论文摘要
前言间盘的退行变已经是直接或间接引起腰背部疼痛的病因，而且其患病率很高，严重影响中年人群生活质量。现在大多数学者认为，椎间盘退变的主要由间盘所在的生物力学和生物学环境共同作用的结果。很多学者都在研究通过促进间盘基质合成和／或抑制降解酶活性的分子阻止间盘退变或使间盘细胞再生来治疗腰椎间盘退变引起的慢性腰痛疾病。多西环素是四环素类抗生素，可以抑制间盘退变中的关键酶MMPs的mRNA表达及通过与酶活性位点结合直接抑制MMPs的活性，它已被广泛用于腹主动脉瘤、缺血再灌注损伤、类风湿关节炎等疾病预防治疗的实验研究中，但还未见它应用到间盘退变中报道。我们实验目的是在退变间盘中使用多西环素，观察它是否可以抑制MMP-3和MMP-13的表达，继而阻止间盘的退变。方法1、动物的来源纯种成年SD大鼠60只，雌雄不限，由中国医科大学动物部提供并饲养。2、退变模型的建立辨别大鼠第10尾椎间盘，在相邻的两尾椎上穿入交叉的克氏针，并在上下椎体对应的克氏针上绑上弹力带，使其均匀加压并使其压强达到1.3MPa，固定后可以自由活动，7天后间盘退变解除固定，分别在固定间盘中注入多西环素和生理盐水，术后1周和2周分别取材。3、HE染色和Western blot检测采用HE染色观察术后1周间盘退变的情况。采用Western blot检测术后2周退变间盘中MMP-3和MMP-13表达量。结果1、HE染色结果术后第7天，髓核细胞和胞外基质明显减少，有部分髓核细胞出现调亡现象，纤维环断裂，终板软骨陷凹增大。2、Western blot检测结果术后第14天，注入生理盐水组MMP-3，MMP-13表达量明显高于注入多西环素组MMP-3，MMP-13的表达，他们之间有统计学差异（P＜0.05）。讨论1、退变动物模型的建立HE染色证实我们采用的方法使鼠尾椎动物模型已经达到其间盘退变的目的，为研究间盘退变疾病的治疗提供了良好基础。2、Western blot检测结果的分析我们在退变间盘中注入多西环素，可以发现其MMP-3，MMP-13的表达明显低于注入生理盐水组，说明多西环素在间盘退变环境中可以抑制MMP-3和MMP-13的表达，由于金属蛋白酶是间盘退变中重要的降解酶，所以多西环素可以抑制间盘组织内的降解代谢。结论多西环素可以减少间盘退变中MMP-3，MMP-13的表达量，证实多西环素的应用可以阻止间盘的退变。