川贝母的化学成分研究与贝母属药用植物质量评价

论文摘要

贝母为一种常用中药,具有十分悠久的药用历史,始载于《神农本草经》,列为中品:“气味辛、平,无毒,主伤寒烦热。淋沥邪气,疝症,喉痹,乳难。”百合科Liliaceae中的贝母属Fritillaria植物是药用贝母的主要来源,此属全世界约有130种,主要分布于北半球的温带地区,尤以地中海北岸、伊朗、土耳其等地区分布的种类最为丰富。贝母种类繁多,在民间多种贝母属植物的鳞茎均以贝母入药,《中国药典》2005年版一部收载有川贝母、平贝母、浙贝母、湖北贝母、伊贝母等.川贝母（Fritillariacirrhosa D.Don）和梭砂贝母（Fritillaria delavayi Franch.）作为川贝母的主要基源植物,以其干燥鳞茎入药,能清热润肺,化痰止咳。用于肺热燥咳,干咳少痰,阴虚劳嗽,咯痰带血。为了进一步寻找新的天然产物成分或者活性成分,阐明川贝母药效作用的物质基础,为贝母属药用植物资源的充分利用和合理开发提供依据,建立科学的质量评价方法,我们对川贝母的两种基源植物:川贝母（F.cirrhosa D.Don）和梭砂贝母（F.delavayi Franch.）的化学成分进行了系统研究,并建立了生物碱和核苷两类成分的含量测定方法,对贝母属植物的质量评价方法作了初步的探讨,为贝母属药用植物的质量控制和品种鉴别提供科学依据。采用多种现代色谱技术进行分离纯化,从川贝母的甲醇提取物中分离得到31个化合物,综合运用理化性质和各种光谱技术(包括IR、UV、ESI-MS、HRESI-MS、1H NMR、13C NMR、DEPT、1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOESY和X-ray等),鉴定了27个化合物的结构。其中生物碱类化合物15个,分别为:垂茄次碱（demissidine,QB-3）,川贝酮碱（chuanbeinone,QB-9）,梭砂贝母酮碱（delavinone,QB-10）,贝母乙素（verticinone,QB-11）,西贝素（imperialine,QB-12）,蒲贝素B（puqienine B,QB-16）,异梭砂贝母碱（isodelavine,QB-23）,isoforticine（QB-24）,petilidine（QB-25）,贝母甲素（verticine,QB-26）,贝母辛（peimisine,QB-27）,川贝碱甲（cirrhosinine A,QB-35）,川贝碱乙（cirrhosinine B,QB-46）,垂茄次碱苷（demissidine-3-O-β-D-glucopyranosyl（1→4）glucopyranoside,QB-65）,solanidine3-O-α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-[β-D-glucopyranosyl-（1→4）]-β-D-glucopyranoside（QB-75）;有机酸类化合物2个:E-肉桂酸（E-cinnamic acid,QB-P-3）,单棕榈酸甘油酯（2-monopalmitin,QB-P-5）;核苷类化合物8个:尿嘧啶（uracil,QB-N-2）,胸嘧啶（thymine,QB-N-3）,胞苷（cytidine,QB-N-6）,肌苷（inosine,QB-N-7）,尿苷（uridine,QB-N-8）,鸟苷（guanosine,QB-N-10）,胸苷（thymidine,QB-N-11）,腺苷（adenosine,QB-N-12）;甾醇及其苷类化合物2个:β-谷甾醇（β-sitosterol,QB-P-1）,胡萝卜苷（daucosterol,QB-P-6）。其中,QB-23,QB-24,QB-35,QB-46和QB-65等5个化合物为新化合物,QB-P-3,QB-P-5,QB-N-2,QB-N-3,QB-N-6,QB-N-7,QB-N-8和QB-N-10等8个化合物为首次从贝母属中分离得到,QB-9,QB-10,QB-12,QB-16,QB-25,QB-75,QB-P-1和QB-P-6等8个化合物为首次从川贝母中分离得到。从梭砂贝母鳞茎中共分离得到33个化合物,通过化合物的理化性质和各种波谱技术鉴定了29个化合物。其中生物碱类化合物12个,分别为:川贝酮碱（chuanbeinone,LBM-11）,梭砂贝母酮碱（delavinone,LBM-12）,梭砂贝母啶碱（delavidine,LBM-14）,去氢鄂贝定碱（ebeiedinone,LBM-15）,贝母乙素（verticinone,LBM-16）,西贝素（imperialine,LBM-17）,异梭砂贝母碱（isodelavine,LBM-31）,梭砂贝母碱（delavine,LBM-41）,鄂贝定碱（ebeiedine,LBM-42）,异贝母甲素（isoverticine,LBM-46）,贝母甲素（verticine,LBM-48）,贝母辛（peimisine,LBM-50）;有机酸类化合物8个:E-3,4,5-三甲氧基肉桂酸（E-3,4,5-trimethoxycinnamic acid,BM-2）,E-对-甲氧基肉桂酸（E-p-methoxycinnamic acid,BM-3）,E-肉桂酸（E-cinnamic acid,BM-4）,E-对-羟基肉桂酸（E-p-hydroxycinnamic acid,BM-7）,E-对-羟基肉桂酸甲酯（E-p-hydroxycinnamic acid methyl ester,BM-8）,阿魏酸（ferulic acid,BM-11）,咖啡酸（caffeic acid,BM-12）,1-O-feruloylglycerol（BM-15）;核苷类化合物6个:尿嘧啶（uracil,LB-1）,胸嘧啶（thymine,LB-2）,尿苷（uridine,LB-5）,鸟苷（guanosine,LB-7）,胸苷（thymidine,LB-8）,腺苷（adenosine,LB-9）;甾醇及其苷类化合物2个:β-谷甾醇（β-sitosterol,BM-1）,胡萝卜苷（daucosterol,BM-17）;萜类化合物1个:苍术内酯Ⅲ（atractylenolideⅢ,BM-5）。其中LBM-14为新化合物,BM-2、BM-3、BM-5、BM-7、BM-8、BM-11、BM-12和BM-15等8个化合物为首次从贝母属中分离得到,LBM-15、LBM-16、LBM-31、LBM-42、LBM-46、LBM-48、LBM-50、BM-1、BM-4、BM-17、LB-1、LB-2、LB-5、LB-7、LB-8和LB-9等16个化合物为首次从梭砂贝母中分离得到。在化学成分研究的基础上,本文采用HPLC-ELSD法建立了同时测定贝母类药材中8个生物碱含量的方法,8个生物碱类成分分别为平贝碱甲（pingbeimineA）、贝母辛（peimisine）、贝母甲素（verticine）、贝母乙素（verticinone）、异梭砂贝母碱（isodelavine）、垂茄次碱苷（demissidine-3-O-β-D-glucopyranosyl（1→4）glucopyranoside）、梭砂贝母酮碱（delavinone）和川贝酮碱（chuanbeinone）;利用新建立的HPLC-ELSD分析方法对13种贝母60批次样品中的8个生物碱进行了含量测定。建立了13种贝母药材的HPLC色谱模式,并根据贝母药材中生物碱的分布特点,对贝母属植物的化学分类学进行了探讨。同时,首次建立了用HPLC-DAD法同时测定贝母类药材中9个核苷类成分含量的方法,9个核苷类成分分别为尿嘧啶（uracil）,胞苷（cytidine）,鸟嘌呤（guanine）,尿苷（uridine）,胸嘧啶（thymine）,肌苷（inosine）,鸟苷（guanosine）,胸苷（thymidine）,腺苷（adenosine）。60批次贝母样品的含量测定结果表明,核苷类成分普遍存在于各种贝母药材中,尿苷（Uridine）、鸟苷（Guanosine）和腺苷（Adenosine）为贝母类药材中主要的核苷类成分,由于核苷类化合物具有多种生物活性,因此核苷类可能为贝母类药材生物碱以外的活性成分。贝母中生物碱和核苷类成分定量分析方法的建立,对贝母类药材的质量控制、品种鉴定具有重要的参考价值,为贝母属植物的化学分类学提供新的科学依据,同时为贝母类药材的临床合理用药提供参考。本文还通过查阅大量文献,归纳总结,对贝母属植物的植物资源、传统疗效、化学成分、药理活性及质量控制研究的最新进展进行了全面综述,对有效开发、合理利用本属药用植物资源具有重要的参考价值。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一章 贝母属药用植物的化学与药理学研究进展
• 第一节 植物资源与地理分布
• 第二节 化学成分
• 第三节 药理活性
• 第四节 化学成分分析及药材质量评价
• 第五节 结语
• 参考文献
• 第二章 川贝母的化学成分研究
• 第一节 研究结果
• 第二节 新化合物的结构解析
• 第三节 实验部分
• 第四节 实验数据
• 参考文献
• 第三章 梭砂贝母的化学成分研究
• 第一节 研究结果
• 第二节 新化合物的结构解析
• 第三节 实验部分
• 第四节 实验数据
• 参考文献
• 第四章 贝母属药用植物化学成分的分析方法学研究
• 第一节 HPLC-ELSD法测定贝母属药用植物中8个生物碱类成分的含量
• 第二节 HPLC-DAD法测定贝母属药用植物中9个核苷类成分的含量
• 参考文献
• 第五章 总结与讨论
• 致谢
• 作者简历
• 附图目录
• 附图