和原SST水解形成。SST抑制胃肠道一系列的生理功能如胃肠运动、胃酸产生、胰酶分泌和胆汁分泌。SST还抑制胰和肠道激素如胰岛素、胰高血糖素、分泌素和血管活性肠肽的分泌。除在神经传递和分泌的重要调节功能,SST还可调控正常组织和肿瘤的细胞增殖。SST通过与生长抑素受体（somatostatin receptor,SSTR）结合发挥其生理功能。SSTR属于G蛋白耦联受体（G protein-coupled receptor,GPCR）,共有5种亚型,分别称为SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5。编码5种SSTR亚型的基因分别位于不同的染色体。SSTR2 mRNA通过选择性剪接可产生两种不同的SSTR2:SSTR2A和SSTR2B。SSTR与胃癌发生的关系缺乏系统的研究,仅见单个SSTR亚型与胃癌的研究报道。介导SST抗增殖效应的转录因子和靶基因的研究很少。ZAC（zinc fingerprotein which regulates apoptosis and cell cycle arrest）为一种具有锌指（zinc finger）结构的转录因子,具有DNA结合和转录活化活性,可抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。本研究应用免疫组织化学技术比较观察胃癌组织、癌旁组织和相应的正常胃黏膜组织中SST和ZAC的表达;应用RT-PCR技术比较显示胃癌组织、癌旁组织和相应的正常胃黏膜组织中SSTR亚型的表达谱;分析胃癌组织中SST、SSTR与ZAC的表达的相关性及其与胃癌临床病理学特征的相关性。材料与方法1.材料胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织标本各30例。标本分为2部分,液氮冻存用于RT-PCR,石蜡包埋用于免疫组织化学。2.免疫组织化学采用SABC免疫组织化学方法,按试剂盒（BOSTER公司）说明书操作。ZAC免疫反应信号采用链霉亲和素-过氧化物酶—DAB显示;SST免疫反应信号采用链霉亲和素-过氧化物酶—AEC显示。以PBS替代一抗为阴性对照。苏木素复染胞核。3.RT-PCR SSTR1:上游,AGCCGGTTGACTATTACGCC,下游,GCTCTCACTTCTACCATTGTC;SSTR2:上游,GGTGAAGTCCTCTGGAATCC,下游,CCATTGCCAGTAGACAGAGC;SSTR3:上游,TCATCTGCCTCTGCTACCTG,下游,GAGCCCAAAGAAGGCAGGCT;SSTR4:上游,CGGCAGTCTTCGT GGTCTAC,下游,GCATCAAGGCTGGTCACGAC;SSTR5:上游,AACACGCTGGTCATCTACGTGGT,下游,AGACACTGGTGAACTGGTTGAC。采用一步法进行RT-PCR反应。50℃,30 min;94℃,2 min;94℃,30s;60℃,30s;72℃,30s;10个循环。94℃,30s;55℃,30s;72℃,40s;25个循环。72℃,2 min。1.5%琼脂糖凝胶电泳观察结果。4.统计学处理应用SPSS10.0统计软件对数据进行统计学处理,以P＜0.05为检验水准。结果1.胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织SST阳性表达率分别为36.7%（11/30）、53.3%（16/30）和73.3%（22/30）。胃癌组织中SST的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织（P＜0.05）。2.胃癌组织中5种SSTR亚型均有表达,但其表达频率不同,分别为SSTR1（40.0%,12/30）、SSTR2（73.3%,22/30）、SSTR3（33.3%,10/30）、SSTR4（53.3%,16/30）和SSTR5（56.7%,17/30）,以SSTR2的阳性率最高,SSTR3的阳性率最低。3.胃癌组织中SSTR3的阳性表达率明显低于正常胃黏膜组织;而SSTR2和SSTR5的阳性表达率则显著高于正常胃黏膜组织,SSTRl和SSTR4的阳性率无显著性差异。高分化胃癌组织SSTR3的阳性率显著高于低分化胃癌组织。4.胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织均有ZAC的表达,其阳性率分别为33.3%（10/30）、73.3%（22/30）和66.7%（20/30）,胃癌组织中ZAC的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织。高中分化胃癌组织中,ZAC的表达明显高于低分化胃癌组织;浸润未侵犯浆膜者明显高于侵犯浆膜者。ZAC的表达与淋巴结转移无明显关系。5.胃癌组织中,ZAC与SST的表达呈明显正相关。高中分化胃癌组织中,ZAC与SST的共表达明显高于低分化胃癌组织,浸润未侵犯浆膜者明显高于侵犯浆膜者;ZAC与SST的共表达与淋巴结转移无明显关系。结论1.胃癌组织中5种SSTR亚型均有表达,SSTR2的阳性率最高,SSTR3的阳性率最低。2.胃癌组织中,ZAC与SST的表达均明显低于正常胃黏膜组织;ZAC与SST的表达呈明显正相关。3.SST可能通过与其受体结合,影响ZAC的表达,调节胃癌细胞的生长和分化。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 论文部分
• 胃癌组织中ZAC与生长抑素及生长抑素受体的表达
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 附图
• 讨论
• 参考文献
• 综述部分
• 生长抑素受体与肿瘤发生
• 参考文献
• 英文缩略词
• 在读硕士期间发表的文章
• 致谢