抗HIV-1单链抗体重组白喉毒素的构建与表达研究

论文摘要

重组免疫毒素被称为“生物导弹”，是目前肿瘤、自身免疫性疾病以及移植排斥等免疫治疗领域的热点研究方向之一。对于AIDS而言，由于免疫毒素能够特异性的杀伤HIV潜伏感染细胞，彻底摧毁病毒储存池，而对正常细胞毒性很低，从而成为当前HAART辅助治疗的亮点。为了获得针对HIV-1的无毒副作用且能根除体内病毒的药物，进行了重组免疫毒素的表达，期望其针对HIV病毒和感染细胞的特异杀伤作用可以最终实现抗病毒这一治疗目的。将获得的单链抗体（ScFv）基因分别代替白喉毒素DT的受体结合区以及白喉毒素DT的受体结合区和跨膜区，制备出重组毒素基因DT-ScFv，利用原核表达载体pET28a，构建了用于表达重组毒素的原核表达质粒pET-DT-hS120、pET-DTA-hS120，上述质粒转化受体菌BL21（DE3）后，经IPTG诱导，成功地表达了目的蛋白，表达量分别为21％，23％，并利用Ni-NTA金属螯合层析法对表达产物进行了纯化及复性处理。

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摘要

ABSTRACT

第一章绪论

§1.1 引言

§1.2 免疫毒素研究进展

§1.3 论文研究的目的和内容

第二章抗HIV-1重组DT毒素原核表达载体的构建

§2.1 材料与方法

§2.2 结果

§2.3 讨论

§2.4 小结

第三章抗HIV-1重组DT毒素的原核表达

§3.1 材料与方法

§3.2 结果

§3.3 讨论

§3.4.小结

第四章抗HIV-1重组DT毒素的复性和初步纯化

§4.1 材料与方法

§4.2 结果

§4.3 讨论

§4.4 小结

结论

致谢

参考文献

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