论文摘要
目的：探讨过氧化物酶体增殖活化体受体-γ（PPAR-γ）配体激动剂对哮喘患者T淋巴细胞白介素4／信号转导子和转录激活6（IL—4／STAT6）信号通路的影响及可能机制。方法：选取哮喘患者和健康对照者各10名，抽取哮喘患者外周血30mL，健康者外周10mL，分离出的PBMC，加含RPMI-1640培养基、10％胎牛血清、万分之三谷氨酰胺、100U／mL青霉素、100U／mL链霉素和50μg／mL的PHA（简称完全培养基），用完全培养基制成PBMC细胞悬液，贴壁培养4h（于饱和湿度、37℃、含5％CO2培养箱中培养）。然后从贴壁后的PBMC中取出悬浮的T淋巴细胞如下分组（调整细胞浓度为1×106／mL、2mL／孔）：A组：健康对照者组；B组：哮喘原液组；C组：哮喘IL-4RAb（终浓度为2.5μg／mL）组；D组：哮喘Rosiglitazone（终浓度为100mmol／ml）组；E组：哮喘IL-4 RAb（终浓度为2.5μg／mL）+Rosiglitazone（终浓度为100mmol／ml）组。其中，C组和E组先加IL-4RAb培养1小时（让IL-4RAb与IL-4R充分结合而阻断IL-4与IL-4R结合）；再将Rosiglitazone加入D组和E组培养。然后上述各组细胞在培养箱中再培养48h。每组分别同时都用完全培养基作空白对照。培养结束后用ELISA法测定T淋巴细胞培养上清液IL-4浓度，用Western blot法检测T淋巴细胞内STAT6磷酸化表达水平。用SPSS12.0统计软件进行统计分析，测定值采用均数±标准差（（?）±s）表示。在方差齐性基础上，α=0.05，双侧P≤0.05有统计学意义。结果：1 ELISA结果：（1）空白对照完全培养基未检出IL-4；（2）A组与B组T淋巴细胞培养上清液中的IL-4水平比较：A组＜B组（P＜0.01）；（3）哮喘组内T淋巴细胞培养上清液中的IL-4水平比较：B组＞C组＞D组＞E组（P均＜0.01）。2 Western blot检验结果：（1）A组与B组T淋巴细胞STAT6磷酸化水平比较：A组＜B组（P＜0.01）；（2）哮喘组内T淋巴细胞STAT6磷酸化水平比较：B组＞C组＞D组＞E组（P均＜0.01）。3直线相关分析：哮喘对照组（B组）T淋巴细胞培养上清液中的IL-4水平与T淋巴细胞STAT6磷酸化水平成正相关（r=0.86，P＜0.01）。结论1哮喘患者T淋巴细胞分泌的IL-4水平及T淋巴细胞的STAT6磷酸化表达平均高于健康者；2哮喘T淋巴细胞通过增加分泌的IL-4而促进T淋巴细胞STAT6磷酸化的表达；3 Rosiglitazone和IL-4R Ab均能降低哮喘患者T淋巴细胞分泌IL-4和T淋巴细胞STAT6磷酸化的表达；4 Rosiglitazon除了可以通过减少T淋巴细胞分泌IL-4途径而降低T淋巴细胞STAT6磷酸化表达水平外，还可通过其它方式降低T淋巴细胞STAT6磷酸化的表达水平。
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标签：哮喘论文; 白细胞介素论文; 信号转导子和转录激活子论文;