论文摘要
炭疽杆菌是人类历史上第一个被发现的病原菌。炭疽杆菌的研究在近几年取得了较大进展,2003年炭疽杆菌的全基因组序列向全世界发布,意味着炭疽杆菌的研究进入了一个新的发展阶段。炭疽杆菌芽胞外壁胶原样蛋白（BclA）是芽胞外壁发状菌丝的主要结构成分,也是芽胞表面的主要免疫原蛋白。从国内分离到的炭疽杆菌中克隆出BclA基因,并将已测序的BclA氨基酸序列与公布的BclA氨基酸序列进行多态性分析,发现不同炭疽杆菌菌株间BclA氨基酸序列存在规律性差异。本研究根据已发表的炭疽杆菌菌株BclA基因序列设计引物,用PCR扩增法从实验室分离的炭疽杆菌菌株MY中扩增出1119bp的BclA基因序列,然后将纯化的PCR产物按正确的阅读框架克隆入pGEX-6p-1载体中的谷胱苷肽-G-转移酶（GST）基因下游,用IPTG诱导实现其在大肠杆菌中的表达。SDS-PAGE电泳结果显示,表达的融合蛋白约为68KUa。将原核表达产物的蛋白经切胶免疫BALB/c小鼠,并以经谷胱苷肽活化的Sepharose 4B亲和层析柱纯化后的蛋白作为检测抗原,经过融合、筛选、克隆化获得稳定分泌针对BclA的单克隆抗体细胞系。蛋白转印结果表明此单抗仅与融合蛋白反应,与载体蛋白不反应。