慢性粒细胞白血病患者嗜碱性粒细胞的新探索

论文摘要

一目的众所周知,慢性粒细胞白血病患者骨髓及外周血中嗜碱性粒细胞的异常增多是其预后不良的指标。同时,干扰素α治疗慢性粒细胞白血病有效的一个标志就是嗜碱性粒细胞数量的减少。近年来,随着对浆细胞样树突状细胞（plasmacytoid dendritic cell,pDC）——干扰素专职产生细胞研究的深入,慢性粒细胞白血病患者体内浆细胞样树突状细胞的异常及其与慢性粒细胞白血病疗效、预后的关系逐渐成为关注的焦点。有动物试验研究发现,单纯从细胞形态学上所认定的嗜碱性粒细胞并不具有目前国际上所认定的嗜碱性粒细胞的分子表型。那么,慢性粒细胞白血病患者体内异常增多的嗜碱性粒细胞是真正意义上的嗜碱性粒细胞吗?它与体内的浆细胞样树突状细胞有何关系?这正是本课题研究的意义所在。二方法选择经血液学,骨髓象,染色体及分子学检查,确诊为慢性粒细胞白血病慢性期,干扰素α治疗有效,干扰素α治疗无效加速期或急变期的患者,分为三组,利用Ficoll密度梯度离心法分离三组患者骨髓单个核细胞,再将所得细胞利用聚蔗糖-泛影葡胺法（polyglucosan-diatrizoate）进行形态学意义上的“嗜碱性粒细胞”的分离,涂片染色,倒置显微镜及光镜观察细胞形态,进行嗜碱性粒细胞计数的统计学检验:利用包被了FcεRI单克隆抗体的磁珠进行免疫磁珠分选,对细胞进行进一步的纯化。之后,将所得细胞以浆细胞样树突状细胞的表型进行流式细胞仪检测,对比三组患者中所谓的“嗜碱性粒细胞”具有浆样树突状细胞表型的比例,做统计学检验判断其显著性。三结果CML-MNC在经过聚蔗糖-泛影葡胺法分离后,嗜碱性粒细胞纯度达到90%以上,瑞氏-吉姆萨染色光镜下可见直径10-14μm的单个核细胞,其细胞核内包含有浓缩的染色质,这种细胞核,我们形象的称之为“三叶草”或“奶油糕点”,胞核分叶不清楚,胞质含形状不规则、大小不等的嗜碱性颗粒。其中,急变期组或干扰素治疗无效组“嗜碱性粒细胞”计数明显较慢性期组与干扰素治疗有效组明显增加。流式细胞仪检测细胞表面标志,在这种形态学认定的“嗜碱性粒细胞”中发现具有一定数量的表达pDC表面标志的细胞,而该种标志又与国际公认的嗜碱性粒细胞的标志有着明显的区别。随着疾病进展,该种表达pDC表面标志的细胞含量明显减少。不同的疾病进展期,所占数量不同,差异有统计学意义（P＜0.05）。四结论1.慢性粒细胞白血病患者体内分离出的形态学认定的“嗜碱性粒细胞”,其含量百分比随着疾病的进展而增加,随疗效的提高而减少。2.慢性粒细胞白血病患者体内分离出的形态学认定的“嗜碱性粒细胞”,部分具有pDC的细胞表面标志。并且这种“pDC”的含量随着疾病的进展而减少,随着疗效的提高而增加。3.慢性粒细胞白血病患者体内分离出的形态学认定的“嗜碱性粒细胞”可能是由一部分真正意义上的嗜碱性粒细胞、一部分的pDC及其它目前尚未得到认识的一部分细胞组成。究竟如何,有待进一步的研究与发现。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 英文正文
• 参考文献
• 硕士期间研究成果
• 致谢
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