治疗奶牛乳房炎蒙药复方提取物对小鼠免疫作用的影响

论文摘要

治疗奶牛乳房炎蒙药复方是由多种蒙药单药在传统蒙医药理论和现代医药理论的基础上筛选出来的,具有抗炎免疫等药理作用。为了初步探索蒙药复方的活性成分,对两种蒙药复方做了乙醇回流提取,依次用石油醚、正丁醇、乙酸乙酯等不同有机溶剂进行萃取,得到石油醚层浸膏、乙酸乙酯层浸膏、正丁醇层浸膏和水母液浸膏。两种蒙药复方提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌和体内抗菌作用研究结果:体外抑菌成分主要集中在乙酸乙酯和正丁醇层浸膏内,抑菌圈直径大于16.88mm,最大值达到21.61mm;对两种致病菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）最低可达到0.0315g/mL和0.0625g/mL,水母液略有抑菌作用,而石油醚萃取物无体外抑菌效果;体内抗菌成分主要集中在石油醚层浸膏和水母液浸膏内,显著提高小鼠死亡保护率。蒙药复方提取物对混合致病菌诱发的乳腺炎模型小鼠乳腺病理变化试验结果:水母液和石油醚萃取物有减轻乳腺炎的损伤和促进修复作用,乙酸乙酯和正丁醇萃取物对致炎的乳腺病变无明显影响。两种蒙药复方提取物进行免疫作用研究,碳廓清法研究结果:均显著提高正常小鼠和模型小鼠单核-巨噬细胞的吞噬能力（P<0.05）;MTT法研究结果:均显著提高正常小鼠和模型小鼠脾脏NK细胞活性（P<0.05）;对小鼠淋巴脏器指数的影响研究结果:对正常小鼠无显著影响,但对乳腺炎模型小鼠,显著提高淋巴脏器指数（P<0.05）。流式细胞术研究结果:对正常小鼠外周血CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞和CD19+细胞百分率无显著影响,但显著提高CD4+/CD8+比值（P<0.05）,能够显著和极显著提高乳腺炎模型小鼠CD3+细胞、CD4+细胞、CD19+细胞百分率和CD4+/CD8+比值（P<0.01）,对CD8+细胞百分率影响不显著。郭氏法研究显示,两种水母液及石油醚萃取物显著提高正常小鼠C3bRR（P<0.05）,对ICR无显著影响;两种乙酸乙酯和正丁醇萃取物对正常小鼠C3bRR和ICR无显著影响;两种蒙药复方提取物均显著提高乳腺炎模型小鼠C3bRR（P<0.01）,并显著降低ICR（P<0.01）。放射免疫分析法研究结果:显著提高乳腺内IL-2的含量（P<0.01）,显著抑制IL-6和TNF-α的升高（P<0.01）,显著降低NAGase的浓度（P<0.01）。表明,两种蒙药复方提取物能够通过提高单核巨噬细胞吞噬力、NK细胞活性和红细胞免疫提高非特异性免疫功能,通过提高B细胞、T细胞百分率和CD4+/CD8+比值提高特异性免疫,并能够通过调节IL-2、IL-6和TNF-α的分泌量提高免疫、降低炎症损伤、从分子水平对免疫应答进行调节。从而消除病原微生物,从器官、细胞和分子等不同水平对小鼠乳腺炎的免疫生理进行调控。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 乳房炎研究进展
• 1.1.1 奶牛乳房炎的病因
• 1.1.2 奶牛乳房炎的预防
• 1.1.3 乳房炎的治疗
• 1.2 蒙药研究进展
• 1.2.1 蒙药的基本特点
• 1.2.2 蒙药复方研究进展
• 1.2.3 蒙药免疫研究进展
• 1.3 免疫研究进展
• 1.3.1 免疫细胞调节
• 1.3.2 细胞因子的调节
• 1.3.3 补体的调节
• 1.4 研究目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 药物
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 主要仪器
• 2.1.4 供试菌种
• 2.1.5 实验动物
• 2.2 数据处理
• 2.3 方法
• 2.3.1 蒙药复方活性成分的提取
• 2.3.2 蒙药复方提取物对奶牛乳房炎主要致病菌体外抑菌和体内抗菌研究
• 2.3.3 蒙药复方提取物对模型小鼠乳腺炎的影响
• 2.3.4 蒙药复方提取物对小鼠免疫功能的影响
• 3 结果
• 3.1 蒙药复方活性成分的提取
• 3.2 蒙药复方提取物对奶牛乳房炎主要致病菌体外抑菌和体内抗菌研究
• 3.2.1 蒙药复方提取物的体外抗菌试验
• 3.2.2.1 蒙药复方提取物的抑菌圈直径测定
• 3.2.2.2 蒙药复方提取物的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）
• 3.2.2 蒙药复方提取物的体内抗菌试验
• 3.3 蒙药复方提取物对模型小鼠乳腺炎的影响
• 3.3.1 小鼠乳腺炎模型的建立
• 3.3.2 对乳腺炎模型小鼠的乳腺组织病理变化的影响
• 3.4 蒙药复方提取物对小鼠免疫功能的影响
• 3.4.1 对正常小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
• 3.4.2 对模型小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
• 3.4.3 对正常小鼠脾脏NK 细胞活性的影响
• 3.4.4 对模型小鼠脾脏NK 细胞活性的影响
• 3.4.5 对正常小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响
• 3.4.6 对模型小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响
• 3.4.7 对正常小鼠外周血液淋巴细胞及其亚群的影响
• 3.4.8 对模型小鼠外周血液淋巴细胞及其亚群的影响
• 3.4.9 对正常小鼠红细胞免疫功能的影响
• 3.4.10 对模型小鼠红细胞免疫功能的影响
• 3.4.11 对小鼠乳腺组织细胞因子和酶的影响
• 4 讨论
• 4.1 蒙药复方提取物对奶牛乳房炎主要致病菌体外抑菌和体内抗菌的研究
• 4.2 对小鼠乳腺炎组织病理变化的影响
• 4.3 对模型小鼠乳腺组织病理变化的影响
• 4.4 对小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
• 4.5 对脾脏NK 细胞的影响
• 4.5.1 对正常小鼠脾脏NK 细胞的影响
• 4.5.2 对模型小鼠脾脏NK 细胞的影响
• 4.6 对小鼠免疫脏器指数的影响
• 4.6.1 对正常小鼠免疫脏器指数的影响
• 4.6.2 对模型小鼠免疫脏器指数的影响
• 4.7 对小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响
• 4.7.1 对正常小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响
• 4.7.2 对模型小鼠外周血淋巴细胞及其亚群的影响
• 4.8 对小鼠红细胞免疫功能的影响
• 4.8.1 对正常小鼠红细胞免疫功能的影响
• 4.8.2 对模型小鼠红细胞免疫功能的影响
• 4.9 对小鼠乳腺组织细胞因子和酶的影响
• 4.9.1 对乳腺细胞因子的影响
• 4.9.2 对模型鼠乳腺组织酶的影响
• 5 总体讨论
• 6 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介