论文摘要
目的:肾小管间质纤维化（TIF）是进行性肾脏损害的主要病理学特征,是几乎所有肾脏疾病进展至终末期肾功能衰竭的共同路径。完全阻断TIF是治疗的临床难题。骨髓间充质干细胞在适宜的条件下可分化为成骨细胞、成软骨细胞、心肌细胞和脂肪细胞等,由于其取材容易,能稳定表达目的基因表型,耐受机体免疫,无致瘤性,为疾病移植治疗提供了新的途径。研究证实急性肾脏损伤小鼠模型中,骨髓间充质干细胞可以分化为正常肾脏细胞促进结构修复、改善肾功能。本研究探讨体外扩增及鉴定骨髓间充质干细胞的方法;采用单侧输尿管结扎建立大鼠TIF模型;TIF早期经鼠尾静脉注射扩增的间充质干细胞,了解间充质干细胞是否可以在纤维化微环境下靶向定位于梗阻的肾脏,为今后的研究提供理论和实验依据。 方法:①细胞分离纯化:贴壁细胞分离法和密度梯度离心法相结合分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞。②细胞生物学特性鉴定:倒置显微镜下观察细胞生长及形态;MTT法测定P1、P3、P6代细胞生长曲线;细胞爬片行糖原染色、碱性磷酸酶染色;免疫细胞化学染色鉴定细胞表面标记物CD31、CD44、CD45、CD90的表达;传代细胞用含地塞米松、B-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养液诱导向成骨细胞分化,Von
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