DCM大鼠受磷蛋白的表达及其对LVEF的影响

论文摘要

目的：应用阿霉素腹腔注射制备扩张型心肌病（dilated cardiomyopathy, DCM）大鼠模型；观察DCM大鼠心肌受磷蛋白（phospholamban, PLN）、肌质网钙离子ATP酶（sarcoplasmic reticulum Ca2+ATPase, SERCA2a）表达变化,观察应用黄芪和卡维地洛改善心功能后DCM大鼠心肌PLN、SERCA2a表达的变化,了解DCM大鼠心肌PLN与SERCA2a和左室射血分数（LVEF）之间的关系,探讨PLN的表达在DCM所致心衰中的作用机制。方法：将82只Wistar大鼠分为二组：正常对照组（简称正常组,n=10）和扩张型心肌病模型组（简称模型组,n=72）。模型组大鼠按2mg/kg/次经腹腔注射阿霉素,正常对照组用等量生理盐水腹腔注射,两组均每周注射1次,连续8周,成功建模后,分别抽取5只大鼠检测LVEF等。8周末将制作成功的40只模型组大鼠随机分为DCM对照组（简称DCM组,n=14）、黄芪组（n=13）、和卡维地洛组（n=13）,正常组中剩余的5只继续进行同步观察。按如下方法进行干预：正常组和DCM组均用生理盐水2m1灌胃,黄芪组应用黄芪颗粒lg/kg/d（黄芪甲甙0.6mg/kg/d）+生理盐水2m1灌胃,卡维地洛组应用卡维地洛10mg/kg/d+生理盐水2m1灌胃,四组均1次/日。于12周末每组抽取5只存活大鼠检测LVEF后即处死,获取心肌标本,分别在mRNA水平和蛋白水平检测心肌的PLN、SERCA2a。结果：1.采用阿霉素每周一次连续8周腹腔注射的方法可以成功建立DCM大鼠模型。2.DCM大鼠心肌PLN的表达：8周末和12周末DCM大鼠心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量均明显高于正常大鼠,差异均有统计学意义（P<0.05）。DCM组大鼠前后（8、12周末）比较,心肌PLNmRNA表达及蛋白水平表达量无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。3.DCM大鼠心肌PLN与SERCA2a的关系：8、12周末DCM组大鼠与同日龄正常大鼠相比,DCM大鼠心肌SERCA2amRNA表达及蛋白水平表达量均明显低于正常大鼠,差异均有统计学意义（P<0.05）。对12周末DCM组大鼠的PLN和SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量分别绘制散点图并进行直线相关分析,可知两者呈负相关,r值分别为-0.99,-0.89,P值均<0.05。4.DCM大鼠心肌PLN与LVEF的关系：12周末DCM组大鼠的LVEF和8周末DCM组比较,12周末DCM组大鼠的LVEF明显下降,P<0.05,差异有统计学意义。将12周末DCM组大鼠心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量分别与LVEF值绘制散点图并进行直线相关分析,可知两者呈负相关,r值分别为-0.965,-0.925,P值均<0.05。5.DCM大鼠心肌SERCA2a与LVEF的关系：将12周末DCM组大鼠心肌SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量和LVEF值分别绘制散点图并进行直线相关分析,可知两者呈正相关,r值分别为0.93,0.996,P值均<0.05。6.药物改善LVEF后PLN、SERCA2a及LVEF的变化：黄芪组和卡维地洛组12周末的LVEF较治疗前（8周末DCM组）明显增高,差异均有统计学意义（P<0.05）。黄芪组12周末心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量较治疗前（8周末DCM组）明显降低,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义；黄芪组12周末心肌SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量较治疗前（8周末DCM组）明显增高,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义。卡维地洛组12周末心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量较治疗前（8周末DCM组）明显降低,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义。卡维地洛组12周末心肌SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量较治疗前（8周末DCM组）明显增高,两者比较P值均＜0.05,差异有统计学意义。黄芪组12周末心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量较同日龄的DCM组明显降低,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义；黄芪组12周末心肌SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量较同日龄的DCM组明显增高,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义。卡维地洛组12周末心肌PLN的mRNA及蛋白水平表达量较同日龄的DCM组明显降低,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义；卡维地洛组12周末心肌SERCA2a的mRNA及蛋白水平表达量较同日龄的DCM组明显增高,两者比较P值均<0.05,差异有统计学意义。结论：1.DCM大鼠心肌有PLN表达增高,但随时间推移PLN无显著变化；同时有心肌SERCA2a表达降低和LVEF下降。2.DCM大鼠心肌PLN与SERCA2a和LVEF均呈负相关,SERCA2a与LVEF呈正相关。3.黄芪和卡维地洛在改善DCM大鼠LVEF后,能明显降低心肌的PLN,增高心肌的SERCA2a。4.PLN影响DCM大鼠LVEF的机制主要与下调PLN的表达,上调SERCA2a有关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 引言
• 第一章 扩张型心肌病模型的建立
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 结论
• 第二章 DCM大鼠心肌PLN表达变化及其对心功能影响机制初探
• 第一节 材料与方法
• 第二节 结果
• 第三节 讨论
• 第四节 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 主要缩写词表
• 在读期间发表的主要学术论文及参与课题
• 致谢