高效液相色谱法测定食品中四种碱性染料的方法研究

论文摘要

《中华人民共和国食品卫生法》规定了允许使用的食品着色剂的种类及使用方法。继“苏丹红事件”之后,国家加大了对苏丹红染料违规使用的惩处。一些生产商为了自身利益,将注意力转移到用其它化工染料对食品进行着色。碱性菊橙、碱性玫瑰精和碱性嫩黄O和碱性桃红都是工业用化工染料而非食品添加剂,这类化工染料用于食品着色会带来一定的安全隐患,直接危害消费者的健康。本研究建立了高效液相色谱（HPLC）法同时测定食品中碱性菊橙、碱性玫瑰精和碱性嫩黄O的方法。实验考察了不同流动相体系、流动相配比、乙酸铵浓度、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响,确定了最佳色谱条件：ZORBAX SB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）；二极管阵列检测器,碱性菊橙、碱性玫瑰精和碱性嫩黄O的最佳检测波长分别为410nm、550nm和435 nm；色谱柱温度30℃,以甲醇-0.015 mol/L乙酸铵（85：15,v/v）为流动相；流速0.9 mL/min,进样量10μL。在最佳色谱条件下,建立了各物质的标准曲线,相关系数r均为0.9999；碱性菊橙、碱性玫瑰精和碱性嫩黄O的检出限分别为0.05 mg/kg、0.02 mg/kg和0.1 mg/kg。样品的加标回收率均在84.5-104.5%,方法相对标准偏差在2.5%以内,实现了4 min内对3种化合物的同时测定。本研究还建立了测定食品中碱性桃红的高效液相色谱法。考察了流动相配比、缓冲溶液pH值、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响,确定了最佳色谱条件：迪马公司C18色谱柱（4.6 mmi.d.×150 mm,5μm）;二极管阵列检测器,检测波长为520 nm；色谱柱温度30℃,以甲醇-乙酸铵（2：98,v/v）为流动相,流速为0.9 mL/min,进样量2.0μL。在最佳实验条件下,绘制碱性桃红的标准曲线,线性范围为0.320～80.00μg/mL,线性方程为y=184.34x+115.67,相关系数为r=0.9990。方法检出限为0.1mg/kg,相对标准偏差为1.9%,加标平均回收率为97.4%。研究结果表明,本实验所建立的测定食品中碱性菊橙、碱性玫瑰精、碱性嫩黄O和碱性桃红染料的高效液相色谱法,具有操作简单,快速、准确、重现性好、检出限低的特点。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 第1章 概述
• 1.1 简介
• 1.2 食品添加剂及其分类
• 1.3 着色剂及作用
• 1.3.1 天然着色剂
• 1.3.2 人工合成着色剂
• 1.4 非食品着色剂的使用及危害
• 1.4.1 碱性菊橙
• 1.4.2 碱性玫瑰精
• 1.4.3 碱性嫩黄O
• 1.4.4 碱性桃红
• 1.5 国内外对着色剂的分析现状
• 1.5.1 分光光度法
• 1.5.2 紫外吸收光度法
• 1.5.3 薄层色谱法
• 1.5.4 单扫描极谱法
• 1.5.5 电位滴定法
• 1.5.6 高效液相色谱法
• 1.5.7 液相色谱-质谱法
• 1.5.8 气相色谱-质谱法
• 1.6 本课题目的及意义
• 第2章 HPLC法测定食品中的碱性菊橙、碱性玫瑰精和碱性嫩黄O
• 2.1 高效液相色谱法简介
• 2.2 高效液相色谱仪的工作原理
• 2.3 定性和定量依据
• 2.4 实验部分
• 2.4.1 仪器与试剂
• 2.4.2 色谱条件
• 2.4.3 实验方法
• 2.4.4 仪器操作
• 2.5 结果与讨论
• 2.5.1 色谱分离类型及色谱柱的选择
• 2.5.2 检测器及检测波长的选择
• 2.5.3 流动相体系的选择
• 2.5.4 流动相洗脱方式及配比的选择
• 2.5.5 减尾剂及浓度的选择
• 2.5.6 缓冲溶液酸度的选择
• 2.5.7 柱温的选择
• 2.5.8 流速的选择
• 2.5.9 进样量的选择
• 2.5.10 干扰实验
• 2.5.11 最佳色谱条件
• 2.5.12 标准曲线及线性相关系数
• 2.5.13 精密度及检出限实验
• 2.5.14 样品前处理方法的确定
• 2.5.15 样品测定
• 2.5.16 回收率实验
• 2.5.17 标准溶液的稳定性
• 2.6 小结
• 第3章 HPLC法测定食品中的碱性桃红
• 3.1 实验部分
• 3.1.1 仪器与试剂
• 3.1.2 色谱条件
• 3.1.3 样品处理
• 3.2 结果与讨论
• 3.2.1 色谱柱及检测器的选择
• 3.2.2 检测波长的选择
• 3.2.3 流动相体系及流动相配比的选择
• 3.2.4 流动相酸度的选择
• 3.2.5 流速的选择
• 3.2.6 柱温的选择
• 3.2.7 进样量的选择
• 3.2.8 最佳色谱条件
• 3.2.9 标准曲线的测定
• 3.2.10 精密度及检出限实验
• 3.2.11 标准溶液的稳定性
• 3.2.12 样品及回收率测定
• 3.3 小结
• 第4章 结论
• 参考文献
• 致谢